【摘要】：目的:體外培養(yǎng)大鼠下頜下腺細(xì)胞,并對(duì)其生物學(xué)特性進(jìn)行研究,為涎腺疾病的探索提供體外模型。方法:無(wú)菌條件下取7d齡Wistar大鼠雙側(cè)下頜下腺,仔細(xì)分離脂肪、包膜、神經(jīng)和血管,采用組織塊培養(yǎng)法進(jìn)行培養(yǎng)。運(yùn)用酶消化法和差速貼壁法純化細(xì)胞;免疫組化SP法檢測(cè)Cytokeratin-8(CK-8)抗體和α-Amylase抗體的表達(dá);PAS染色法檢測(cè)細(xì)胞糖原分泌;掃描電鏡(scanning electronic microscopy,SEM)觀察細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特征。結(jié)果:組織塊培養(yǎng)法可成功獲得下頜下腺細(xì)胞,免疫組化染色可見(jiàn)大部分細(xì)胞胞質(zhì)為棕黃色,提示CK-8抗體表達(dá)陽(yáng)性,α-Amylase抗體表達(dá)陽(yáng)性;PAS染色可見(jiàn)胞質(zhì)呈紫紅色;SEM可見(jiàn)細(xì)胞伸出長(zhǎng)短不一的偽足,胞核著色深,有些細(xì)胞可見(jiàn)分泌顆粒。結(jié)論:組織塊培養(yǎng)法可以成功培養(yǎng)大鼠下頜下腺細(xì)胞,并且操作簡(jiǎn)便。
[Abstract]:Objective: To study the biological characteristics of submandibular gland cells in vitro, and to provide an in vitro model for the exploration of salivary gland diseases. Methods: The submandibular gland of 7 days old Wistar rats was taken under the condition of sterility, and the fat, the envelope, the nerves and the blood vessels were carefully separated, and the culture was carried out by the tissue culture method. The cells were purified by an enzyme digestion method and a differential adhesion method. The expression of the antibody of Cytokeratin-8 (CK-8) and the antigen-Aylase was detected by SP method. The cellular glycogen secretion was detected by PAS staining. The morphological characteristics of the cells were observed by scanning electron microscopy (SEM). Results: The submandibular gland cells were successfully obtained by the tissue culture method. The cytoplasm of most of the cells was brown yellow, and the expression of CK-8 was positive, and the expression of the antigen-Aylase was positive. PAS staining showed that the cytoplasm was purplish red, and the SEM showed that the cells extended out of the pseudo-foot with different lengths. The nuclei are colored deep and some cells are visible in the secretory granules. Conclusion: The submandibular gland cells of the rat can be cultured successfully by the tissue culture method, and the operation is simple and convenient.
【作者單位】： 吉林大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院;吉林省牙發(fā)育及頜骨重塑與再生重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：吉林省直廳局項(xiàng)目(編號(hào):5139073431)
【分類號(hào)】：R782

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本文編號(hào)：2479258