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miR-9-5p靶向抑制Ambra1促進(jìn)舌癌細(xì)胞增殖

發(fā)布時間:2018-03-17 11:10

  本文選題:miR--p 切入點:自噬/芐氯素調(diào)節(jié)因子 出處:《中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報》2017年07期  論文類型:期刊論文


【摘要】:miRNAs在腫瘤中異常表達(dá),且與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。目前發(fā)現(xiàn),miR-9-5p在腫瘤中可能發(fā)揮原癌或抑癌效應(yīng),功能尚未完全闡述清楚。本文擬探討miR-9-5p在舌癌中的作用。前期研究中收集10例舌癌組織及配對的癌旁組織,實時熒光定量PCR技術(shù)檢測后發(fā)現(xiàn),miR-9-5p在舌癌組織中的表達(dá)量顯著高于癌旁組織,且其在舌癌細(xì)胞中的表達(dá)量也明顯高于正常舌上皮細(xì)胞。此外,在舌癌細(xì)胞Tca8113中過表達(dá)miR-9-5p顯著增加細(xì)胞的增殖能力。生物信息學(xué)預(yù)測及雙熒光素酶報告基因?qū)嶒炞C實,miR-9-5p可直接結(jié)合在自噬/芐氯素1調(diào)節(jié)因子1(activating molecule in beclin1-regulated autophagy,Ambra1)的3'-UTR區(qū)域,靶向抑制Ambra1表達(dá)。Western印跡結(jié)果證實過表達(dá)miR-9-5p降低Ambra1的表達(dá),反之亦然。Ambra1在舌癌細(xì)胞中的表達(dá)量顯著低于正常舌上皮細(xì)胞。Brd U實驗證實在舌癌細(xì)胞SCC-25中過表達(dá)Ambra1可顯著抑制其增殖能力;相反,使用siRNA技術(shù)沉默Ambra1能夠顯著促進(jìn)Tca8113細(xì)胞的增殖。在干預(yù)miR-9-5p的細(xì)胞中同時干預(yù)Ambra1的表達(dá),結(jié)果發(fā)現(xiàn)Ambra1可顯著逆轉(zhuǎn)miR-9-5p對舌癌細(xì)胞增殖的促進(jìn)作用?傊,miR-9-5p在舌癌中可能發(fā)揮原癌基因樣作用,通過直接靶向抑制Ambra1表達(dá)進(jìn)而促進(jìn)舌癌細(xì)胞發(fā)生增殖。
[Abstract]:The abnormal expression of miRNAs in tumor is closely related to the occurrence and development of tumor. At present, it has been found that miR-9-5p may play a role of proto or tumor suppressor in tumor. The role of miR-9-5p in tongue cancer was not fully elucidated. Ten cases of tongue cancer tissues and matched adjacent tissues were collected in the previous study. The expression of miR-9-5p in tongue cancer tissues was significantly higher than that in paracancerous tissues, and the expression of miR-9-5p in tongue cancer cells was significantly higher than that in normal tongue epithelial cells. Overexpression of miR-9-5p in Tca8113 of tongue cancer cells significantly increased cell proliferation. Bioinformatics prediction and double luciferase reporter gene experiments confirmed that miR-9-5p could directly bind to the 3H-UTR region of autophagy / benzyl chloride 1 regulatory factor 1 activating molecule in beclin1-regulated autophagy Ambra1. Western blotting showed that overexpression of miR-9-5p reduced the expression of Ambra1. The expression of. Ambra1 in tongue cancer cells was significantly lower than that in normal tongue epithelial cells. Brd U assay showed that overexpression of Ambra1 in SCC-25 of tongue cancer cells significantly inhibited the proliferation of tongue cancer cells. Silencing Ambra1 with siRNA technique could significantly promote the proliferation of Tca8113 cells. The expression of Ambra1 was also inhibited in the cells that interfered with miR-9-5p. The results showed that Ambra1 could significantly reverse the effect of miR-9-5p on the proliferation of tongue cancer cells. In conclusion, miR-9-5p may play a proto-oncogene-like role in tongue cancer, and promote the proliferation of tongue cancer cells by directly targeting the Ambra1 expression.
【作者單位】: 廣州醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院頭頸科;
【分類號】:R739.86

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