阿爾茨海默病(Alzheimer’s disease, AD),是老年人中最常見的神經退行性疾病,多發(fā)于65歲及以上的老年人。其臨床特點為隱襲起病,逐漸出現記憶力減退、認知功能障礙、行為異常和社會障礙。隨著我國人口老齡化的日益嚴重,老年性癡呆越來越成為一個嚴重的社會問題。據統(tǒng)計,目前我國已有1.29億人口超過60歲,老年人占總人口的比例已達到10.15 %,從而使我國提前成為老年型人口的國家。值得注意的是,老年性癡呆患病率約占60歲人口的10%左右,其中阿爾茨海默病(AD)占5%左右,在我國估計已有約645萬病人。而且年齡每增加5歲,AD的患病率將增加兩倍,在80-85歲的病人中有20%的老年人患有老年癡呆。是繼心臟病、腫瘤和腦卒中之后的第四位死因,給患者家庭、社會造成了很大的負擔及壓力。因此,AD研究已成為當今神經科學的一個迫切課題。 AD的主要病理特征改變有以下三個方面(1)老年斑(Senile Plaque, SP)的形成,主要是細胞外Aβ蛋白的沉積所制。(2)胞內神經纖維纏結(Neurofibrilary tangles,NFT)的形成,多與Tau蛋白的異常磷酸化有關。(3)神經元的凋亡及丟失,以基底前腦膽堿能神經元的丟失最為嚴重,同時伴有γ-氨基丁酸(GABA)能、去甲腎上腺素能和5-羥色胺能(5-HT)能神經元丟失。 AD的動物模型作為AD病因、發(fā)病機制及治療研究的基礎,一直以來都缺乏理想的動物模型。目前常用的AD模型構建方法有以下幾種:1:外力損傷模型,如海馬穹窿傘切割模型2:Aβ淀粉樣蛋白片段腦內注射模型3:興奮性藥物損傷基底前腦膽堿能神經元的模型4:復合動物模型5:轉基因動物模型。各種動物模型都能在一定程度上模擬AD的行為學的損害及部分病理特征,但是仍然沒有一種動物模型能夠較全面的模擬AD的所有病理特征,嚴重阻礙了AD研究的進展。本實驗主要研究神經免疫毒素192-IgG-saporin及Aβ(1-40)片段致阿爾茨海默病的實驗動物模型的構建。 實驗部分 1材料與方法 SD雄性大鼠32只,重250-300g,隨機分成4組,每組8只,分別為:正常組、Aβ(1-40)組(Aβ組)、神經免疫毒素192-IgG-saporin組(192組)、神經免疫毒素192-IgG-saporin及Aβ1-40聯合組(聯合組)。Aβ組單側海馬內注射Aβ(1-40)片段10μl(1μg/μl),192-IgG-saporin組單側側腦室注射192-IgG-saporin 5μl(2.5μg/μl)。聯合組為單側腦室以及海馬內分別注射192-IgG-saporin 5μl(2.5μg/μl)和Aβ1-40 10μ(l1μg/μl),坐標分別為,側腦室:前囟后0.8 mm,左側旁開1.5 mm,進針深5.5 mm。海馬:前囟后3.4 mm,左側旁開2.5 mm,進針深4.5 mm。2周后行Y迷宮以測試,測試結束后經灌注,固定,去腦,蔗糖脫水,冰凍切片。基底前腦切片行ChAT免疫組化染色,對內側隔核(MS),斜角帶垂直支(VDB)的ChAT陽性神經元進行計數,海馬切片行膽堿能纖維(AChE)、星型膠質細胞(GFAP)免疫組化染色、尼氏染色、剛果紅染色及硫磺素T熒光染色,對海馬AChE陽性纖維、錐體細胞和GFAP陽性細胞計數。數據用SPSS統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計學處理。 2結果 Y迷宮測試大鼠學習記憶能力,結果顯示各損傷組學習記憶能力與正常組比較均有下降,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。各損傷組之間無明顯變化,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。剛果紅以及硫磺素T染色結果表明,Aβ(1-40)組及聯合組海馬區(qū)內有聚集的Aβ沉積.且能造成海馬區(qū)明顯的錐體細胞丟失,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),192-IgG-saporin組海馬區(qū)錐體細胞無明顯變化(P0.05)。Aβ1-40組及聯合組海馬區(qū)星型膠質細胞增生(P0.05),192-IgG-saporin組未見明顯增生(P0.05). 192-IgG-saporin組以及聯合組膽堿能纖維數量明顯減少(P0.01),Aβ1-40組膽堿能纖維數量未見明顯變化(P0.05)。192-IgG-saporin組及聯合組基底前腦ChAT陽性細胞數明顯減少(P=0.01),Aβ組基底前腦ChAT陽性細胞數未見明顯變化(P0.05). 3小結 Aβ以及神經免疫毒素聯合作用動物模型,學習記憶能力明顯下降.基底前腦膽堿能神經元數量顯著減少。海馬區(qū)椎體細胞數目減少,星形膠質細胞增生,膽堿能神經纖維數量明顯減少。 總之:Aβ(1-40)和神經免疫毒素的聯合作用比單獨作用能更加全面的模擬AD病理特征,是比較理想的AD動物模型。
【學位單位】：廣州醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2010
【中圖分類】：R749.16
【文章目錄】：
中英文對照表
中文摘要
ABSTRACT
前言
材料與方法
結果
討論
結論
參考文獻
綜述
    參考文獻
附圖
學習期間論文發(fā)表情況
致謝

【參考文獻】

相關期刊論文 前7條

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本文編號：2869245