研究目的ATP敏感型鉀通道（ATP-sensitive potassium channels, KATP）是一種偶聯(lián)細(xì)胞電活動(dòng)和細(xì)胞代謝的特殊通道,在多種不同的組織廣泛分布,KATP是由兩種不同的亞基（Kir6.x和SURx）以1：1組合形成的異構(gòu)八聚體,Kir6.x和SUR亞基之間的不同組合可以形成多種不同生理及藥理學(xué)特征的通道。目前Kir6.2在阿爾茨海默病發(fā)生發(fā)展中的具體作用機(jī)制尚不是很清楚。本研究旨在通過(guò)克隆Kir6.2基因,成功構(gòu)建真核表達(dá)載體pcDNA3.0/Kir6.2,并將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞,獲得高表達(dá)Kir6.2基因的細(xì)胞克隆。研究方法1.從SD大鼠腦組織中提取總RNA,采用RT-PCR方法獲得Kir6.2基因的全長(zhǎng)cDNA,經(jīng)0.8%瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行初步鑒定,對(duì)目的PCR產(chǎn)物進(jìn)行切膠回收。2.將回收的PCR產(chǎn)物插入pEASY-T1克隆載體,取陽(yáng)性克隆進(jìn)行序列測(cè)定。3.測(cè)序正確的質(zhì)粒pEASY-T1/Kir6.2用限制內(nèi)切酶HindⅢ和BamH I進(jìn)行雙酶切,純化回收約1.2Kb大小的目的片段,質(zhì)粒pcDNA3.0也進(jìn)行HindⅢ和BamH I雙酶切,純化... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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中文摘要
ABSTRACT
符號(hào)說(shuō)明
前言
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
附圖
參考文獻(xiàn)
致謝
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【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]ATP敏感性鉀通道分子結(jié)構(gòu)和功能的組織特異性研究進(jìn)展[J]. 朱慶磊,汪海,肖文彬.  中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 2001(02)
[2]ATP敏感鉀通道亞單位在大鼠組織中的表達(dá)[J]. 任亞軍,佟曉永,王曉良.  中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 2000(02)



本文編號(hào)：3645481