用含有Cre重組酶的腺苷病毒載體來(lái)敲除成熟小鼠腦中腺苷A1受體及N-甲基D-天門冬氨酸受體的局部基因來(lái)研究腺苷在覺(jué)醒／睡眠轉(zhuǎn)化中的作用 在現(xiàn)代社會(huì)中，人類失眠非常常見(jiàn)，失眠可導(dǎo)致嚴(yán)重認(rèn)知功能障礙，影響日常工作，此外，已開(kāi)始重視慢性睡眠剝奪而致的壓力。研究從覺(jué)醒到睡眠的正常生理轉(zhuǎn)化機(jī)制是研究失眠的基礎(chǔ)。 腺苷在正常的生理功能中起到多種多樣作用，包括促進(jìn)和維持睡眠。在膽堿能覺(jué)醒中樞中，細(xì)胞外腺苷的增加會(huì)促進(jìn)由覺(jué)醒向睡眠轉(zhuǎn)化。腺苷是通過(guò)激活突觸前膜和突觸后膜腺苷A1受體而起抑制性作用，所以腺苷A1受體在促進(jìn)睡眠中起重要作用。維持生理性覺(jué)醒，需要大腦腳被蓋背側(cè)核的神經(jīng)元為腦干及間腦提供膽堿能遞質(zhì)。應(yīng)用腺苷至大腦腳被蓋背側(cè)核，在活體中可增加睡眠，在實(shí)驗(yàn)室中可通過(guò)激活突觸后膜腺苷A1受體抑制大腦腳被蓋背側(cè)核的神經(jīng)元的活性。 此外，離子性谷氨酸受體的激活可導(dǎo)致皮層神經(jīng)元釋放腺苷，谷氨酸或NMDA可使NMDA受體低水平激活而導(dǎo)致足夠量的腺苷釋放，可在海馬起到暫時(shí)性腺苷依賴性的突觸抑制作用。已觀察到通過(guò)腺苷突觸前的抑制作用可抑制大腦腳被蓋背側(cè)核NMDA受體依賴的反應(yīng)以及谷氨酸突觸活性，... 

【文章來(lái)源】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
1.全文中文摘要
    (1) 用含有Cre重組酶的腺苷病毒載體來(lái)敲除成熟小鼠腦中腺苷A1受體及N-甲基D-天門冬氨酸(NMDA)受體的局部基因來(lái)研究腺苷在覺(jué)醒／睡眠轉(zhuǎn)化中的作用
    (2) 5-羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的表達(dá)與“獲得性無(wú)助”(抑郁癥的動(dòng)物模型)的關(guān)系
2.全文英文摘要
    (1) Focal gene deletion in the brain(knockout of the adenosine A1 receptor and N-Methyl-D-A spartate receptor(NMDAR)in adult mice using adeno-associated viral vector)to study the role of adenosine in wake/sleep transition
    (2) The corelation between serotonin transporter expression and learned helplessness(animal model of depression)
3.綜述一(英文)：腺苷、腺苷受體、NMDA受體及覺(jué)醒／睡眠轉(zhuǎn)化
    (1) 腺苷受體
    (2) 腺苷受體的轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制
    (3) 腺苷及腺苷受體對(duì)睡眠和覺(jué)醒的調(diào)節(jié)作用
    (4) 谷氨酸受體
    (5) 腺苷受體及NMDA受體的相互作用
    (6) 參考文獻(xiàn)
4.綜述二(英文)：基因敲除
    (1) 轉(zhuǎn)基因鼠中的Cre／loxP重組系統(tǒng)
        a.條件性基因去處
        b.基因的激活
    (2) 限定在特定區(qū)域及特定細(xì)胞的基因敲除
    (3) 腺苷有關(guān)病毒可有效地介導(dǎo)大腦條件性基因修飾
    (4) 可報(bào)告Cre介導(dǎo)重組的報(bào)告鼠系
    (5) 參考文獻(xiàn)
5.論文一的詳細(xì)實(shí)驗(yàn)步驟(英文)
    (1) 從鼠尾中提取基因組DNA
    (2) 用PCR技術(shù)作基因檢測(cè)
        a.腺苷A1受體轉(zhuǎn)基因敲除鼠系的基因檢測(cè)
        b.NMDA受體轉(zhuǎn)基因敲除鼠系的基因檢測(cè)
        c.Z／EG雙報(bào)告轉(zhuǎn)基因鼠系的基因檢測(cè)
        d.Nestin-Cre轉(zhuǎn)基因鼠系的基因檢測(cè)
    (3) 質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化(腺苷A1受體的質(zhì)粒及NMDA受體質(zhì)粒)
    (4) 質(zhì)粒的提取(腺苷A1受體的質(zhì)粒及NMDA受體質(zhì)粒)
    (5) ~(35)S-UTP同位素標(biāo)記核糖探針的制備(腺苷A1受體mRNA及NMDA受體mRNA有意義及反意義鏈探針)
    (6) 同位素標(biāo)記核糖探針的原位雜交
    (7) 用地高辛精標(biāo)記核糖探針的熒光原位雜交
    (8) PicoGreen對(duì)比染色
    (9) 轉(zhuǎn)基因鼠的LacZ染色
    (10) 鼠腦的抗綠色熒光蛋白的免疫組化染色
6.論文一(英文)用含有Cre重組酶的腺苷病毒載體來(lái)敲除成熟小鼠腦中腺苷A1受體及NMDA受體的局部基因來(lái)研究腺苷在覺(jué)醒／睡眠轉(zhuǎn)化中的作用
    (1) 引言
    (2) 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br>    (3) 材料和方法
    (4) 結(jié)果
    (5) 討論
    (6) 總結(jié)
    (7) 參考文獻(xiàn)
    (8) 圖片
7.綜述三(英文)：抑郁、壓力、5-羥色胺系統(tǒng)及抗抑郁治療
    (1) “獲得性無(wú)助”是已公認(rèn)的抑郁癥的動(dòng)物模型
    (2) 5-羥色胺系統(tǒng)
        a.含有5-羥色胺細(xì)胞的定位
        b.5-羥色胺的生理合成及代謝
        c.5-羥色胺受體
            信號(hào)傳導(dǎo)途徑
            5-羥色胺A1受體與壓力
        d.色氨酸羥化酶
        e.5-羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白
    (3) 抗抑郁治療
    (4) 參考文獻(xiàn)
8.論文二的詳細(xì)實(shí)驗(yàn)步驟(英文)
    (1) 質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化(5-羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白質(zhì)粒)
    (2) 質(zhì)粒的提取(5-羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白質(zhì)粒)
    (3) ~(35)S-UTP同位素標(biāo)記核糖探針的制備(5-羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白mRNA有意義及反意義鏈探針)
    (4) 同位素標(biāo)記核糖探針的原位雜交
    (5) 結(jié)晶紫染色
9.論文二(英文)5-羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的表達(dá)與“獲得性無(wú)助”(抑郁癥的動(dòng)物模型)的關(guān)系
    (1) 引言
    (2) 材料和方法
    (3) 結(jié)果
    (4) 討論
    (5) 參考文獻(xiàn)
    (6) 圖片
10.致謝



本文編號(hào)：3173022