阿爾茨海默�。ˋlzheimer’s disease,AD）是常見的老年性神經(jīng)退行性疾病之一,以細胞外的淀粉樣斑塊沉積、細胞內(nèi)高度磷酸化的tau纏結(jié)和神經(jīng)元突觸丟失為主要的病理表現(xiàn),伴有漸進性地學習、記憶與認知能力損傷為主要的臨床癥狀。至今,AD的病因、發(fā)病機制仍然是未知的,也缺乏有效的治療手段。因此,深入了解AD早期病理變化機制對AD早期干預有重要意義。研究發(fā)現(xiàn)嗅覺損傷常常發(fā)生在認知損傷之前,且嗅覺損傷會影響學習和記憶,但其具體機制是不清楚的。本研究主要在分子和環(huán)路水平對嗅覺影響學習記憶的因果關系進行初步探討。本文第一部分:AD是一種遺傳病相關性疾病,但并不是單一一個基因在發(fā)揮作用,更多的可能是多個基因的聯(lián)合效應。因此,尋找AD早期發(fā)生過程中所涉及的易感基因、及其相關的網(wǎng)絡及信號通路,更適合作為像AD這樣具有復雜病因的遺傳性疾病的診斷方法,同時,對了解AD早期發(fā)生、早期干預均有重要指導意義。本研究主要通過對AD病人尸檢樣本的轉(zhuǎn)錄組測序分析,尋找嗅系統(tǒng)相關的關鍵基因。結(jié)果發(fā)現(xiàn)Ppp2r5a具有作為候選基因的潛質(zhì),需要進一步論證其作為早期治療靶點的有效性。我們主要通過免疫熒光方法來確定P... 

【文章頁數(shù)】：129 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 緒論
    1.1 阿爾茨海默病的研究現(xiàn)狀
    1.2 嗅覺障礙與阿爾茨海默病
        1.2.1 嗅覺通路的解剖結(jié)構(gòu)
        1.2.2 嗅覺通路在AD中的病理變化
        1.2.3 AD患者嗅覺損傷的機制
    1.3 基底前腦膽堿能神經(jīng)元與AD的嗅覺損傷
        1.3.1 基底前腦膽堿能神經(jīng)元的投射系統(tǒng)
        1.3.2 基底前腦膽堿能神經(jīng)元的生理功能
        1.3.3 基底前腦膽堿能神經(jīng)元和AD的嗅覺障礙
    1.4 論文的研究內(nèi)容
        1.4.1 Ppp2r5a通過突觸傳遞調(diào)控AD小鼠的學習和記憶
        1.4.2 不同亞群基底前腦膽堿能神經(jīng)元的不同的嗅覺輸入模式
    1.5 本文的技術(shù)路線
第2章 擾動嗅球中PPP2R5A對AD小鼠學習記憶的影響及其機制
    2.1 前言
    2.2 實驗材料和方法
        2.2.1 實驗動物
        2.2.2 病毒具體信息
        2.2.3 AD轉(zhuǎn)基因小鼠的鑒定
        2.2.4 腦立體定位注射
        2.2.5 行為學檢測方法
        2.2.6 靜息態(tài)功能核磁共振
        2.2.7 定量蛋白質(zhì)組學
        2.2.8 組織學和免疫組織化學
        2.2.9 蛋白質(zhì)樣品制備及免疫印跡分析
        2.2.10 突觸蛋白提取
    2.3 數(shù)據(jù)處理
        2.3.1 行為學數(shù)據(jù)處理
        2.3.2 核磁數(shù)據(jù)處理
        2.3.3 免疫組化數(shù)據(jù)處理
        2.3.4 蛋白質(zhì)組學數(shù)據(jù)處理
        2.3.5 免疫印跡數(shù)據(jù)處理
    2.4 結(jié)果
        2.4.1 RNA-seq揭示在AD病人尸檢樣品中,Ppp2r5a不同程度的改變,并與AD病程、病理改變高度相關
        2.4.2 生理狀態(tài)下,PPP2R5A在C57BL/6小鼠嗅皮層中的表達及定位
        2.4.3 生理狀態(tài)下,PPP2R5A在C57BL/6小鼠嗅球中的表達及定位
        2.4.4 PPP2R5A在AD小鼠嗅球中的表達及變化情況
        2.4.5 上調(diào)嗅球中Ppp2r5a后,對PPP2R5A蛋白表達水平的影響
        2.4.6 上調(diào)嗅球中Ppp2r5a后,抑制嗅球內(nèi)蛋白質(zhì)表達,影響嗅球內(nèi)的蛋白網(wǎng)絡
        2.4.7 上調(diào)嗅球中Ppp2r5a,影響多個腦區(qū)的網(wǎng)絡連接
        2.4.8 嗅球過表達Ppp2r5a后,對嗅球輸出環(huán)路的影響
        2.4.9 嗅球過表達Ppp2r5a后對A β斑塊在嗅覺區(qū)域沉積的影響
        2.4.10 嗅球過表達Ppp2r5a后對小膠質(zhì)細胞的影響
        2.4.11 嗅球過表達Ppp2r5a后對星形膠質(zhì)細胞的影響
        2.4.12 擾動嗅球中Ppp2r5a對小鼠嗅覺功能的影響
        2.4.13 擾動嗅球中Ppp2r5a的表達,對小鼠空間學習記憶的影響
    2.5 結(jié)果討論
        2.5.1 中樞神經(jīng)系統(tǒng)中,PPP2R5A通過突觸連接來影響學習和記憶
        2.5.2 在AD小鼠中,PPP2R5A通過對病理性APP誘導的多種蛋白翻譯的抑制來特異性地參與AD的發(fā)生
        2.5.3 我們實驗中的局限性
第3章 不同亞群基底前腦膽堿能神經(jīng)元的不同的嗅覺輸入模式
    3.1 研究背景
    3.2 材料和方法
        3.2.1 實驗動物
        3.2.2 行為測試
        3.2.3 病毒信息
        3.2.4 手術(shù)和病毒注射
        3.2.5 組織學和免疫組織化學
        3.2.6 熒光成像,細胞計數(shù)和數(shù)據(jù)分析
        3.2.7 數(shù)據(jù)處理
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 不同亞區(qū)的BFCNs接受來自不同嗅覺相關腦區(qū)的輸入
        3.3.2 在Go/no-go嗅覺辨別任務中,不同亞區(qū)的BF神經(jīng)元受到不同程度的激活
        3.3.3 不同亞區(qū)的BFCNs在Go/no-go嗅覺辨別任務中分別被不同程度的激活
    3.4 討論
        3.4.1 HMSc中的膽堿能神經(jīng)元可能與嗅覺系統(tǒng)有最強的聯(lián)系
        3.4.2 NBMc和MS/DBc中的BFCNs可能分別與嗅覺聯(lián)合記憶和情感密切相關
        3.4.3 本研究中使用的病毒標記技術(shù)及不同亞群的BFCNs劃分的不足之處
第4章 總結(jié)與展望
    4.1 全文總結(jié)
    4.2 論文創(chuàng)新點
    4.3 展望
參考文獻
附錄
攻讀學位期間發(fā)表的學術(shù)論文與研究成果
參加的研究項目及獲獎情況
致謝



本文編號：3720840