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含MDP單瓶裝自酸蝕粘接劑誘導重組Ⅰ型膠原仿生礦化的研究

發(fā)布時間:2018-02-26 05:05

  本文關鍵詞: MDP Ⅰ型膠原 仿生礦化 單瓶裝自酸蝕粘接劑 出處:《浙江大學》2017年碩士論文 論文類型:學位論文


【摘要】:目的:本實驗選取含MDP與不含MDP的單瓶裝粘接劑,研究這些粘接劑能否誘導重組Ⅰ型膠原在人工唾液中實現(xiàn)仿生礦化。方法:1、單層重組Ⅰ型膠原模型制備:將鼠尾來源的Ⅰ型膠原溶液(3mg/L,Invitrogen,美國)加入至緩沖液(pH=9.2,50mM甘氨酸、200mM KCl)中稀釋至50μg/ml,室溫下自組裝20分鐘。將3μl膠原溶液滴在400目透射電鏡鎳網上,37℃恒溫箱內過夜,次日經0.05wt%戊二醛溶液交聯(lián)1小時,取出后用去離子水清洗,室溫下干燥、備用。共制備98個鎳網,從中隨機選取2個用1%乙酸鈾負染10秒,通過透射電鏡判斷膠原是否組裝成功。2、將余下的96個鎳網隨機分為以下幾組(1)實驗組:選取3種含MDP的單瓶裝自酸蝕粘接劑作為實驗組(n=16):①Single Bond Universal(SBU,3M ESPE,美國);②Clearfil Universal Bond(CUB,可樂麗,日本);③Clearfil S3 Bond(CSB,可樂麗,日本);(2)對照組:選取2種不含MDP的單瓶裝自酸蝕粘接劑作為對照組(n=16):①Tetric N-Bond(TNB,義獲嘉偉瓦登特,列支敦士登);②G-Bond(GB,GC,日本);(3)空白對照組(n=16):將未經粘接劑處理的鎳網作為空白對照組。將上述5種粘接劑各取一滴,用小毛刷以劃"十字"的方式輕涂在鎳網表面的膠原上,并光照固化。取2ml人工唾液于培養(yǎng)皿中,將鎳網含膠原面漂浮于人工唾液上,每個培養(yǎng)皿中放置4個,37℃恒溫孵育1、4、7、14天后取出。每組每個時間點取4個樣本,樣本經去離子水清洗、干燥后用透射電鏡(TEM)觀察膠原礦化情況,并對實驗組所有14天的樣本進行選區(qū)電子衍射(SAED)觀察其晶相情況。結果:TEM結果顯示,TNB組、GB組及空白對照組的所有樣本均未出現(xiàn)膠原礦化。SBU組1天的樣本便能觀察到膠原開始礦化,7天和14天的樣本可觀察到大部分膠原已經礦化,并呈纖維內礦化。CSB組1天樣本未見礦化,而4天的樣本中可見部分膠原出現(xiàn)礦化,7天和14天的樣本也同樣觀察到膠原纖維內礦化的出現(xiàn)。CUB組1、4、7天的樣本均未發(fā)現(xiàn)礦化,僅在14天的樣本中觀察到少量膠原礦化。SAED的結果提示,沉積在膠原纖維內的礦物質為羥基磷灰石晶相結構。結論:本研究所采用的含MDP單瓶裝自酸蝕粘接劑均可以誘導重組Ⅰ型膠原實現(xiàn)仿生礦化,但其礦化能力各有差異。
[Abstract]:Objective: to select a single bottle adhesive containing MDP and no MDP. To study whether these binders can induce recombinant type I collagen to realize biomimetic mineralization in artificial saliva. Methods: 1: 1, monolayer recombinant type 鈪,

本文編號:1536608

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