發(fā)布時間：2016-10-25 18:44

  本文關(guān)鍵詞：云南白藥對人牙髓干細胞成牙本質(zhì)向分化影響的動物實驗研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《昆明醫(yī)科大學》 2015年

云南白藥對人牙髓干細胞成牙本質(zhì)向分化影響的動物實驗研究

殷欣桐  

【摘要】：[目的]體外分離培養(yǎng)獲得人牙髓干細胞(human dental pulp stem cells, hDPSCs),與云南白藥復合于HA/TCP (hydroxyapatite/tricalcium phosphate)支架上,將復合體植入裸鼠體內(nèi),研究云南白藥對hDPSCs在體內(nèi)成牙本質(zhì)向分化的影響,為云南白藥應用于牙髓組織修復提供實驗依據(jù)。[方法]體外分離培養(yǎng)人牙髓細胞(human dental pulp cells, hDPCs),取原代或第1代hDPCs,單克隆化培養(yǎng)獲得hDPSCs,通過流式細胞儀檢測hDPSCs表面特異性抗原標志物并進行成骨及成脂誘導鑒定其干細胞特性。將hDPSCs與HA/TCP進行體外復合培養(yǎng)后分為3組,云南白藥組加入含10μg/ml云南白藥的10%FBS的α-MEM培養(yǎng)液,陽性對照組加入含100ng/ml的重組人骨形成蛋白-2(Recombinant Human Bone Morphogenetic Protein-2, rhBMP-2)的10%FBS的α-MEM培養(yǎng)液,空白對照組加入含10%FBS的α-MEM培養(yǎng)液。體外復合培養(yǎng)1周后植入裸鼠背部皮下,8周后取出復合物,采用HE染色觀察組織學形態(tài)的變化,免疫組織化學(immunohistochemistry, IHC)檢測成牙本質(zhì)相關(guān)的特異性蛋白骨鈣素(Osteocalcin,OC)、牙本質(zhì)涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein, DSPP)的蛋白表達情況,qRT-PCR檢測成牙本質(zhì)相關(guān)的特異性蛋白OC、DSPP的基因表達情況,觀察動物體內(nèi)條件下云南白藥對HA/TCP支架上培養(yǎng)的hDPSCs向成牙本質(zhì)分化的影響,并對實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析。[結(jié)果]1、單克隆純化培養(yǎng)獲得的hDPSCs,經(jīng)流式細胞儀檢測細胞表面標志物STRO-1、CD146、CD29、CD105呈陽性表達,CD34, CD45呈陰性表達；經(jīng)成骨誘導有礦化結(jié)節(jié)形成,成脂誘導有脂滴形成。2、植入動物體內(nèi)的復合物經(jīng)HE染色組織學觀察可見支架表面及孔隙內(nèi)有新生基質(zhì)樣物質(zhì)、成牙本質(zhì)樣細胞和微血管形成,云南白藥組與陽性對照組均較空白對照組明顯；未見牙髓牙本質(zhì)復合體形成；支架有部分的降解。3、免疫組織化學結(jié)果顯示云南白藥組與陽性對照組OC、DSPP為陽性表達,空白對照組為陰性表達；OC的表達量云南白藥組低于陽性對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),云南白藥組與陽性對照組均高于空白對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05); DSPP的表達量云南白藥組與陽性對照組均高于空白對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),云南白藥組與陽性對照組之間無明顯差異(P0.05)。4、qRT-PCR結(jié)果顯示：OC的表達量云南白藥組高于空白對照組與陽性對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05); DSPP的表達量云南白藥組與陽性對照組均高于空白對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),云南白藥組與陽性對照組之間無明顯差異(P0.05)。[結(jié)論]1、本實驗通過克隆化培養(yǎng)所獲得細胞為hDPSCs,具有成骨、成脂向分化能力。2、10μg/ml的云南白藥對植入動物體內(nèi)的hDPSCs-HA/TCP復合物有誘導hDPSCs成牙本質(zhì)向分化的作用。

【關(guān)鍵詞】：
【學位授予單位】：昆明醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R781
【目錄】：

下載全文 更多同類文獻

CAJ全文下載

(如何獲取全文？ 歡迎：購買知網(wǎng)充值卡、在線充值、在線咨詢)

