本文關(guān)鍵詞：脫落酸通過下調(diào)促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素的表達介導(dǎo)抗抑郁作用

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【摘要】：促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)被認(rèn)為是下丘腦-垂體-腎上腺(HPA)軸的中樞驅(qū)動力,并且在應(yīng)激反應(yīng)和抑郁癥中發(fā)揮著重要的作用。臨床研究表明,過量的視黃酸(RA)與抑郁癥的發(fā)病相關(guān)。脫落酸(ABA)和RA都是類胡蘿卜素的衍生物,并且具有相似的化學(xué)結(jié)構(gòu)。本實驗意于驗證ABA是否通過共享RA信號通路參與CRH活性的調(diào)節(jié)。我們的研究首次報道了在正常大鼠中,相對于大腦皮層和海馬,下丘腦中ABA的含量最高。在急性應(yīng)激條件下,伴隨著血清中皮質(zhì)酮水平和下丘腦中c-fos基因表達水平的升高,血清中ABA含量增加而下丘腦中ABA含量顯著降低。此外,長期給藥ABA大鼠的糖水?dāng)z入量顯著增加,下丘腦中CRH和視黃酸受體(RARα)的mRNA表達水平顯著下降。更為重要的是,ABA改善了慢性不可預(yù)見性應(yīng)激模型(CUMS)大鼠,表現(xiàn)在升高了CUMS大鼠的糖水?dāng)z入量,增加了強迫游泳檢測中大鼠的游泳時間,并且降低了下丘腦中CRH和RARα的表達水平。體外研究進一步證實在不同的神經(jīng)細(xì)胞中ABA均下調(diào)CRH基因的表達。在BE(2)-C細(xì)胞中,ABA抑制了一系列視黃酸受體的表達,其中包括RARα,而RARα作為核受體可以直接調(diào)控CRH基因的轉(zhuǎn)錄。這些研究結(jié)果表明,ABA可能通過共享視黃酸信號通路下調(diào)CRH基因表達,在抑郁癥的發(fā)病過程中發(fā)揮著重要的作用。 在本實驗中,我們發(fā)現(xiàn)正常人血清中ABA含量和CRH的水平成負(fù)相關(guān)性,并且這種負(fù)相關(guān)性在血清CRH水平高的抑郁病人中消失。ABA與CRH的負(fù)相關(guān)性在BE(2)-C細(xì)胞中也得到驗證。同時,ABA抑制了視黃酸受體(RARa)的表達,而RARa可以被募集到CRH啟動子上直接調(diào)節(jié)CRH的基因表達。此外,RARα的過表達和敲除實驗結(jié)果表明RARα對CRH的表達調(diào)節(jié)是必須的。當(dāng)哺乳動物體內(nèi)的ABA受體蛋白羊毛硫氨酸合成酶類C蛋白2(LANCL2)基因表達沉默后,ABA對CRH的下調(diào)作用消失。有趣的是,LANCL2沉默導(dǎo)致CRHmRNA表達下調(diào)的同時,RRα的mRNA水平和蛋白水平的表達均下降,而當(dāng)沉默RARα表達時,LANCL2的表達沒有任何影響。這些結(jié)果提示我們,ABA對CRH mRNA表達的調(diào)節(jié)是通過LANCL2-RARα介導(dǎo)的。 本實驗還對長期給藥ABA的青年大鼠對空間學(xué)習(xí)和記憶的能力進行了檢測。ABA的藥代動力學(xué)結(jié)果顯示外源性ABA可以進入并廣泛分布于大鼠腦中,而且ABA具有吸收快和代謝慢的特點。行為學(xué)檢測結(jié)果顯示ABA大鼠在Morris水迷宮中目標(biāo)象限的停留時間和進入次數(shù)明顯增加,而尋找目標(biāo)象限所花費的延遲時間明顯降低。此外,ABA大鼠進入Y-迷宮新臂的延遲時間降低,并伴隨著進入三個臂的總次數(shù)和總運動距離的增加。然而,在曠場試驗和高架十字迷宮中,ABA處理的大鼠與對照組相比沒有顯著差異。這些結(jié)果表明,ABA可以改善青年大鼠長期空間記憶和探索活動能力。
【關(guān)鍵詞】：脫落酸 視黃酸 抑郁癥 促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素(CRH) 受體α (RAR α) 羊毛硫氨酸合成酶類似C蛋白2(LANCL2) 空間記憶 探索活動
【學(xué)位授予單位】：中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R749.4
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 目錄9-12
• 第1章 緒論12-42
• 1.1 引言12-13
• 1.2 ABA在植物體內(nèi)的概述13
• 1.3 ABA在植物體內(nèi)受體和信號通路的研究13-15
• 1.4 ABA在動物體內(nèi)的研究進展15-26
• 1.4.1 ABA存在于動物體內(nèi)15-19
• 1.4.2 ABA在動物體內(nèi)和人細(xì)胞中的信號通路19-20
• 1.4.3 ABA在動物體內(nèi)受體的研究20-22
• 1.4.4 ABA在動物應(yīng)激反應(yīng)中的作用22-23
• 1.4.5 ABA在相關(guān)疾病中的作用23-26
• 1.5 視黃酸26-30
