中國人口老齡化逐年加劇,阿爾茨海默癥（Alzheimer’s disease,AD）作為一種極其普遍的神經退行性疾病,嚴重危害著老年人群的身心健康,其高額的醫(yī)療費用為家庭和社會帶來了沉重的經濟負擔。目前針對AD的研究主要圍繞淀粉樣多肽（Amyloid-β,Aβ）在細胞外沉積形成的老年斑（Senile Plaques,SP）。大量研究表明Aβ蛋白異常積累是誘導產生AD最重要的病因之一,它通過腦部多種生理途徑產生神經毒性,是腦部其他生理病變的導火線。另外,活性氧導致的氧化應激與AD發(fā)病之間也有著密切的聯系。次氯酸（Hypochlorous acid,HOCl）是活性氧中最為常見的一種,它不僅在AD發(fā)病進程中扮演著重要角色,而且在各種炎癥過程中也起著至關重要的作用。本論文主要從Aβ聚集體檢測以及氧化應激誘導的活性氧（HOCl）檢測兩方面展開研究,主要工作如下:首先,我們設計合成了一系列D-π-A結構的探針SDPY、ODPY、IDPY用于Aβ聚集體檢測。這些探針通過經典的碘取代反應、Sonogashira耦合反應和Knoevenogel縮合反應合成。其中,SDPY具有良好的抗干擾能力,能夠在磷... 

【文章頁數】：121 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
1 緒論
    1.1 引言
    1.2 阿爾茨海默病的幾種發(fā)病機制
        1.2.1 Aβ淀粉樣蛋白級聯假說
        1.2.2 Tau蛋白神經纖維纏結假說
        1.2.3 氧化應激假說
    1.3 Aβ淀粉樣蛋白相關研究
        1.3.1 Aβ淀粉樣蛋白單體來源
        1.3.2 Aβ單體的平衡結構
        1.3.3 Aβ蛋白聚集機制
    1.4 用于Aβ淀粉樣蛋白檢測的近紅外熒光探針
        1.4.1 花菁衍生物
        1.4.2 BODIPY衍生物
        1.4.3 供體-受體共軛雙鍵橋接衍生物
        1.4.4 姜黃素衍生物
        1.4.5 咔唑類衍生物
        1.4.6 喹啉-丙二腈衍生物
        1.4.7 亞氨基香豆素衍生物
        1.4.8 Acedan衍生物
        1.4.9 二甲基氨基噻吩衍生物
        1.4.10 吩噻嗪衍生物
        1.4.11 香豆素衍生物
    1.5 HOCl與阿爾茨海默癥聯系以及研究進展
        1.5.1 HOCl的來源以及生理作用
        1.5.2 HOCl與阿爾茨海默癥的聯系
    1.6 用于檢測HOCl的近紅外探針研究
        1.6.1 基于氧化硫醚反應的探針
        1.6.2 基于二甲基硫代氨基甲酸酯反應的探針
        1.6.3 基于氧化對甲氧基苯酚反應的探針
        1.6.4 基于氧化酰肼反應的探針
        1.6.5 基于氧化醛肟反應的探針
        1.6.7 基于氧化不飽和雙鍵反應的探針
    1.7 本論文選題依據和主要內容
        1.7.1 本論文選題依據
        1.7.2 本論文主要內容
2 設計合成一種新型D-π-A結構探針用于檢測AD腦組織切片中Aβ聚集體
    2.1 引言
    2.2 實驗部分
        2.2.1 主要實驗儀器
        2.2.2 主要試劑
        2.2.3 Aβ聚集體、單體的制備
        2.2.4 結合常數測定
        2.2.5 AD轉基因小鼠模型的構建
        2.2.6 探針SDPY與 AD腦組織切片的制備
        2.2.7 探針SDPY與 AD腦組織切片熒光共定位實驗
    2.3 結果與討論
        2.3.1 SDPY、ODPY、IDPY的合成與表征
        2.3.2 三種探針的吸收光譜性質研究
        2.3.3 三種探針對Aβ聚集體的熒光響應研究
        2.3.4 對Aβ_(40)聚集體的特異性熒光響應測試
        2.3.5 SDPY的抗干擾能力和穩(wěn)定性
        2.3.6 SDPY腦組織切片研究
    2.4 本章小結
3 基于惡嗪1的N,N-二甲基羰基類探針用于特異性檢測活細胞中的HOCl
    3.1 引言
    3.2 實驗部分
        3.2.1 主要實驗儀器和試劑
        3.2.2 ROS/RNS配置
        3.2.3 檢測限的測定
        3.2.4 細胞培養(yǎng)
        3.2.5 細胞毒性
        3.2.6 在細胞水平檢測外源HOCl
        3.2.7 在細胞水平上檢測細胞產生的內源性HOCl
        3.2.8 HOCl在關節(jié)炎小鼠模型中的體內成像
    3.3 結果與討論
        3.3.1 熒光探針BR-O的設計合成與表征
        3.3.2 探針BR-O對 HOCl的響應性能研究
        3.3.3 探針BR-O對 HOCl的選擇性研究
        3.3.4 探針BR-O在不同p H下對HOCl的響應能力研究
        3.3.5 探針BR-O與 HOCl反應的機理探究
        3.3.6 探針BR-O在活細胞中對HOCl成像能力研究
        3.3.7 探針BR-O在小鼠關節(jié)炎模型中對HOCl響應能力研究
    3.4 本章小結
4 基于惡嗪1的N,N-二甲基硫羰基類探針快速檢測炎癥組織內的HOCl
    4.1 引言
    4.2 實驗部分
        4.2.1 主要實驗儀器和試劑
        4.2.2 ROS/RNS配置
        4.2.3 檢出限的測定
        4.2.4 細胞培養(yǎng)以及毒性測試
        4.2.5 探針BR-1 在細胞水平上對外源性HOCl的檢測
        4.2.6 探針BR-1 在細胞水平上檢測內源性次氯酸HOCl
        4.2.7 在關節(jié)炎小鼠模型中的研究探針BR-1 對體內產生HOCl成像
    4.3 結果與討論
        4.3.1 探針BR-1的設計合成與表征
        4.3.2 探針BR-1對HOCl響應的性能研究
        4.3.3 探針BR-1對硫元素的抗干擾能力測試
        4.3.4 探針BR-1穩(wěn)定性以及pH響應范圍
        4.3.5 還原類物質對BR-1 響應HOCl的干擾測試
        4.3.6 BR-1與HOCl響應機理探究
        4.3.7 在細胞層面探索BR-1對HOCl的響應能力測試
        4.3.8 在小鼠關節(jié)炎模型中BR-1 對內源性HOCl的響應研究
    4.4 本章小結
5 總結和展望
參考文獻
攻讀學位期間取得的研究成果
致謝



本文編號：3654465