阿爾茨海默癥（Alzheimer’s disease,AD）是一種多因素引起的,與年齡高度相關(guān),以進(jìn)行性認(rèn)知障礙和記憶力損傷為主的中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病,是最常見的癡呆類型之一。老齡人口中65歲后約13%,85歲后約45%的人患有AD。AD特征性病理改變包括:（1）由39-43個(gè)氨基酸組成的β淀粉樣蛋白（amyloidβpeptide,Aβ）沉積形成的神經(jīng)細(xì)胞外老年斑（senile plaque,SP）;（2）tau蛋白過(guò)度磷酸化形成的神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)神經(jīng)原纖維纏結(jié)（neurofibrillary tangles,NFT）;（3）神經(jīng)元丟失伴膠質(zhì)細(xì)胞增生。神經(jīng)細(xì)胞凋亡是其主要病理基礎(chǔ)之一。高脂血癥是AD等神經(jīng)退行性疾病發(fā)生的高危因素,但是高脂血癥與神經(jīng)退行性疾病發(fā)生的機(jī)制并未完全闡明。本課題旨在研究脂質(zhì)對(duì)神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響及其機(jī)制,進(jìn)而探索高脂血癥導(dǎo)致AD等神經(jīng)退行性疾病發(fā)生的機(jī)制。第一部分:Ox-LDL對(duì)PC12細(xì)胞脂質(zhì)蓄積、凋亡和分泌Aβ的影響以及對(duì)PC12細(xì)胞中SREBP2、PCSK9及LRP1表達(dá)的影響。目的:觀察Ox-LDL能否通過(guò)調(diào)節(jié)SREBP2,PCSK9,LRP1表達(dá)影響PC... 

【文章來(lái)源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁(yè)數(shù)】：78 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
主要英文縮略詞索引
第1章 緒論
第2章 實(shí)驗(yàn)材料
    2.1 細(xì)胞和主要試劑
    2.2 主要儀器設(shè)備
第3章 實(shí)驗(yàn)方法
    3.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        3.1.1 細(xì)胞復(fù)蘇
        3.1.2 細(xì)胞傳代
        3.1.3 細(xì)胞換液
        3.1.4 細(xì)胞凍存
        3.1.5 實(shí)驗(yàn)分組
    3.2 常用液體的配制
    3.3 油紅O染色
    3.4 Hoechest33258染色
    3.5 AnnexinV-FITC/PI雙染
    3.6 Western blot
        3.6.1 貼壁細(xì)胞蛋白質(zhì)提取
        3.6.2 SDS-PAGE凝膠配制
        3.6.3 電泳
        3.6.4 轉(zhuǎn)膜（濕轉(zhuǎn)膜法）
        3.6.5 封閉
        3.6.6 一抗孵育
        3.6.7 二抗孵育
        3.6.8 ECL化學(xué)發(fā)光檢測(cè)
    3.7 siRNA轉(zhuǎn)染
    3.8 ELISA檢測(cè)Aβ40及Aβ42含量
    3.9 統(tǒng)計(jì)分析
第4章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.1 Ox-LDL增加PC12細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)蓄積
    4.2 Ox-LDL促進(jìn)PC12細(xì)胞的凋亡
        4.2.1 Hoechst33258染色觀察不同濃度Ox-LDL對(duì)PC12細(xì)胞凋亡的影響
        4.2.2 流式細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)不同濃度的Ox-LDL對(duì)PC12細(xì)胞凋亡的影響
    4.3 Ox-LDL增加PC12細(xì)胞中SREBP2和PCSK9表達(dá)減少LRP1表達(dá)
        4.3.1 不同濃度的Ox-LDL對(duì)PC12細(xì)胞中SREBP2，PCSK9及LRP1表達(dá)的影響
        4.3.2 75mg/L Ox-LDL處理PC12細(xì)胞不同時(shí)間對(duì)其SREBP2，PCSK9及LRP1表達(dá)的影響
    4.4 Ox-LDL減少PC12細(xì)胞Aβ的分泌
    4.5 PCSK9 siRNA轉(zhuǎn)染的結(jié)果鑒定
    4.6 PCSK9 siRNA部分抑制Ox-LDL誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞凋亡
        4.6.1 Hoechst33258染色觀察PCSK9 siRNA對(duì)Ox-LDL誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞凋亡的影響
        4.6.2 流式細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)PCSK9 siRNA對(duì)Ox-LDL誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞凋亡的影響
    4.7 PCSK9 siRNA部分抑制Ox-LDL誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞中PCSK9表達(dá)增加和LRP1表達(dá)減少
    4.8 PCSK9 siRNA對(duì)PC12細(xì)胞中PI3K，Akt，P-PI3K及P-Akt表達(dá)的影響
    4.9 PCSK9 siRNA對(duì)PC12細(xì)胞中NF-κB，Caspase3，Caspase9，Bax及Bcl-2 表達(dá)的影響
    4.10 PCSK9 siRNA增加Ox-LDL處理的PC12細(xì)胞分泌的Aβ
第5章 討論
第6章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    References
攻讀學(xué)位期間的科研成果
課題資助
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Targeting the PI3K/Akt signaling pathway in gastric carcinoma: A reality for personalized medicine?[J]. Shikha Satendra Singh,Wei Ney Yap,Frank Arfuso,Shreya Kar,Chao Wang,Wanpei Cai,Arunasalam M Dharmarajan,Gautam Sethi,Alan Prem Kumar.  World Journal of Gastroenterology. 2015(43)
[2]Ox-LDL對(duì)急性冠脈綜合癥患者外周血單核-巨噬細(xì)胞SREBP-2和HMGCR mRNA表達(dá)的影響[J]. 張培東,劉映峰,郭陽(yáng),繆緋,余志國(guó),王世祥.  南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2009(05)
[3]阿爾茨海默病淀粉樣β蛋白誘導(dǎo)神經(jīng)元凋亡的研究進(jìn)展[J]. 呂良,鐘振國(guó).  中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志. 2007(06)
[4]針刺對(duì)阿爾茨海默病模型大鼠神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響[J]. 姜桂美,賈超,賴新生.  上海針灸雜志. 2006(12)

碩士論文
[1]PCSK9介導(dǎo)脂質(zhì)對(duì)海馬神經(jīng)元及PC12細(xì)胞凋亡的影響及機(jī)制研究[D]. 吳琪.南華大學(xué) 2014



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