CAJViewer閱讀器支持CAJ、PDF文件格式

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 熊華翠;陳柯;黃義彬;劉彩奇;;人根尖乳頭干細胞生成牙髓牙本質(zhì)復合體的實驗研究[J];南方醫(yī)科大學學報;2013年10期

2 董金山;段晴月;文軍;金超威;郝靖惠;陸群;;骨髓間充質(zhì)干細胞向成牙本質(zhì)樣細胞分化的體外實驗研究[J];牙體牙髓牙周病學雜志;2010年04期

3 吳家媛;倪龍興;牛忠英;;根尖牙乳頭干細胞的研究現(xiàn)狀[J];牙體牙髓牙周病學雜志;2011年07期

4 郭紅延,吳補領(lǐng),郭希民,楊成,徐蓬,王常勇;重建牙本質(zhì)-牙髓復合體樣結(jié)構(gòu)的實驗研究[J];中華口腔醫(yī)學雜志;2005年06期

5 劉路;韋曦;凌均棨;吳莉萍;;堿性成纖維細胞生長因子和骨形成蛋白2在牙源性細胞分化中的表達及意義[J];中華口腔醫(yī)學研究雜志(電子版);2011年01期

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 余曉宏;云南白藥對體內(nèi)植入人牙周膜成纖維細胞-Bio-Oss Collagen成骨分化的組織學研究[D];昆明醫(yī)科大學;2014年

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 徐玲;張富強;蔣欣泉;;牙組織工程干細胞的研究進展[J];國際口腔醫(yī)學雜志;2009年05期

2 王嚇勇;彭彬;;牙髓鈣化機制及治療的研究進展[J];廣東牙病防治;2012年08期

3 張桂蘭;安虹;張超;;自適應性改變樁核材料的三維有限元模型[J];分子影像學雜志;2013年01期

4 張文萍;陳瑞揚;;牙髓鈣化形成的原因探討[J];臨床口腔醫(yī)學雜志;2008年05期

5 王燕萍;曹靈;于金華;;牙髓干細胞生物學性能影響因素的研究進展[J];口腔生物醫(yī)學;2013年03期

6 董金山;郝靖惠;段晴月;楊博;白慶霞;張艷;陸群;;經(jīng)典Wnt通路調(diào)節(jié)骨髓間充質(zhì)干細胞向成牙本質(zhì)樣細胞的分化[J];實用口腔醫(yī)學雜志;2012年06期

7 張富強;傅遠飛;吳偉;翁雨來;李靜;張秀麗;;豬牙乳頭細胞與β-磷酸三鈣支架構(gòu)建牙髓牙本質(zhì)復合體樣結(jié)構(gòu)[J];中國組織工程研究與臨床康復;2008年06期

8 王健平;王本材;賈鑫;;納米羥基磷灰石和氫氧化鈣對成牙本質(zhì)細胞活性影響的比較[J];中國組織工程研究;2012年03期

9 張萍;朱聰惠;張綱;裘松波;譚穎徽;;牙髓干細胞及其應用前景的研究進展[J];西部醫(yī)學;2011年06期

10 于金華;史俊南;金巖;;牙齒再生的研究(續(xù))[J];牙體牙髓牙周病學雜志;2007年08期

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 于金華;牙髓干細胞形成牙體組織能力及其制備嵌合體牙齒的實驗研究[D];第四軍醫(yī)大學;2007年

2 韓春;牙根發(fā)育期相關(guān)間充質(zhì)干細胞生物學特性的研究[D];第四軍醫(yī)大學;2009年

3 汪銀雄;用牙髓干細胞構(gòu)建牙齒樣結(jié)構(gòu)的實驗研究[D];第四軍醫(yī)大學;2009年

4 王疆;體外磷灰石晶體礦化模型構(gòu)建及應用的研究[D];第四軍醫(yī)大學;2009年

5 徐穩(wěn)安;骨髓來源細胞在小鼠牙髓再血管化過程中的作用[D];南方醫(yī)科大學;2014年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張萍;人牙髓干細胞向成牙本質(zhì)細胞定向分化過程中miRNAs表達譜篩選及鑒定的實驗研究[D];第三軍醫(yī)大學;2011年

