【摘要】：目的： 根面齲是危害老年人口腔健康的常見慢性細菌感染性疾病,隨著我國老年人人口數(shù)量的逐年上升,根面齲的發(fā)病率也呈明顯上升趨勢。根面齲發(fā)展速度快,能在較短時間內(nèi)發(fā)展成牙髓炎或根尖周炎,也是造成老年人牙折、牙齒喪失的重要原因,嚴重影響了老年人的日常生活。如何有效防治老年人根面齲已經(jīng)成為一個社會性問題。附著在牙根面的菌斑生物膜是根面齲發(fā)生的根本原因,預防的關(guān)鍵在于清除這部分菌斑生物膜。 光動力療法(photodynamic therapy, PDT)是利用特定波長的光激活光敏劑產(chǎn)生光化學效應(yīng),從而殺傷病原微生物或病變組織的一種新療法。近年來,光動力療法在治療感染性疾病方面的作用越來越受到重視,它可選擇性殺傷病原微生物而不傷及周圍正常組織。本研究首先利用波長532nm的半導體激光器和光敏劑血卟啉單甲醚(hematoporphyrin monomethylether, HMME)對三種主要根面齲致病菌粘性放線菌、變形鏈球菌、乳酸桿菌混懸液進行光動力作用,篩選出光動力療法的最佳效應(yīng)參數(shù),然后在體外建立早期根面齲模型,通過觀察光動力療法對菌斑生物膜的殺傷、鈣離子溶出量及根面齲表面形態(tài)影響,探討其對早期根面齲的抑制作用,為臨床應(yīng)用光動力療法抑制早期根面齲提供實驗依據(jù)。 方法： 1.粘性放線菌(A.viscosus ATCC19246)、變形鏈球菌(S.mutans UA159).乳酸桿菌(L.acidophilus ATCC4356)復蘇厭氧培養(yǎng)48h,調(diào)整濃度制備成1×108CFU/mL的混合菌懸液。 2.波長532nm、功率密度0.14W/cm2半導體激光器分別照射30s、60s、90s與不同濃度光敏劑血卟啉單甲醚(hematoporphyrin monomethylether, HMME)20μg/ml、40μg/ml、60μg/ml進行組合,對混合菌懸液進行作用,選擇出光動力療法的最佳效應(yīng)參數(shù)。 3.收集因正畸拔除的前磨牙25顆及全唾液,利用以上三種致齲菌體外構(gòu)建早期根面齲模型。用光動力療法最佳效應(yīng)參數(shù)進行作用,菌落計數(shù),評價光動力療法對早期根面齲表面菌斑生物膜的殺傷作用。 4.原子吸收分光光度計測定光動力療法作用后早期根面齲的鈣離子溶出量,評價光動力療法對早期根面齲的抑制作用。 5.掃描電子顯微鏡觀察光動力療法對根面牙骨質(zhì)表面形態(tài)影響。結(jié)果： 1.在本實驗條件下,光動力療法的最佳效應(yīng)參數(shù)為：光敏劑HMME濃度40μg/ml；波長532nm、功率密度0.14W/cm2半導體激光器連續(xù)照射時間為60s。 2.光動力療法對早期根面齲表面菌斑生物膜的殺傷實驗結(jié)果顯示,與生理鹽水陰性對照組相比：單純光敏劑組根面致齲菌數(shù)量無顯著性差異(P0.05),殺菌率僅為1.23%；激光照射組和洗必泰組均能使根面致齲菌數(shù)量減少(P0.05),殺菌率分別為56.96%和60.62%,但二者之間無顯著性差異(P0.05)；PDT組可使根面致齲菌數(shù)量顯著減少(P0.05),殺菌率高達98.70%。 3.原子吸收分光光度計測定鈣離子溶出量結(jié)果顯示,在48小時內(nèi),各組鈣離子溶出量(ug/mL)隨時間的延長而增加。與生理鹽水陰性對照組相比：單純光敏劑組各時間點的鈣離子溶出量無顯著差異(P0.05)；單純激光照射組與洗必泰陽性對照組均能使鈣離子溶出量減少(P0.05),但二者之間無顯著性差異(P0.05)；PDT組各時間點的鈣離子溶出量均顯著減少(P0.05)。PDT組與單純激光照射組相比各時間點的鈣離子溶出量仍顯著減少(P0.05)。 4.掃描電子顯微鏡圖像顯示,光動力療法組牙骨質(zhì)表面結(jié)構(gòu)完整,無細菌粘附,裂隙及陷窩減少,并有裂隙愈合痕跡,周圍見微小鈣化物沉積。進而表明,光動力療法對早期根面齲菌斑生物膜中致病菌有很好的殺菌效果,不但阻止了根面牙骨質(zhì)繼續(xù)脫礦,而且促進了根面牙骨質(zhì)的再礦化。 結(jié)論： 1.在光敏劑HMME濃度40μg/ml；波長532nm、功率密度0.14W/cm2半導體激光器連續(xù)照射60s參數(shù)下,光動力療法對體外游離的根面齲致病菌有很好的殺滅作用。 2.光動力療法可有效殺滅牙根表面菌斑生物膜中的致齲菌,可減少早期根面齲的鈣離子溶出量,不但阻止了根面牙骨質(zhì)繼續(xù)脫礦,而且促進了根面牙骨質(zhì)的再礦化。光動力療法可有效抑制早期根面齲,在根面齲的預防中具有廣泛的臨床應(yīng)用前景。
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【學位授予單位】：天津醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R781.1

【參考文獻】

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本文編號：2300219