本文關(guān)鍵詞：小鼠Sema3A基因過表達慢病毒載體的構(gòu)建與鑒定

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【摘要】：目的構(gòu)建小鼠Sema3A基因過表達慢病毒載體。方法通過體外合成小鼠全長Sema3A c DNA,采用Gateway技術(shù)將其基因插入到p Down-m Sema3A-IRES/EGFP質(zhì)粒中,再交換重組獲得重組質(zhì)粒p LV/EXPNZ-puro-m Sema3A-IRES/EGFP,經(jīng)過測序鑒定后,包裝與濃縮慢病毒載體p LV(Exp)-Puro-CMV-m Sema3A-IRES/EGFP,最后重組慢病毒載體轉(zhuǎn)染293T細胞獲得病毒液。結(jié)果重組慢病毒載體11 538 bp,測序結(jié)果證實Sema3A基因共2 319 bp正確插入帶有EGFP的載體中,成功構(gòu)建小鼠Sema3A基因過表達載體。結(jié)論成功構(gòu)建小鼠慢病毒載體p LV(Exp)-Puro-CMV-m Sema3A-IRES/EGFP,為該基因在特定細胞內(nèi)過表達株的篩選奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】： 遼寧省口腔醫(yī)學(xué)研究所口腔正畸學(xué)研究室 中國醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院正畸科;遼寧省口腔醫(yī)學(xué)研究所口腔頜面外科學(xué)研究室 中國醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院口腔頜面外科;
【關(guān)鍵詞】： SemaA 慢病毒載體
【基金】：遼寧省科技廳(2012225015)
【分類號】：R783.5
【正文快照】： 正畸牙移動離不開張力側(cè)牙槽骨增生為主和壓力側(cè)牙槽骨吸收為主的骨改建過程,而這一過程中如何維持成骨過程與破骨過程的動態(tài)平衡的骨穩(wěn)態(tài)十分重要。在骨組織改建的過程中,一些細胞因子和分泌蛋白通過作用于成骨或者破骨的不同環(huán)節(jié)而具有一定的骨保護功能,如轉(zhuǎn)化生長因子β[1]

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本文編號：1073225