2 宮坤;大鼠牙囊細胞分離培養(yǎng)及生物學特性的體外研究[D];遼寧醫(yī)學院;2011年

3 趙亞晶;計算機輔助組織工程中三維重建技術(shù)研究[D];哈爾濱工業(yè)大學;2007年

4 黃楊;牙本質(zhì)基質(zhì)—富血小板血漿凝膠構(gòu)建牙髓組織工程支架的初步研究[D];廣西醫(yī)科大學;2012年

5 賈謙;堿性成纖維細胞因子對牙髓干細胞礦化能力影響及機制研究[D];第四軍醫(yī)大學;2012年

6 郝靖惠;骨髓間充質(zhì)干細胞對牙髓損傷的修復及經(jīng)典Wnt通路在其中的作用的體內(nèi)研究[D];第四軍醫(yī)大學;2012年

7 吳桂堂;EGF與bFGF在人牙髓干細胞增殖分化中的作用[D];瀘州醫(yī)學院;2012年

8 王燕萍;雌激素缺乏對大鼠牙髓干細胞增殖、定向分化的影響及機制研究[D];南京醫(yī)科大學;2013年

9 謝蔓菁;犬自體富血小板血漿凝膠析出液對骨髓間充質(zhì)干細胞遷移作用體外研究[D];廣西醫(yī)科大學;2013年

10 徐娜;Smurf1介導的對Runx2表達調(diào)控在牙髓干細胞向成牙本質(zhì)細胞分化中的作用[D];第四軍醫(yī)大學;2013年

【二級參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 孫茹;趙立君;楊熹潔;邴國強;;云南白藥對大鼠骨骼肌急性損傷后炎癥反應和衛(wèi)星細胞再生的影響[J];吉林大學學報(醫(yī)學版);2009年06期

2 涂小麗;劉宏偉;巖井康智;隈部俊二;相川文子;;體外培養(yǎng)骨髓基質(zhì)細胞在珊瑚羥磷灰石上生長的表面形態(tài)觀察[J];南方醫(yī)科大學學報;2007年05期

3 羅琪;云南白藥對血小板活化的研究[J];福建中醫(yī)學院學報;2004年02期

4 劉興文;Platelet-rich Plasma(PRP)在骨組織再生中的應用[J];國外醫(yī)學.生物醫(yī)學工程分冊;2003年06期

5 趙銘;鄭啟新;王金光;王運濤;郝杰;;PLGA仿生礦化對骨髓基質(zhì)干細胞黏附率的影響[J];國際生物醫(yī)學工程雜志;2006年01期

6 高進;裸鼠建立的過程及其在腫瘤異種移植中的作用(綜述)[J];國外醫(yī)學(腫瘤學分冊);1981年02期

7 王勤濤,吳織芬,董廣英,史俊南;流式細胞技術(shù)分析骨形成蛋白對人牙周膜細胞增殖和分化的影響[J];華西口腔醫(yī)學雜志;1999年03期

8 司曉輝,劉正;重組人骨形成蛋白2對人牙周膜成纖維細胞的生物學作用[J];華西口腔醫(yī)學雜志;2002年01期

9 許增祿;顯示膠原及其類型的苦味酸天狼星紅─偏振光方法[J];基礎(chǔ)醫(yī)學與臨床;1996年01期

10 宋益民,陳西廣,唐學璽,劉成圣,孟祥紅,于樂軍;卡托普利緩釋微球的制備及其性能研究[J];解放軍藥學學報;2005年01期

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 馬杰;生物活性玻璃的制備及其組織性能研究[D];山東大學;2007年

2 王彥亭;云南白藥主要成分的骨形成作用研究[D];昆明醫(yī)學院;2007年

3 黃永玲;牙周韌帶細胞與骨髓基質(zhì)細胞促進牙周組織再生能力的比較研究[D];福建醫(yī)科大學;2010年

4 羅紅燦;云南白藥對類風濕性關(guān)節(jié)炎大鼠CD4+CD25+T細胞作用研究[D];昆明醫(yī)科大學;2012年

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 鄧蔓菁,金巖,史俊南,聶鑫,劉源,趙宇,趙守亮,Smith AJ;誘導成牙本質(zhì)樣細胞在體內(nèi)外的礦化研究[J];牙體牙髓牙周病學雜志;2003年08期

2 張蓉;牙本質(zhì)非膠原蛋白與第三期牙本質(zhì)的形成[J];牙體牙髓牙周病學雜志;1998年04期

3 顧淑萍;牙本質(zhì)非膠原蛋白及其在礦化中的作用[J];國外醫(yī)學.口腔醫(yī)學分冊;1997年04期

4 張蓉,Gay Smith,Alastair J Sloan,Paul R Cooper,趙守亮,Athony J Smith;牙本質(zhì)胞外基質(zhì)對人血管內(nèi)皮細胞增殖的影響[J];牙體牙髓牙周病學雜志;2004年06期

