發(fā)布時(shí)間：2021-01-26 11:21

　　研究表明調(diào)節(jié)攝食和能量平衡的肽類激素ghrelin及受體GHS-R1a對(duì)焦慮相關(guān)行為有復(fù)雜的雙相調(diào)節(jié)作用,但機(jī)制仍不清楚。環(huán)境應(yīng)激是焦慮抑郁等情緒障礙性神經(jīng)精神疾病的重要誘因。因此,本課題在慢性反復(fù)禁錮模型小鼠上,結(jié)合GHS-R1a敲除（knock out,KO）、AAV病毒介導(dǎo)的特定腦區(qū)GHS-R1a過(guò)表達(dá)等手段,進(jìn)一步觀察了內(nèi)源性ghrelin及其受體GHS-R1a對(duì)小鼠焦慮相關(guān)行為的調(diào)節(jié)作用并對(duì)可能的神經(jīng)環(huán)路機(jī)制進(jìn)行了初步探討。所用行為學(xué)測(cè)試指標(biāo)包括高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)、強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)、懸尾實(shí)驗(yàn)及社交實(shí)驗(yàn)。我們發(fā)現(xiàn):1.慢性反復(fù)禁錮應(yīng)激導(dǎo)致內(nèi)源性GHS-R1a在多個(gè)焦慮相關(guān)功能腦區(qū)（內(nèi)側(cè)前額葉皮質(zhì)mPFC、腹側(cè)海馬v HPC和下丘腦HY）的表達(dá)上調(diào)。2.GHS-R1a KO小鼠的基礎(chǔ)焦慮水平與同窩野生型（WT）小鼠一致,但敲除GHS-R1a緩解反復(fù)禁錮所致的小鼠焦慮相關(guān)行為障礙。高架十字迷宮結(jié)果顯示慢性禁錮后,WT和GHS-R1a KO小鼠在開(kāi)放臂的時(shí)間均減少,表明兩者的焦慮水平均升高,但WT小鼠的焦慮樣行為更加明顯。相一致的是,社交實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示慢性禁錮后WT小鼠的社會(huì)活動(dòng)時(shí)間與基態(tài)下... 

【文章來(lái)源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】：64 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

GHS-R1aKO小鼠基因型鑒定結(jié)果圖

圖 1 GHS-R1a KO 小鼠基因型鑒定結(jié)果圖2.慢性禁錮應(yīng)激后 WT 小鼠不同腦區(qū)內(nèi)源性 ghrelin 及 GHS-R1a mRNA的表達(dá)首先我們考察了慢性禁錮后內(nèi)源性 ghrelin 和 GHS-R1a 在多個(gè)焦慮相關(guān)腦區(qū)的表達(dá)是否變化。選用 2~6 個(gè)月，體重為 20g~30g 的雄性 WT 小鼠。采用的禁錮方式為 4 天反復(fù)禁錮（每天禁錮 1 小時(shí)，連續(xù) 4 天）和 24 小時(shí)單次超長(zhǎng)禁錮。根據(jù)前期預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，4 天反復(fù)禁錮后第 10-12 天小鼠的焦慮相關(guān)行為（焦慮、抑郁及社會(huì)行為減少）表現(xiàn)最為明顯，因此我們選取禁錮后第 10 天進(jìn)行高架十字迷宮測(cè)試，并在測(cè)試結(jié)束后立即取材行 real-time qRT-PCR 測(cè)試。選取的腦區(qū)主要包括內(nèi)側(cè)前額葉皮層（mPFC），伏核（NAc），海馬（HPC）

圖 3 GHS-R1a KO 小鼠 mPFC 與 BLA 腦區(qū)內(nèi)源性鼠源 GHS-R1a 敲除率測(cè)定。a，與同窩WT小鼠相比，GHS-R1a KO小鼠mPFC腦區(qū)GHS-R1a mRNA的含量顯著降低（unpt-test, *p<0.05）。 b，GHS-R1a KO 小鼠 BLA 腦區(qū) GHS-R1a mRNA 的含量亦明顯低于 W（unpaired t-test, **p<0.01）。圖中所有數(shù)據(jù)均為 mean±SEM。各組 n 值見(jiàn)圖中標(biāo)注，代表受試小鼠的個(gè)體數(shù)。


本文編號(hào)：3001022