• 1.5.1 視黃酸和ABA的生物合成通路以及結(jié)構(gòu)相似性26-27
• 1.5.2 視黃酸信號通路27-29
• 1.5.3 視黃酸和抑郁癥29-30
• 1.6 應(yīng)激,HPA軸,CRH和抑郁癥30-33
• 參考文獻33-42
• 第2章 脫落酸下調(diào)CRH基因表達的抗抑郁作用42-70
• 2.1 引言42-43
• 2.2 實驗材料和方法43-50
• 2.2.1 實驗動物和藥物43
• 2.2.2 大鼠急性應(yīng)激實驗43
• 2.2.3 ICR小鼠的短期給藥ABA實驗43-44
• 2.2.4 SD年輕大鼠的慢性給藥ABA實驗44
• 2.2.5 CUMS大鼠造模和ABA給藥實驗44-45
• 2.2.6 實驗動物組織取材45
• 2.2.7 人血清樣品45-47
• 2.2.8 ABA提取過程47
• 2.2.9 ABA含量檢測47-48
• 2.2.10 ELISA檢測CRH含量和皮質(zhì)酮水平48
• 2.2.11 RNA提取和Q-PCR檢測48
• 2.2.12 數(shù)據(jù)統(tǒng)計48-50
• 2.3 實驗結(jié)果50-62
• 2.3.1 大鼠下丘腦中具有相對最高含量的ABA50
• 2.3.2 急性應(yīng)激導(dǎo)致大鼠血清中ABA含量升高,而下丘腦中ABA含量下降50-53
• 2.3.3 短期給藥ABA可以預(yù)防ICR小鼠的抑郁樣行為的發(fā)生53-55
• 2.3.4 慢性ABA給藥誘導(dǎo)青年大鼠的抗抑郁樣行為,并抑制HPA軸的活性55-57
• 2.3.5 ABA對CUMS抑郁模型鼠的抗抑郁作用57-60
• 2.3.6 抑郁癥病人血清中ABA與CRH的負(fù)相關(guān)性消失60-62
• 2.4 討論62-65
• 參考文獻65-70
• 第3章 脫落酸通過LANCL2-RARα下調(diào)CRH基因的表達70-88
• 3.1 引言70-71
• 3.2 實驗材料和方法71-75
• 3.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)71
• 3.2.2 MTT檢測71
• 3.2.3 RNA提取和Q-PCR檢測71-72
• 3.2.4 ABA在BE(2)-C細(xì)胞中的濃度效應(yīng)和時間效應(yīng)72
• 3.2.5 RARα和CRH共轉(zhuǎn)染72
• 3.2.6 RNA干擾72
• 3.2.7 蛋白免疫印跡72-73
• 3.2.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計73-75
• 3.3 實驗結(jié)果75-83
• 3.3.1 MTT檢測ABA對BE(2)-C細(xì)胞存活率的影響75
• 3.3.2 ABA的濃度梯度和時間梯度75-76
• 3.3.3 ABA下調(diào)CRH基因表達76-77
• 3.3.4 ABA誘導(dǎo)RA信號通路相關(guān)信號分子的異常表達77-78
• 3.3.5 RARα對CRH基因表達調(diào)節(jié)是必須的78-81
• 3.3.6 LANCL2參與ABA下調(diào)CRH基因表達的調(diào)控81-83
• 3.4 討論83-85
• 參考文獻85-88
• 第4章 脫落酸改善青年大鼠的空間記憶和探索能力88-108
• 4.1 引言88-89
• 4.2 實驗方法89-91
• 4.2.1 ABA藥代動力學(xué)89
• 4.2.2 SD年輕大鼠的慢性給藥ABA實驗89-91
• 4.2.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計91
• 4.3 實驗結(jié)果91-100
• 4.3.1 ABA藥代動力學(xué)91-93
• 4.3.2 慢性給藥ABA對大鼠體重的影響93
• 4.3.3 運動功能檢測93-94
• 4.3.4 焦慮樣行為的評估94-96
• 4.3.5 空間學(xué)習(xí)記憶和探索能力的評估96-100
• 4.4 討論100-103
• 參考文獻103-108
• 第5章 總體討論與展望108-111
• 附錄 英文縮略詞表111-114
• 致謝114-116
• 攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與取得的科研成果116-117

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 孟凡濤;倪榮軍;張智;趙君;劉雅靜;周江寧;;抑制雌激素的生物合成會引起C57BL/6J卵巢摘除小鼠的輕微焦慮樣行為(英文)[J];Neuroscience Bulletin;2011年04期

2 Viswanathan Chinnusamy;;Abscisic Acid-mediated Epigenetic Processes in Plant Development and Stress Responses[J];Journal of Integrative Plant Biology;2008年10期

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本文編號：604026