5 杜建新;王效英;楊丕山;;骨形成蛋白2在牙本質(zhì)再生組織工程中的研究進展[J];臨床口腔醫(yī)學雜志;2012年03期

6 郝建軍,上海第二醫(yī)科大學上海市口腔醫(yī)學研究所;牙本質(zhì)特異性蛋白的分子生物學研究進展[J];牙體牙髓牙周病學雜志;1998年04期

7 王曉春;梁景平;;基質(zhì)金屬蛋白酶和基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制劑在牙本質(zhì)-牙髓復合體中的研究進展[J];牙體牙髓牙周病學雜志;2007年03期

8 徐曉;;靜脈內(nèi)給類固醇在成年鼠磨牙牙本質(zhì)形成中的影響[J];國外醫(yī)學.口腔醫(yī)學分冊;1990年05期

9 趙大為;牙本質(zhì)特異性蛋白的研究[J];牙體牙髓牙周病學雜志;1997年01期

10 李玉成,朱文忠;牙本質(zhì)礦化過程中的鈣離子轉(zhuǎn)運[J];牙體牙髓牙周病學雜志;2003年07期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 張蓉;高添;謝依霞;馮建全;;磷離子可通過牙本質(zhì)涎磷蛋白調(diào)控牙本質(zhì)的形成[A];全國第八次牙體牙髓病學學術(shù)會議論文匯編[C];2011年

2 陳新梅;孫瑜;譚紅;;甲狀旁腺機能低下對大鼠牙本質(zhì)形成的影響[A];2007年第七次全國牙體牙髓病學學術(shù)會議論文集[C];2007年

3 李玉成;于金華;史俊南;金巖;;組織工程化具有一定形狀與大小的牙根組織的可行性研究[A];2007年第七次全國牙體牙髓病學學術(shù)會議論文集[C];2007年

4 朱曉茹;趙守亮;唐榮銀;張蓉;李玉成;;采用人牙切片器官培養(yǎng)的方法研究尼莫地平對牙本質(zhì)形成的影響[A];2007年第七次全國牙體牙髓病學學術(shù)會議論文集[C];2007年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 陳興興;MEPE蛋白質(zhì)裂解活化在牙本質(zhì)形成中的作用和機制研究[D];第四軍醫(yī)大學;2013年

2 白�；�;蒙古族兩種牙齒發(fā)育相關(guān)疾病的致病基因研究[D];內(nèi)蒙古大學;2010年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 殷欣桐;云南白藥對人牙髓干細胞成牙本質(zhì)向分化影響的動物實驗研究[D];昆明醫(yī)科大學;2015年

2 孫瑜;人甲狀旁腺激素1-34對牙本質(zhì)形成和礦化影響的實驗研究[D];四川大學;2005年

3 劉南霞;富血小板纖維蛋白對牙髓組織再生性影響的研究[D];第四軍醫(yī)大學;2013年

4 吳甘茶;PHEX在小鼠磨牙牙胚發(fā)育的表達及其抗體抑制牙本質(zhì)生成的實驗研究[D];福建醫(yī)科大學;2008年

相關(guān)機構(gòu)

>昆明醫(yī)科大學

>福建醫(yī)科大學

>四川大學

>第四軍醫(yī)大學

>內(nèi)蒙古大學

相關(guān)作者

>殷欣桐 >陳興興

>白海花 >孫瑜

>吳甘茶 >劉南霞

《中國學術(shù)期刊（光盤版）》電子雜志社有限公司
同方知網(wǎng)數(shù)字出版技術(shù)股份有限公司
地址：北京清華大學 84-48信箱 大眾知識服務
京ICP證040441號
互聯(lián)網(wǎng)出版許可證 新出網(wǎng)證（京）字008號
出版物經(jīng)營許可證 新出發(fā)京批字第直0595號

訂購熱線：400-819-9993 010-62982499
服務熱線：010-62985026 010-62791813
在線咨詢：
傳真：010-62780361
京公網(wǎng)安備11010802020475號

  本文關(guān)鍵詞：云南白藥對人牙髓干細胞成牙本質(zhì)向分化影響的動物實驗研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

，

本文編號：153296