微陣列芯片分析成牙骨質細胞礦化過程中microRNA表達譜的差異
本文選題:成牙骨質細胞 + 礦化; 參考:《口腔醫(yī)學研究》2017年02期
【摘要】:目的:誘導小鼠成牙骨質細胞礦化,研究在成牙骨質細胞礦化過程中microRNA表達譜的變化。方法:體外培養(yǎng)小鼠成牙骨質細胞系OCCM30,使用抗壞血酸、β-甘油磷酸鈉和地塞米松誘導成牙骨質細胞礦化。實時熒光定量PCR(qPCR)檢測堿性磷酸酶和骨鈣蛋白表達量變化來驗證礦化情況。應用miRNA microarray芯片技術,分析成牙骨質細胞礦化過程中miRNA表達譜的變化。QPCR對芯片結果進行驗證。結果:成功誘導了成牙骨質細胞的礦化。MiRNA microarray芯片檢測發(fā)現(xiàn)成牙骨質細胞礦化過程中miRNA表達譜出現(xiàn)明顯改變,其中上調的有4個,下調的有39個。QPCR證明芯片結果準確可靠。結論:建立了小鼠成牙骨質細胞礦化的細胞模型,應用miRNA芯片發(fā)現(xiàn)小鼠成牙骨質細胞礦化過程中差異表達的miRNA,提示這些miRNA可能參與成牙骨質細胞礦化過程的調控。
[Abstract]:Aim: to study the changes of microRNA expression profile during the mineralization of mouse cementoblasts. Methods: the mouse cementoblast cell line OCCM30 was cultured in vitro. Ascorbic acid, sodium 尾 -glycerophosphate and dexamethasone were used to induce the mineralization of cemental cells. The changes of alkaline phosphatase (ALP) and osteocalcin (BGP) expression were detected by real-time fluorescence quantitative PCR- qPCR to verify mineralization. The changes of miRNA expression profile during the mineralization of cementoblasts were analyzed by miRNA microarray chip technique. QPCR was used to verify the results of the microarray. Results: the mineralization of cementoblasts was successfully induced. MiRNA microarray analysis showed that there were obvious changes in miRNA expression profile during the mineralization of cementoblasts, among which 4 were up-regulated and 39 were down-regulated. The results of microarray were accurate and reliable. Conclusion: a cell model of mouse cementoblast mineralization was established, and miRNA microarray was used to detect the differentially expressed miRNAs during the mineralization of mouse cementoblasts, suggesting that these miRNA may be involved in the regulation of cementoblast mineralization.
【作者單位】: 武漢大學口腔醫(yī)學院口腔基礎醫(yī)學省部共建國家重點實驗室培訓基地和口腔生物醫(yī)學教育部重點實驗室;武漢大學口腔醫(yī)院牙周科;
【基金】:國家自然科學基金(編號:81170933,81570946) 湖北省自然科學基金面上項目(2015CFB259)
【分類號】:R781.4
【參考文獻】
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【二級參考文獻】
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,本文編號:1988861
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