東鄉(xiāng)族和漢族患齲者唾液微生物群落結(jié)構(gòu)研究
發(fā)布時(shí)間:2017-10-14 06:34
本文關(guān)鍵詞:東鄉(xiāng)族和漢族患齲者唾液微生物群落結(jié)構(gòu)研究
更多相關(guān)文章: 東鄉(xiāng)族 齲病 唾液 高通量測(cè)序 微生物群落結(jié)構(gòu)
【摘要】:目的:通過(guò)Illumina Miseq高通量測(cè)序平臺(tái)對(duì)甘肅東鄉(xiāng)族和漢族有齲者及無(wú)齲者唾液微生物群落結(jié)構(gòu)進(jìn)行研究,分析東鄉(xiāng)族及漢族唾液微生物物種豐度及結(jié)構(gòu)的異同,并分析齲病核心微生物及齲病、民族相關(guān)菌屬,進(jìn)一步分析齲病的可能病因,對(duì)相應(yīng)的預(yù)防和治療措施進(jìn)行指導(dǎo),以減少齲病的發(fā)病率及患病率,從而提高當(dāng)?shù)鼐用竦纳钯|(zhì)量。方法:基于Illumina Miseq高通量測(cè)序方法,以28例甘肅東鄉(xiāng)族及漢族個(gè)體為研究對(duì)象[分為4組:東鄉(xiāng)有齲組(DC組),東鄉(xiāng)無(wú)齲組(DH組),漢族有齲組(HC組),漢族無(wú)齲組(HH組)],收集唾液樣本并提取DNA,16S rRNA基因擴(kuò)增并進(jìn)行高通量測(cè)序,利用Mothur、MEGAN4、Cluster 3.0和Java Treeview等軟件進(jìn)行細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)及多樣性的差異分析。結(jié)果:(1)、本研究中優(yōu)質(zhì)樣本共20例,共得到252,157條平均長(zhǎng)度約為225bp的優(yōu)質(zhì)序列,平均每個(gè)樣本含12,608條優(yōu)質(zhì)序列。(2)、本研究中共檢測(cè)到12,751個(gè)OTUs,可分類至28個(gè)門,319個(gè)屬。東鄉(xiāng)族唾液樣本一共得到7,013個(gè)OTUs(DC組:4,544個(gè)OTUs,DH組:2,469個(gè)OTUs),歸屬于26個(gè)門(DC組:25個(gè),DH組:23個(gè)),250個(gè)屬(DC組:219個(gè),DH組:153個(gè));漢族唾液樣本一共得到5,738個(gè)OTUs(HC組:2,751個(gè)OTUs,HH組:2,987個(gè)OTUs),歸屬于28個(gè)門(HC組:25個(gè),HH組:23個(gè)),218個(gè)屬(HC組:171個(gè),HH組:176個(gè))。(3)、α多樣性指數(shù)分析中,Chao/Ace大于0.5,Simpson指數(shù)均小于0.2,Shannon指數(shù)均大于2.5,且Coverage大于0.94。東鄉(xiāng)族有齲無(wú)齲及漢族有齲無(wú)齲有著相似的多樣性指數(shù)。(4)、主成分分析顯示,DC組、DH組、HC組和HH組的微生物主成分各自集中但是有交集,說(shuō)明群落結(jié)構(gòu)存在一定差異但是差異不大。(5)、差異菌屬:DC和HC組間,17個(gè)菌屬含量有差異,優(yōu)勢(shì)菌屬中,放線菌屬(Actinomyces)、纖毛菌屬(Leptotrichias)和棒狀桿菌屬(Corynebacterium)在DC組低于HC組;DH和HH組間,5個(gè)菌屬存在差異,優(yōu)勢(shì)菌屬中,放線桿菌屬在DH組高于HH組;DH和DC組之間共有16個(gè)菌屬存在差異,優(yōu)勢(shì)菌屬中,奈瑟菌屬(Neisseria)在DH組高于DC組,纖毛菌屬在DH組低于DC組;HH和HC組間,4個(gè)菌屬存在差異,優(yōu)勢(shì)菌屬中,羅氏菌屬(Rothia)在HH組高于HC組。(6)、核心微生物分析顯示,齲病樣本中序列比例大于1%的有35個(gè)菌屬,其中奈瑟菌屬、鏈球菌屬(Streptococcus)、放線菌屬、纖毛菌屬、放線桿菌屬(A ctinobacillus)在所有齲病樣本中都存在;無(wú)齲樣本中序列比例大于1%的有18個(gè)菌屬,其中奈瑟菌屬、放線菌屬、放線桿菌屬、鏈球菌屬、纖毛菌屬、孿生菌屬(Gemella)在所有無(wú)齲樣本中都存在。結(jié)論:本文從微生態(tài)的宏觀角度,分析了甘肅東鄉(xiāng)族和漢族的唾液微生物與齲病發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。(1)說(shuō)明了唾液中的微生物數(shù)目和種類很多,種類很復(fù)雜;(2) Illumina Miseq測(cè)序技術(shù)是一種先進(jìn)的、完善的測(cè)序平臺(tái),可以滿足科研需求;(3)證實(shí)了在齲病和無(wú)齲者唾液中,均有核心微生物組存在;(4)在門水平和屬水平上,有齲者與無(wú)齲者唾液微生物結(jié)構(gòu)均有差異,有齲者的微生物種類較無(wú)齲者稍有減少;有些菌屬的含量與齲病的發(fā)病率有正相關(guān)關(guān)系,反之亦然;(5)民族之間微生物群落結(jié)構(gòu)存在一定差異,但是相對(duì)于環(huán)境等因素,該因素引起的差異較小。
