目的探討細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶/c AMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白（ERK/CREB）信號通路在異菝葜皂苷元（SMI）促進(jìn)β-淀粉樣肽（Aβ）損傷SH-SY5Y細(xì)胞腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（BDNF）表達(dá)中的作用及其機(jī)制。方法建立Aβ?lián)p傷SH-SY5Y細(xì)胞模型,采用RT-PCR法檢測BDNF m RNA的表達(dá),用Western blotting的方法檢測p CREB和p ERK的變化,最后通過阻斷實驗確認(rèn)ERK/CREB信號通路在SMI促進(jìn)BDNF m RNA表達(dá)中的作用。結(jié)果 SMI能促進(jìn)Aβ?lián)p傷SH-SY5Y細(xì)胞BDNF m RNA的表達(dá)（P=0.000）,并能上調(diào)信號分子CREB和ERK1/2的磷酸化水平（P=0.001,P=0.000）。用RNA干擾的方法阻斷CREB的表達(dá)后,SMI促進(jìn)BDNF m RNA表達(dá)的作用完全消失;用U0126阻斷ERK1/2磷酸化后,SMI促進(jìn)p CREB水平升高的作用完全消失。結(jié)論 SMI通過ERK/CREB通路促進(jìn)Aβ?lián)p傷SH-SY5Y細(xì)胞BDNF m RNA的表達(dá)。 

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【文章目錄】：
1材料與方法
    1.1材料
    1.2方法
        1.2.1細(xì)胞培養(yǎng)
        1.2.2實時熒光定量RT-PCR法測定BDNF mR NA表達(dá)水平
        1.2.3 Western blotting法測定磷酸化CREB和磷酸化ERK1/2蛋白水平
        1.2.4 RNA干擾實驗
        1.2.5 U0126對SMI促進(jìn)CREB磷酸化作用影響的檢測
    1.3統(tǒng)計學(xué)方法
2結(jié)果
    2.1 SMI對Aβ?lián)p傷SH-SY5Y細(xì)胞BDNF m RNA表達(dá)的影響
    2.2 SMI對Aβ?lián)p傷SH-SY5Y細(xì)胞CREB磷酸化的影響
    2.3 SMI對Aβ?lián)p傷SH-SY5Y細(xì)胞ERK1/2磷酸化的影響
    2.4阻斷CREB后,SMI對Aβ?lián)p傷SH-SY5Y細(xì)胞BDNF mR NA表達(dá)的影響
    2.5阻斷ERK1/2磷酸化后,SMI對Aβ?lián)p傷SH-SY5Y細(xì)胞p CREB的作用
3討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]New insight in expression, transport, and secretion of brain-derived neurotrophic factor: Implications in brainrelated diseases[J]. Naoki Adachi,Tadahiro Numakawa,Misty Richards,Shingo Nakajima,Hiroshi Kunugi.  World Journal of Biological Chemistry. 2014(04)



本文編號：3694124