本文關(guān)鍵詞：咀嚼負(fù)荷改變對(duì)幼兔髁突軟骨及軟骨下骨影響的實(shí)驗(yàn)研究

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【摘要】：目的本文通過建立咀嚼負(fù)荷降低的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?探討咀嚼負(fù)荷的改變對(duì)幼兔髁突軟骨發(fā)育和髁突軟骨下骨超微結(jié)構(gòu)的影響,研究軟骨細(xì)胞及軟骨下骨中BrdU標(biāo)記的敏感性。 方法實(shí)驗(yàn)一選取出生10d齡的32只幼兔喂食固體顆粒飼料,實(shí)驗(yàn)1組每次處死前的1周,每天每只幼兔注射BrdU50mg/kg,實(shí)驗(yàn)2組每天每只兔子注射BrdU50mg/kg,連續(xù)2周后停止注射,分別于實(shí)驗(yàn)開始后的第2、4、6、8周,每組處死4只。實(shí)驗(yàn)二、三、四選取10d齡的32只幼兔,隨機(jī)分為喂食固體硬食組和喂食粉末軟食組。連續(xù)2周每天每只腹腔注射BrdU (50mg/kg),在2、4、6、8周時(shí)每組處死4只幼兔,HE觀察組織形態(tài)學(xué)變化測(cè)量軟硬組髁突厚度變化,免疫組化檢測(cè)BrdU、Ihh、PTHrP表達(dá),顯微CT觀察軟骨下骨的變化。 結(jié)果 1、通過改變食物軟硬程度能夠建立穩(wěn)定地幼兔早期髁突軟骨及軟骨下骨咀嚼負(fù)荷不同的動(dòng)物模型。 2.50mg/kgBrdU連續(xù)注射1周既能有效標(biāo)記,又能避免試劑的浪費(fèi)。對(duì)于幼兔長(zhǎng)期檢測(cè)跟蹤髁突軟骨干細(xì)胞的示蹤標(biāo)記時(shí),本次實(shí)驗(yàn)中BrdU并不能長(zhǎng)期保留。 3、咀嚼負(fù)荷的變化可以引起幼兔髁突軟骨層厚度的改變。髁突軟骨前部厚度硬食組明顯高于軟食組,在中部無明顯差異,髁突軟骨后部厚度軟食組高于硬食組。 4、咀嚼負(fù)荷的變化導(dǎo)致BrdU的敏感性差異。BrdU免疫組化染色顯示,發(fā)育期髁突軟骨各層及軟骨下骨骨髓腔內(nèi)均有BrdU陽性標(biāo)記,前部的增殖層表送最顯著。第2周,硬食組在前、中、后3個(gè)部位的BrdU陽性率都高于軟食組；第6周,軟食組的中、后部位的陽性率高于硬食組；第8周,軟硬組均檢測(cè)不到陽性細(xì)胞。 5、 Ihh/PTHrP對(duì)軟骨的增殖起重要調(diào)節(jié)作用,在咀嚼負(fù)荷降低的模式中,兩者啟動(dòng)分化的時(shí)機(jī)存在一定的先后順序。Ihh的表達(dá)在第2周時(shí)首先增高,隨后第4周出現(xiàn)PTHrP表達(dá)的一個(gè)高峰期 6、咀嚼負(fù)荷的改變可引起幼兔髁突軟骨下骨ROI區(qū)域的超微結(jié)構(gòu)變化。第4周軟食組的骨小梁厚度(Tb.Th)、骨體積(BV)、骨小梁數(shù)量(Tb.N)相比較硬食組有顯著性降低,骨小梁分離度(Tb.Sp)較硬食組顯著升高(P0.05),BrdU陽性細(xì)胞數(shù)定性分析硬食組多于軟食組。第8周,各測(cè)量指標(biāo)在兩組間均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,BrdU陽性細(xì)胞數(shù)定性分析軟食組多于硬食組。 結(jié)論軟食組在低咀嚼力刺激下,幼兔髁突軟骨細(xì)胞增殖啟動(dòng)較慢。適當(dāng)?shù)木捉缐毫δ艽龠M(jìn)髁突軟骨細(xì)胞的增殖,咀嚼負(fù)荷對(duì)下頜髁突軟骨下骨超微結(jié)構(gòu)也有一定的影響,兩者同時(shí)還受基因等內(nèi)部因素影響。
【學(xué)位授予單位】：浙江中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R783.5

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1149436