【關(guān)鍵詞】:東鄉(xiāng)族 齲病 唾液 高通量測(cè)序 微生物群落結(jié)構(gòu)
【學(xué)位授予單位】:蘭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R781.1
【目錄】:
- 英文縮略詞表3-4
- 中文摘要4-6
- Abstract6-11
- 第一章 前言11-15
- 1.1 齲病概述11-12
- 1.2 致齲菌檢測(cè)方法12-13
- 1.3 東鄉(xiāng)族概況及齲病流行病學(xué)調(diào)查13-14
- 1.4 課題背景14-15
- 第二章 實(shí)驗(yàn)材料和方法15-22
- 2.1 材料15-16
- 2.1.1 主要試劑15
- 2.1.2 主要材料和儀器15-16
- 2.2 方法16-22
- 2.2.1 研究對(duì)象16
- 2.2.2 采樣方法16
- 2.2.3 DNA提取16-18
- 2.2.4 16S rRNA基因擴(kuò)增及高通量測(cè)序18-19
- 2.2.5 數(shù)據(jù)分析19-22
- 2.2.5.1 質(zhì)量控制19-20
- 2.2.5.2 群落結(jié)構(gòu)分析20-21
- 2.2.5.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析21-22
- 第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析22-45
- 3.1 樣本資料22-23
- 3.2 唾液微生物全基因組DNA的提取23-25
- 3.3 口腔微生物多樣性25-29
- 3.3.1 序列信息25-26
- 3.3.2 口腔微生物多樣性26-28
- 3.3.3 主成分分析28-29
- 3.4 發(fā)育樹(shù)的構(gòu)建29-31
- 3.4.1 東鄉(xiāng)族系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)的構(gòu)建29-30
- 3.4.2 漢族系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)的構(gòu)建30-31
- 3.5 核心微生物組分析31-34
- 3.5.1 齲病組核心微生物組分析32-33
- 3.5.2 無(wú)齲組核心微生物組分析33-34
- 3.6 唾液微生物群落結(jié)構(gòu)與齲病和民族差異的關(guān)系分析34-45
- 3.6.1 有無(wú)齲東鄉(xiāng)族和漢族在門水平上的差異34-37
- 3.6.2 有無(wú)齲東鄉(xiāng)族和漢族在屬水平上的差異37-45
- 3.6.2.1 有齲組東鄉(xiāng)族和漢族在屬水平上的差異38-39
- 3.6.2.2 無(wú)齲組東鄉(xiāng)族和漢族在屬水平上的差異39-40
- 3.6.2.3 東鄉(xiāng)族有齲和無(wú)齲組在屬水平上的差異40-41
- 3.6.2.4 漢族有齲和無(wú)齲組在屬水平上的差異41-45
- 第四章 討論45-51
- 4.1 研究對(duì)象的選擇45
- 4.2 16S rRNA擴(kuò)增區(qū)域的選擇45-46
- 4.3 微生物多樣性分析46-47
- 4.3.1 序列信息46
- 4.3.2 微生物多樣性46-47
- 4.4 核心微生物分析47-48
- 4.4.1 無(wú)齲組核心微生物分析47-48
- 4.4.2 有齲組核心微生物分析48
- 4.5 齲病相關(guān)菌屬48-49
- 4.5.1 東鄉(xiāng)族齲病相關(guān)菌屬48-49
- 4.5.2 漢族齲病相關(guān)菌屬49
- 4.6 民族相關(guān)菌屬49-51
- 4.6.1 齲病民族相關(guān)菌屬49-50
- 4.6.2 無(wú)齲組民族相關(guān)菌屬50-51
- 第五章 結(jié)論51-52
- 參考文獻(xiàn)52-56
- 在學(xué)期間的研究成果56-57
- 致謝57-58
- 病例匯報(bào)58-59
【參考文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條
1 歐陽(yáng)林;姜繼權(quán);王新;馬昕;郭潔;;甘肅省東鄉(xiāng)族與漢族學(xué)生身體形態(tài)和機(jī)能狀況的比較分析[J];西北民族大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2010年01期
2 馬力揚(yáng);李志強(qiáng);胡曉潘;周建業(yè);岳海泉;蘇琳涵;練維娟;;東鄉(xiāng)族、保安族、裕固族老年人群患齲狀況及衛(wèi)生行為調(diào)查[J];中國(guó)老年學(xué)雜志;2014年01期
,本文編號(hào):1029544
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