不同正畸力作用下大鼠行為反應與牙根吸收的相關研究
發(fā)布時間:2018-03-25 13:14
本文選題:正畸力 切入點:正畸牙移動 出處:《鄭州大學》2014年博士論文
【摘要】:目的 疼痛與牙根吸收是正畸臨床常見的兩種副反應。疼痛使患者感覺不適,并由此導致臨床就診率降低;而牙根吸收造成的損害,嚴重者會引起牙齒的松動脫落。兩者均為炎癥反應,且均與正畸力大小有一定關系。不言而喻,疼痛是種疾病的表象,牙根吸收則是組織學上可檢測到的實質性傷害。能否通過對引起兩者問題的力值大小、兩者發(fā)生程度之間,以及發(fā)生后細胞層面相關物質表達水平進行分析,以期在協(xié)助降低患者疼痛不適感的同時,找到可預測加力是否過重有引起牙根吸收發(fā)生可能的指標,是正畸醫(yī)師應該關注的問題之一。 本研究通過建立大鼠左上頜第一磨牙近中移動的實驗性牙移動模型,觀察不同正畸力作用下大鼠行為反應變化、牙根吸收程度,以及免疫活性因子SP、PGE2、IL-6、cGRP的表達水平,探討在正畸牙齒移動過程中他們之間的關系,以發(fā)現(xiàn)敏感指標為正畸治療中判斷正畸力是否過大有導致牙根吸收的可能提供參考。 材料和方法 實驗材料:8周齡、體重為(260.67±20.46)g的SD雄性大鼠78只。60x60x30mm曠場試驗箱;鎳鈦拉簧,正畸測力器,樹脂釉質粘結劑,高速渦輪機,照相機,錄像機,切片機,HE染色劑,免疫組化試劑盒,光學纖維鏡等。 實驗方法:將實驗大鼠隨機分為空白組6只和實驗組72只(包括50g力值組和100g力值組各36只)。實驗組在上頜兩中切牙與左上頜第一磨牙之間制備加力裝置,近中移動左側上頜第一磨牙,施加50g或100g力,分別建立大鼠實驗性牙齒移動模型;空白組不做任何處理。觀察加力后1d、2d、3d、5d、7d、14d各時間點的行為反應。行為反應觀察項目包括:大鼠30s通過的線數(shù);5min通過的總線數(shù),5min通過的中心線數(shù),抬起行為時間,整飾行為時間,抗捕獲行為分值。并于加力后1d、3d、5d、7d、14d各時間點分別處死實驗動物,獲得帶有三顆磨牙的大鼠大體標本66塊。在標本近中(即受力側)作標記,脫鈣包埋后,近遠中向沿牙體長軸制取HE染色光鏡片及免疫組化染色標本。HE染色標本觀察第一磨牙近中根根尖區(qū)受力側牙周組織狀態(tài)及牙根吸收程度;免疫組化染色標本觀察染色程度并計測包括IL-6、PGE2、SP、cGRP等在內的細胞因子平均積分光密度表達水平,并記錄其平均積分光密度值。采用SPSS19.0統(tǒng)計學軟件對結果進行統(tǒng)計分析。 結果 1.曠野行為反應 加力后大鼠的曠野行為反應呈現(xiàn)一定的規(guī)律性。與空白組(30s:20.10±8.61,5min:100.7±34.04、center lines:13.00±11.12)對比,加力后第1d時,大鼠的前30s通過的總線數(shù)(50g:10.45±6.47,100g:11.35±6.86)、5min通過的總線數(shù)(50g:31.00±21.90,100g:29.10±17.77)及中心線數(shù)(50:2.10±2.81,100g:2.20±3.71)嚴重減少(p<0.05)。然后逐漸增加,第14d時基本回復與空白組同等水平。組間沒有差異性(p>0.05),但30s通過的線數(shù)在第3d、5d、7d時100g組少于50g組。 2.整飾行為時間和抬起行為時間 實驗組整飾行為時間第1d時較空白組(31.30±27.89)明顯增加(p=0.008),然后逐漸恢復;100g組(60.30±18.83)較50g組(40.58±9.21)整飾行為時間增加更明顯,兩力值之間1d有明顯統(tǒng)計學差異性(p=0.007)。抬起行為在第2d開始增加(50g:12.20±14.10,100g:10.80±10.87),3d時增加最為明顯(50g:24.20±24.60,100g:17.70±14.12),,第14d時仍沒有恢復到空白組水平;兩力值間沒有明顯統(tǒng)計學差異性(p>0.05),但100g組較50g組抬起行為時間少。 3.抗捕獲行為分值 在第1d、2d時,抗捕獲行為(50g:2.90±0.88、3.10±0.99,100g:3.90±0.74、4.70±1.16)較空白組(1.70±0.82)明顯增加(p=0.000),然后逐漸減少至空白水平。1d~2d間,100g組高于50g組,兩力值之間有明顯統(tǒng)計學差異性(p=0.013、0.004)。 4.光鏡組織切片觀察 第1d、2d時,牙周膜內就可見有大量的中性粒細胞、破骨細胞,毛細血管擴張并數(shù)量增加,牙周纖維斷裂紊亂等;第3d時,除可見的反應強烈的牙周炎癥外,開始可見牙根表面粗糙凹陷現(xiàn)象及窩內破骨細胞存在;第7d時牙根表面有明顯增多的吸收陷窩,窩內較多的破骨細胞存在;14d時牙根表面回復平滑表現(xiàn),有染色較深的新生牙骨質形成,牙周纖維排列整齊。100g組較50g組吸收陷窩多而深,程度較重。 5.免疫組化因子平均積分光密度觀察 免疫組化因子SP、PGE2、IL-6、cGRP染色均從第1d開始加深,不同時段呈現(xiàn)出不同的染色程度。其平均積分光密度測量統(tǒng)計曲線結果顯示,4種因子均從第1d開始增加(50g:5.41±3.22、5.77±2.87、9.16±2.85、7.40±3.84,100g:12.27±7.22、10.42±4.22、11.46±3.72、7.47±2.83),明顯高于空白組(2.96±1.64、1.80±0.85、4.28±1.85、2.18±0.80),并分別于第3d、5d、5d、7d達高峰,然后回復至空白組水平;每種因子均呈現(xiàn)出對力值反應的統(tǒng)計學顯著性差異(p<0.05);PGE2、IL-6兩物質表達水平形態(tài)走勢較為相似。 