【摘要】： 阿爾茨海默病是以認知能力衰退為主要表現(xiàn)的神經(jīng)系統(tǒng)疾病,其臨床表現(xiàn)為認知和記憶功能不斷惡化。主要病理特征為細胞外間隙β-淀粉樣蛋白(β-amyloid peptide,Aβ)沉積所形成得老年斑(Senile plaque,SP),細胞內(nèi)異常磷酸化的Tau蛋白聚集形成得神經(jīng)纖維纏結(Neurofibrillary tangles,NFTs)以及海馬神經(jīng)元丟失。其中β-淀粉樣蛋白(β-amyloid,Aβ)斑塊(老年斑)在大腦內(nèi)的沉積被認為是阿爾茨海默病的主要病理特征之一。以往的研究主要關注由Aβ直接的作用于神經(jīng)元所引發(fā)的神經(jīng)毒性,并提出了一系列的假說。并且普遍的研究結論都人為,β折疊結構的形成是β-淀粉樣蛋白具有毒性作用的關鍵步驟。老年斑中存在有異常高濃度的Cu~(2+),提示Cu~(2+)可能參與了AD的發(fā)病過程。有研究指出通過與Aβ結合,Cu~(2+)可促進β折疊結構的形成,進而引發(fā)神經(jīng)毒性。因此一直以來過渡態(tài)的金屬離子被認為是誘發(fā)阿爾茨海默病的重要致病因素之一。然而近年來,隨著研究技術手段革新和研究的進一步深入,有報道指出Cu~(2+)在某些情況下很可能具有神經(jīng)保護作用。在此基礎上,本題運用圓二色光譜,熒光光譜分析以及高效液相色譜(沉積分析)等實驗方法,研究了銅離子對β-淀粉樣蛋白聚集的影響。結果表明銅離子除了具有傳統(tǒng)意義上認為的毒性作用之外還可能具有積極的作用。它能夠抑制β折疊結構的形成,甚至破壞業(yè)已形成的β折疊結構,從而達到減弱毒性作用的效果。另一方面,從分子機理來看,目前關于Cu~(2+)與Aβ存在相關性的證據(jù)很多,但關于參與Cu~(2+)結合的氨基酸位點卻仍然存在爭議。本文對突變體Aβ,~(3,6,13,14)Aβ_(1-40)的研究實驗結果揭示了His6、His13、His14位點是Aβ上的Cu~(2+)結合位點。 再者,目前已有很多關于不同形式的Aβ與它們神經(jīng)毒性作用的研究,并且得出了一些很有意義的結論。而近年來,小膠質(zhì)細胞在阿爾茨海默病發(fā)生和發(fā)展中的作用成為一個新的研究熱點,認為β淀粉樣蛋白沉積激活小膠質(zhì)細胞引起的炎癥反應是引起阿爾茨海默病患者的腦組織結構改變的重要原因之一,是阿爾茨海默病的核心病理機制。本文通過運用實時熒光定量PCR儀,Griess reagent、ELISA檢測試劑盒等實驗在mRNA和表達產(chǎn)物兩個水平上測定了不同結構的β-淀粉樣蛋白對小膠質(zhì)細胞的活化作用(TNF-α,NO)。結果發(fā)現(xiàn),不同聚集形式的β-淀粉樣蛋白通過不同的途徑活化小膠質(zhì)細胞,重要的是無論是那種形式活化均能被銅離子所抑制,從而進一步證實了銅離子積極方面的作用。
【學位授予單位】：首都師范大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2009
【分類號】：R749.16
【圖文】：

首都師范大學碩士研究生論文用了原子吸收光譜對離心后的上清液中的cu2+含量進行了測定，結果表明，正如我們所期望的，與寡聚體Ap不同，在23，6，’3，，伙p上清液中檢測到了大量的cu2+(圖3一6D)。從而證明了在這樣的條件下，c礦+作用的“失效”是由不能繼續(xù)與Ap絡合引起的。即:通過與三個組氨酸殘基結合，cu2+可破壞p折疊結構并使得Ap以非p沉積的形成沉積。同，00

本文編號：2790415