發(fā)布時間：2019-03-13 14:07

【摘要】：目的:機械外傷,腫瘤切除,感染,生理性吸收,先天畸形等因素造成頜骨缺損骨量不足在臨床上很常見,這不僅會引起功能障礙和影響美觀,而且會給各種修復(fù)方式帶來困難,尤其是種植修復(fù),成為制約種植技術(shù)發(fā)展的重要原因。修復(fù)骨缺損的治療方法主要為骨移植術(shù),目前常用的骨移植材料有自體骨,同種異體骨,異種骨,人工骨等,但目前使用的骨移植材料都各有優(yōu)缺點。因此尋找性能更優(yōu)異的骨移植材料逐漸成為研究的熱點。有實驗研究表明,不同處理方法的異體牙本質(zhì)材料都具有良好的生物相容性,包括煅燒,冷凍,脫鈣,煮沸等方法。煮沸法包括煮沸、脫脂、粉碎等步驟,相比其他方法煮沸法處理異體牙本質(zhì)方法更簡單,成本更低廉,時間短,可在臨床椅旁操作,具有一定的臨床應(yīng)用前景。本實驗通過制備顱骨缺損的動物實驗?zāi)Ｐ?評價在煮沸法的基礎(chǔ)上使用不同處理方法的未脫鈣人牙本質(zhì)的免疫原性和成骨效果。方法:1.牙本質(zhì)顆粒的制備方法:收集臨床上拔除的健康智齒及正畸減數(shù)牙,將其清洗干凈后去除表面的牙周纖維及牙髓等軟組織,用快速渦輪機磨除表面的牙結(jié)石、牙釉質(zhì)和牙骨質(zhì),在骨磨中將其粉碎成直徑約為0.25-0.5mm大小的顆粒,分成4組后按組進行煮沸2小時處理,異丙醇脫脂2小時處理,煮沸2小時及異丙醇脫脂2小時處理組及未處理組,分裝消毒后備用。2.動物分組:將40只健康的雄性成年SD大鼠,隨機分成4周和12周A、B、C、D各4組:A組植入未處理未脫鈣人牙本質(zhì)顆粒;B組植入煮沸處理未脫鈣人牙本質(zhì)顆粒;C組植入異丙醇處理未脫鈣人牙本質(zhì)顆粒;D組植入煮沸加異丙醇處理未脫鈣人牙本質(zhì)顆粒。3.動物實驗:于兩耳間用手術(shù)刀全層切開至顱骨,切口大小1cm左右。骨膜剝離器向前全層剝離粘骨膜,圍繞人字縫將其剝離成一個橢圓形的袋,充分暴露顱骨骨板。生理鹽水冷卻下用直徑1mm的小球鉆在顱骨上隨機鉆出數(shù)十個深至板障層的小孔以去顱骨的皮質(zhì)化。將4組材料(每只大鼠植入0.3ml的牙本質(zhì)顆粒)混合生理鹽水后分別隨機植入40個術(shù)區(qū),骨膜覆蓋移植材料后拉攏嚴密縫合。4、觀察方法:術(shù)后定期嚴密觀察傷口情況。于術(shù)后4周及12周分別處死動物后得到大鼠的大體標本,觀察植入術(shù)區(qū)皮膚的變化情況,是否有炎癥反應(yīng);材料表面的顏色,外形是否飽滿,質(zhì)地是否密實有無活動度,是否有纖維包裹等情況;組織學觀察新骨形成情況,纖維結(jié)締組織和炎性細胞的分布及數(shù)量,新生毛細血管的數(shù)量,多核吞噬細胞的數(shù)量。采用spss17.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)的分析,使用單因素方差分析比較各組材料在單位面積炎性細胞數(shù)、單位面積毛細血管數(shù)和單位長度多核吞噬細胞數(shù)方面是否有統(tǒng)計學差異,所有統(tǒng)計學分析均當p0.05時,表明其有統(tǒng)計學意義。結(jié)果:1.皮膚愈合良好,無炎癥反應(yīng)。取材后肉眼可見四組牙本質(zhì)顆粒均包埋于纖維中,表面有新生的毛細血管,外形呈半圓形,表面較光滑。術(shù)后4周發(fā)現(xiàn)材料質(zhì)地不堅實,觸之可有一定的活動度。術(shù)后12周發(fā)現(xiàn)各材料組質(zhì)地相比術(shù)后4周更堅實,但仍可感覺到微動。2.he染色組織學切片可觀察到術(shù)后4周的四組牙本質(zhì)顆粒被大量的纖維結(jié)締組織包裹與術(shù)后12周時無明顯區(qū)別;纖維結(jié)締組織中炎性細胞的數(shù)量術(shù)后12周時比4周更少;新生毛細血管術(shù)后12周時比4周更多;牙本質(zhì)周圍的多核巨噬細胞術(shù)后12周時和4周時無明顯區(qū)別。各組牙本質(zhì)顆粒均未見明顯的吸收,牙本質(zhì)顆粒邊緣僅可見數(shù)量較少的蟲噬狀吸收;遠離顱骨側(cè)均未見明顯的新骨形成,近顱骨側(cè)可見牙本質(zhì)顆粒與顱骨間有新骨形成,可見骨小梁形成,骨小梁之間有較多活躍的骨細胞,編織骨結(jié)構(gòu)紊亂,編織骨的下方為成熟的板層骨,是未經(jīng)破壞的原有顱骨。通過對a、b、c、d4組術(shù)后4周和12周單位面積炎性細胞數(shù)、單位面積毛細血管數(shù)、顆粒周圍多核巨噬細胞數(shù)進行統(tǒng)計學分析,各組間均未見顯著性差異(p0.05)。結(jié)論:1.無論是否經(jīng)過技術(shù)處理,人類未脫鈣的牙本質(zhì)顆粒,在異種骨創(chuàng)傷修復(fù)中均顯示出了骨傳導性。2.不同處理方法制備的人未脫鈣牙本質(zhì)顆粒,在本動物實驗中表現(xiàn)出的免疫排斥反應(yīng)程度相似,說明牙本質(zhì)本身的抗原性較弱。3.經(jīng)過除抗原處理的人類未脫鈣牙本質(zhì)顆粒,不僅具有骨傳導性和生物相容性,且吸收緩慢,空間維持作用好,有望成為一種新型的異體骨移植替代材料。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：大連醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R783.1

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