1目的： 從神經元凋亡角度探討嗎啡依賴的可能機理,研究Glu-Con-G、Glu-Con-G[1-13]對嗎啡軀體依賴的干預作用及可能機制。 2方法： 采用條件性位置偏愛(conditioned place preference,CPP)和軀體依賴模型,利用透射電子顯微鏡、免疫印跡法檢測成癮小鼠紋狀體腦區(qū)神經元的凋亡情況及相關蛋白含量變化。 3結果： 1.嗎啡誘導小鼠CPP建立和復燃階段紋狀體腦區(qū)神經元核固縮變形,染色質邊集,CPP消退階段神經元未出現顯著異常,但有異常溶酶體出現。 2.嗎啡誘導小鼠CPP建立、消退和復燃階段紋狀體腦區(qū)神經元樹突、軸突數量明顯增多、密集。 3.嗎啡誘導小鼠CPP建立、消退和復燃階段Procaspase3蛋白含量在Hp、PFC腦區(qū)無明顯變化,但在紋狀體腦區(qū)于CPP建立和復燃階段含量減少。 4.150、300、600pmol Glu-Con-G和Glu-Con-G[1-13]呈劑量-效應依賴性方式抑制嗎啡成癮小鼠戒斷跳躍,150、300、600pmol Glu-Con-G和300、600 pmol Glu-Con-G[1-13]還能抑制小鼠體重減輕癥狀。 5.150、300、600pmolGlu-Con-G和Glu-Con-G[1-13]均能顯著上調嗎啡成癮小鼠紋狀體腦區(qū)Procaspase3蛋白含量。 4結論： 1.多次嗎啡處理,可導致小鼠紋狀體腦區(qū)在CPP建立、復燃階段出現異常凋亡,CPP消退階段未見顯著凋亡但有異常溶酶體出現。 2.長期嗎啡處理上調紋狀體腦區(qū)神經元突觸數量,樹突、軸突密集,下調Procaspase3蛋白含量。 3. Glu-Con-G和Glu-Con-G[1-13]能干預嗎啡所致小鼠軀體依賴,并能上調紋狀體腦區(qū)Procaspase3蛋白含量,且呈劑量相關性。
【學位單位】：浙江大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2011
【中圖分類】：R749.6
【部分圖文】：

1.3主要實驗裝置及儀器1.3.1視頻跟蹤一計算機自動分析的條件位置偏愛實驗系統的構建系統硬件組成:主要由鋁扣板隔音箱(規(guī)格:160x110x11ocm)、小鼠活動盒、攝像系統和專用計算機組成。隔音箱頂部裝有排風扇(新風系統)，背景噪音<30dB;發(fā)光二極管(LED)照明設備，亮度調至活動盒底部平均照度<20Lux;正中為攝像頭，通過視頻線連接到一個裝有視頻采集卡的計算機，能同步觀察小鼠的活動情況，并攝像保存。對位于攝像頭正下方的小鼠CPP活動盒在Becker等人的基礎上做了一定的改進【”]，是由4個相同的長方形Pvc材料穿梭盒(30火15、15cm)組成的正方形盒子(45x45x45cm)。每一穿梭盒中間有一可活動的隔板(訓練階段為封閉型，測試階段為通道型)，將穿梭盒分隔為兩個大小相同的正方形盒子(巧、巧、巧cm)，其中一個盒子四周均為白色，底面光滑;另一個四周均為黑色，底面鏤刻成網格(o‘5x0.5cm)。

宙睡g只冷卜”.寧一一能 111圖2.Ra燈 MieeTrac址ng軟件的分析界面 Figure2.TheinterfaeeofRat/MieeTraekingsoftware視頻圖像分析主要原理:錄像前用飽和苦味酸溶液將小鼠涂成黃色，以區(qū)別其所在活動盒的背景色(黑色和白色)， Rat/MiceTracking軟件即可對小鼠進行實時跟蹤分析。打開背景灰度均勻并且和小鼠有較大對比度的視頻文件后，區(qū)域新建時沿活動隔板上緣將區(qū)域分成兩小區(qū)。兩小區(qū)再分別劃定為中心和周邊兩部分區(qū)域，中心圓形區(qū)域面積大小為小區(qū)面積的1/4。在跟蹤小鼠運動軌跡時，根據設置好的灰度范圍，計算出各個區(qū)域(活動區(qū)室)在此灰度范圍內的點(可以是多個)，選擇面積最大的點并取重心即為小鼠在此幀圖像的軌跡點。定位判斷每幀圖像中小鼠軌跡點所在小區(qū)。先后相鄰軌跡點在兩個小區(qū)

圖3.分別在兩個小區(qū)的先后相鄰A、B兩點示Figure3.SehematiediagramofadjaeentAandBPointsloeat1.3.2其他儀器DS一PAGE電泳轉膜裝置標儀(ELX一800)BIO一量移液器E織勻漿機Bi速低溫離心機(eent八允ge5804R)E速離心機(eenth允ge5415n)E低溫冰箱(PremiumU410)H計(nELI，A32o)Mett功能漩渦振蕩器Gen泰凱弗隆超純水儀上

【參考文獻】

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本文編號：2827105