本文關(guān)鍵詞：Aβ對神經(jīng)細(xì)胞線粒體結(jié)構(gòu)和功能的影響及其凋亡機(jī)制的研究

  更多相關(guān)文章： Aβ_(1-42) Presenilins “PARL-OPA1”凋亡通路 線粒體

【摘要】：阿爾茲海默病(Alzheimer disease, AD)是一種常見的退行性腦變性疾病,表現(xiàn)為持續(xù)性神經(jīng)功能障礙。研究發(fā)現(xiàn)β-淀粉樣蛋白(Aβ)沉積所導(dǎo)致的神經(jīng)元凋亡是誘導(dǎo)AD發(fā)病的主要原因之一。然而,目前對于Aβ引發(fā)的AD疾病的發(fā)病機(jī)制還不十分明確。同時,研究證明presenlin-1(PS1)和presenilin-2(PS2)基因突變是引發(fā)早發(fā)性老年癡呆(FAD)非常關(guān)鍵的因素。PS作為γ-分泌酶重要功能部分,參與對Aβ前體蛋白APP的剪切,而PS基因突變將引起APP剪切異常進(jìn)而導(dǎo)致Aβ42大量沉積和神經(jīng)元凋亡,這符合所謂早發(fā)性AD的PS的毒性功能獲得病理學(xué)假說。然而,我們前期對PS1/PS2條件性雙敲除(PScDKO)小鼠的研究發(fā)現(xiàn),PScDKO小鼠表現(xiàn)與AD疾病相似的神經(jīng)退行性癥狀,例如腦室擴(kuò)大以及大量神經(jīng)元凋亡,但是并沒發(fā)現(xiàn)伴隨著Aβ沉積,這與早發(fā)性AD的PS毒性功能獲得病理學(xué)假說不符。PS也存在于線粒體,對線粒體的生物功能有重要影響,在PScDKO鼠模型中也表現(xiàn)出神經(jīng)元線粒體的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能的異常,且PS缺失啟動線粒體PARL-OPA1凋亡信號途徑進(jìn)而導(dǎo)致神經(jīng)元凋亡。雖然Aβ與線粒體之間的作用關(guān)系已有大量研究和報道(如Aβ?lián)p傷線粒體的正常結(jié)構(gòu)和功能,誘導(dǎo)線粒體能量代謝障礙進(jìn)而導(dǎo)致神經(jīng)元凋亡等),但是Aβ對PS有著怎樣的影響,Aβ介導(dǎo)的神經(jīng)細(xì)胞凋亡是否與PS相關(guān)的線粒體凋亡途徑有關(guān)卻不得而知。本研究擬利用SHSY-5Y神經(jīng)細(xì)胞來闡明Aβ1-42是否通過作用PS,使線粒體PS功能受損,進(jìn)而開啟線粒體"PS-PARL-OPA1"凋亡通路,導(dǎo)致線粒體細(xì)胞色素C的釋放,最后引起神經(jīng)元凋亡。 本實驗通過Aβ1-42處理SH-SY5Y細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)Aβ1-42能明顯破壞線粒體正常結(jié)構(gòu)和能量代謝功能,使線粒體膜勢能明顯下調(diào)以及線粒體動態(tài)平衡相關(guān)的融合蛋白(Mnf2、OPA1)和分裂蛋白(Drpl)表達(dá)減少。同時,Aβ1-42處理SH-SY5Yf細(xì)胞,導(dǎo)致線粒體PS,PARL和OPA1基因和蛋白表達(dá)明顯下調(diào),線粒體細(xì)胞色素C的顯著釋放和細(xì)胞凋亡數(shù)量明顯增加。為了進(jìn)一步確定PS、PARL-OPA1通路與Aβ引起線粒體途徑機(jī)制的作用,本課題組還構(gòu)建了PARL過表達(dá)的SH-SY5Y細(xì)胞。在Aβ1-42處理PARL過表達(dá)的SH-SY5Y細(xì)胞后發(fā)現(xiàn),相對于Aβ1-42處理野生型SH-SY5Y細(xì)胞,線粒體PARL下游蛋白OPA1表達(dá)明顯上調(diào),并且線粒體細(xì)胞色素C釋放減少,線粒體膜勢能下調(diào)比例減少,Drp1和Mnf2基因表達(dá)回升,細(xì)胞凋亡率顯著下調(diào)(雖然未至SH-SY5Y細(xì)胞的正常水平)。實驗結(jié)果顯示,Ap通過影響線粒體PS正常功能,破壞線粒體正常結(jié)構(gòu)和功能,開啟線粒體"PARL-OPA1"凋亡通路,誘導(dǎo)線粒體細(xì)胞色素C釋放,最后引起神經(jīng)元凋亡。
【關(guān)鍵詞】：Aβ_(1-42) Presenilins “PARL-OPA1”凋亡通路 線粒體
【學(xué)位授予單位】：華東師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R749.16
【目錄】：