6.行為反應、免疫因子與牙根吸收的相關性 整飾行為反應變化與疼痛物質SP的表達在第1d時均具有力值上的統(tǒng)計學相關性(r=-0.523,p=0.003;r=0.537,p=0.002)。觀察期內,疼痛物質SP與cGRP表達水平總量具有相同的力值效應(r=0.316,p=0.001;r=0.288,p=0.004)。50g力值下,牙根吸收程度與cGRP表達水平在時間趨勢上具有相同的時間相關性(r=0.411,p=0.024;r=0.469,p=0.000)。 結論 1.正畸牙移動模型的建立可用于與正畸治療有關的動物實驗研究。 2.正畸牙移動模型中的大鼠行為反應變化,定量的反應了大鼠牙齒受力后的情緒變化; 3.整飾行為可以作為大鼠正畸牙移動中的局部刺激引起的疼痛反應; 4.不同正畸力大小引起大鼠行為反應和牙根吸收的程度不同,正畸力值越大行為反應改變越明顯; 5.免疫組化因子平均積分光密度值的變化,可以作為反應牙周和牙根表面的變化的客觀指標。其規(guī)律與加力時間和大小有關。 6.行為反應變化與牙根吸收、免疫組化因子SP、cGRP表達水平密切相關,行為反應一定程度上可作為牙根吸收的信號或預警,SP表達水平的檢測可以作為牙根吸收發(fā)生可能的早期預測。
[Abstract]:objective
The pain and the root resorption is two side effects. Common clinical orthodontic pain makes patients feel unwell, and thus lead to clinical treatment rate decreased; and the root resorption caused damage, severe cases can cause tooth loosening. Both the inflammatory reaction, and were associated with orthodontic force size have certain relationship. It is self-evident that pain is a kind of disease appearance, root resorption is substantial damage histologically detectable. The problem can cause both the magnitude, between the occurrence degree, and cellular level after the occurrence of related substances in the level of expression analysis, at the same time in order to reduce the pain of patients in assisting the discomfort, find whether there are overweight can predict afterburning induced root resorption is one of the possible indicators, orthodontists should pay attention to the problem.
In this study, through the establishment of rat left maxillary first molar to move the experimental tooth movement reaction model, the observed changes in the effect of orthodontic force on rat behavior, degree of root resorption, and immune activity factor SP, PGE2, IL-6, cGRP expression level, to explore the relationship between them in the process of orthodontic tooth movement in the. Find sensitive index for orthodontic treatment in judging the orthodontic force is too large due to root resorption may provide reference.
Materials and methods
Materials: 8 weeks old, 78.60x60x30mm open field test box with weight of (260.67 + 20.46) g SD, nickel titanium tension spring, orthodontic dynamometer, resin enamel binder, high-speed turbine, camera, video recorder, slicer, HE stain, immunohistochemistry kit, optical fiber mirror and so on.
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本文編號:1663276
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