由過度磷酸化tau蛋白聚集形成的神經(jīng)原纖維纏結(jié)（neurofibrillary tangles, NFTs）是阿爾茨海默病（Alzheimer’s disease, AD）和與17號染色體相關(guān)的額顳葉癡呆與帕金森�。≒arkinson’s disease, PD）等tau相關(guān)疾病的主要神經(jīng)病理學(xué)特征之一。但是到目前為止,導(dǎo)致tau蛋白過度磷酸化及形成NFTs的機(jī)制尚未完全闡明。不僅tau蛋白的磷酸化,而且其泛素化也可促進(jìn)NFTs的形成。泛素-蛋白酶體系統(tǒng)（ubiquitin-proteasome system, UPS）通過E3泛素連接酶可將磷酸化的tau蛋白泛素化,同時蛋白酶體活性在tau相關(guān)疾病中降低,表明UPS可能影響tau蛋白的過度磷酸化。此外,糖原合酶激酶-3β（glycogen synthase kinase-3β, GSK-3β）和蛋白激酶B（protein kinase B, PKB/Akt）也在tau蛋白的異常磷酸化中起關(guān)鍵作用,Akt是GSK-3β的上游激酶,且熱休克蛋白90（heat shock protein 90, Hsp90）與Akt兩者之間結(jié)合程度的變化可... 

【文章來源】：華中師范大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：43 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

GSK一3p和205proteasome在HEK293/tau441細(xì)胞內(nèi)的相互作用

圖5.Lactaeystin處理HEK293/tau441細(xì)胞24h后，Akt總量和Akt一Ser473與Akt一Thr3點(diǎn)磷酸化的變化。Laetacystin和eHX共處理HE心93/tau441細(xì)胞24h后，Akt總量增加(Akt一Ser473位點(diǎn)(B)和Akt一Ser308位點(diǎn)(C)磷酸化程度減弱。統(tǒng)計學(xué)分析結(jié)果是用Akt蛋量標(biāo)準(zhǔn)化后表示。與對照組比較，*P<0.05，**P<0.01。同樣，本研究也通過免疫熒光和免疫共沉淀技術(shù)進(jìn)一步檢測HEK293/tau441內(nèi)205proteasome和從t之間的相互作用。結(jié)果顯示，在細(xì)胞內(nèi)205proteasomAkt蛋白之間有共定位關(guān)系，并且它們在細(xì)胞內(nèi)主要定位于質(zhì)膜和胞內(nèi)，在細(xì)兩者共沉淀呈陽性反應(yīng)(圖6，圖7)，提示HE心93/tau441細(xì)胞內(nèi)205proteasomAkt蛋白之間也有直接相互作用。

卿石題上學(xué)位淪及MASI’11丈ST’11FS孟S圖6.Akt和 205proteasome在 HEK293/tau441細(xì)胞中的共定位。免疫熒光技術(shù)檢測Akt和 205proteasome蛋白在細(xì)胞內(nèi)的定位關(guān)系，其中綠色代表Akl，紅色代表 205proteasome，藍(lán)色代表細(xì)胞核(Hoeehst染色)。標(biāo)尺為20林m。 Lacta一，11》八t)工〕:、卜、::、‘、，1、戶之{:S人卜一A;叭B二Pr，t分a�？诠�:。二05一圖7.Akt和 205proteasome在HEK293八au441細(xì)胞內(nèi)的相互作用。細(xì)胞裂解后首先用anti一Akt或anti一 205proteasome的抗體進(jìn)行沉淀，再通過 westemblot將沉淀物用 205proteasome和Akt的抗體顯色


本文編號：3125499