• 摘要6-8
• Abstract8-12
• 前言12-14
• 第一章AP對SH-SY5Y細(xì)胞線粒體結(jié)構(gòu)和功能及線粒體"PS-PARL-0PA1"調(diào)亡通路的影響14-38
• 摘要14
• 前言14-15
• 1.1 實驗材料與方法15-17
• 1.2 實驗方法17-27
• 1.3 結(jié)果27-35
• 1.3.1 A3 對SH-SY5Y細(xì)胞線粒體膜勢能的影響27-29
• 1.3.2 A [31_?對SH-SY5Y細(xì)胞線粒體融合分裂相關(guān)基因的影響29-30
• 1.3.3 A3 對SH"SY5Y細(xì)胞線粒體"PS-PARL-0PA1，調(diào)亡通路的影響30-32
• 1.3.4 A3 對SH-SY5Y細(xì)胞線粒體細(xì)胞色素C釋放的影響32-33
• 1.3.5 對SH"SY5Y細(xì)胞調(diào)亡的影響33-35
• 1.4 討論35-38
• 1.4.1 Aβ_(1-42)對SH-SY5Y細(xì)胞線粒體結(jié)構(gòu)和功能的影響35-36
• 1.4.2 Aβ_(1-42)對SH-SY5Y細(xì)胞線粒體“PS-PARL-OPA1”凋亡通路的影響36-38
• 第二章 Aβ對PARL過表達(dá)SH-SY5Y細(xì)胞線粒體結(jié)構(gòu)和功能及線粒體“PS-PARL-OPA1”通路的影響38-57
• 摘要38-39
• 前言39-40
• 2.1 實驗材料和儀器40-41
• 2.2 實驗方法41-45
• 2.3 結(jié)果45-54
• 2.3.1 Aβ_(1-42)對PARL過表達(dá)SH-SY5Y細(xì)胞線粒體膜勢能的影響45-47
• 2.3.2 Aβ_(1-42)對PARL過表達(dá)SH-SY5Y細(xì)胞融合分裂功能相關(guān)蛋白的影響47-48
• 2.3.3 Aβ_(1-42)對PARL過表達(dá)SH-SY5Y細(xì)胞線粒體“PS-PARL-OPA1”凋亡通路的影響48-51
• 2.3.4 Aβ_(1-42)對PARL過表達(dá)SH-SY5Y細(xì)胞線粒體細(xì)胞色素C釋放的影響51-53
• 2.3.5 Aβ_(1-42)對PARL過表達(dá)SH-SY5Y細(xì)胞凋亡的影響53-54
• 2.4 討論54-57
• 2.4.1 Aβ_(1-42)PARL過表達(dá)SH-SY5Y細(xì)胞線粒體“PS-PARL-OPA1”凋亡通路的影響54-55
• 2.4.2 Aβ_(1-42)對PARL過表達(dá)SH-SY5Y細(xì)胞線粒體結(jié)構(gòu)和功能的影響55-57
• 結(jié)論57-59
• 第三章 文獻(xiàn)綜述59-66
• 參考文獻(xiàn)66-72
• 已/待刊論文72-73
• 致謝73

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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本文編號：977855