【摘要】：目的:研究醋酸棉酚(gossypol acetic acid,GAA)對體外培養(yǎng)的人舌鱗癌Tca8113細胞hMLH1基因甲基化及mRNA表達的影響。方法:應(yīng)用MTT法檢測GAA對人舌癌Tca8113細胞增殖的作用。應(yīng)用巢式甲基化特異性PCR(nMSP)檢測Tca8113細胞在GAA作用48、72 h后hMLH1甲基化狀態(tài)的改變情況。應(yīng)用實時熒光定量法(RFQ-PCR)檢測Tca8113細胞在GAA作用72 h后hMLH1 mRNA的表達變化。結(jié)果:GAA作用Tca8113細胞24、48和72 h后,細胞增殖受到抑制。30、15μmol/L的GAA作用Tca8113細胞48、72 h后,hMLH1甲基化條帶的平均光度低于對照組(P0.05)。5、10、15和20μmol/L GAA作用Tca8113細胞72 h后,細胞中hMLH1 mRNA的表達水平高于對照組(P0.05)。結(jié)論:GAA能抑制Tca8113細胞增殖,能降低hMLH1基因的甲基化水平,增強hMLH1基因mRNA表達,這可能是GAA抗腫瘤作用的機制之一。
[Abstract]:Aim: to study the effects of gossypol acetate (gossypol acetic acid,GAA) on hMLH1 methylation and mRNA expression in human tongue squamous cell carcinoma (Tca8113) cells cultured in vitro. Methods: MTT assay was used to detect the effect of GAA on the proliferation of human tongue cancer Tca8113 cells. Nested methylation specific PCR (nMSP) was used to detect the changes of hMLH1 methylation in Tca8113 cells exposed to GAA for 48 h and 72 h. The expression of hMLH1 mRNA in Tca8113 cells treated with GAA for 72 h was detected by real-time fluorescence quantitative assay (RFQ-PCR). Results: after Tca8113 cells were treated with GAA for 24 h, 48 h and 72 h, the proliferation of Tca8113 cells was inhibited, and the average luminosity of hMLH1 methylation bands was lower than that of control group (P 0.05, 10, 15 and 20 渭 mol / L GAA for 72 h) after GAA treated with 30 渭 mol / L and 15 渭 mol / L GAA for 48 h and 72 h, respectively (P 0.05), 10, 15 and 20 渭 mol / L GAA treated Tca8113 cells for 72 h. The expression level of hMLH1 mRNA in the cells was higher than that in the control group (P0.05). Conclusion: GAA can inhibit the proliferation of Tca8113 cells, decrease the methylation level of hMLH1 gene and enhance the mRNA expression of hMLH1 gene, which may be one of the mechanisms of anti-tumor effect of GAA.
【作者單位】： 昆明醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院口腔頜面外科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(編號:81160326) 云南省科技計劃項目(編號:2009CD207)
【分類號】：R739.8

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本文編號：2442026