【摘要】： 研究背景和目的:阿爾茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一種以隱襲起病、不可逆進行性發(fā)展的記憶減退、認知功能障礙、語言障礙及人格改變等為主要臨床表現的中樞神經系統(tǒng)變性疾病,是臨床上最為常見的老年癡呆類型。AD病因尚不完全明確,普遍認為β-淀粉樣蛋白(β-amyloid protein,Aβ)在腦內聚集、纖維化、沉積、Aβ斑塊形成及其毒性作用是AD發(fā)病的重要病理基礎。而現有研究證明,可溶性Aβ在AD發(fā)病早期對神經元突觸功能的損傷是AD發(fā)病的早期關鍵性病理過程,并與AD發(fā)病早期輕度認知功能障礙密切相關。Humanin(HN)是日本學者在AD患者枕葉內發(fā)現的一種多肽,研究顯示,HN及其衍生物HNG可以拮抗可溶性Aβ的神經毒性作用,進而減輕AD轉基因動物模型的認知功能損傷,有望成為新的AD治療藥物,但其神經保護作用機制尚不完全明確。本實驗利用平面多電極記錄技術,首次從突觸網絡水平角度研究HNG對可溶性Aβ導致的小鼠海馬CA1區(qū)突觸可塑性損害的影響,將為深入研究HNG的神經保護機制提供實驗依據和理論基礎。 實驗方法: 以小鼠海馬腦片為研究對象,利用平面多電極陣列記錄技術(MED64系統(tǒng)),研究(1)Aβ25-35、HNG以及不同濃度HNG(100 nmol/L、200 nmol/L、400 nmol/L)與Aβ25-35共同孵育在突觸網絡水平上對小鼠海馬CA1區(qū)基礎突觸傳遞的電生理特性的影響;(2)Aβ25-35在突觸網絡水平上對小鼠海馬CA1區(qū)LTP的抑制作用;(3)不同濃度HNG(100 nmol/L、200 nmol/L、400 nmol/L)對Aβ25-35在突觸網絡水平上對小鼠海馬CA1區(qū)LTP的抑制作用的影響。 實驗結果: (1)在相同刺激強度下,Aβ25-35 400 nmol/L組、HNG 400 nmol/L組、Aβ25-35 400 nmol/L + HNG 100 nmol/L組、Aβ25-35 400 nmol/L+HNG 200 nmol/L組及Aβ25-35 400 nmol/L + HNG 400 nmol/L組中小鼠海馬CA1區(qū)突觸前纖維群峰電位(presynaptic response,PrV)及場興奮性突觸后電位(field excitatory postsynaptic potential,fEPSP)形成范圍與正常對照組相比均無統(tǒng)計學差異(P 0.05); (2)以θ頻率誘發(fā)LTP 60min以后,與正常對照組相比,Aβ25-35 400nmol/L組小鼠海馬CA1區(qū)LTP形成范圍明顯縮小(P0.05),HNG 400 nmol/L組無明顯變化(P 0.05); (3)以θ頻率誘發(fā)LTP60min以后,Aβ25-35 400 nmol/L+HNG 100 nmol/L組小鼠海馬CA1區(qū)LTP形成范圍明明顯縮小,與Aβ25-35 400nmol/L組相比無統(tǒng)計學差異(P 0.05),與正常對照組相比差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。Aβ25-35 400 nmol/L+HNG 200 nmol/L組及Aβ25-35 400 nmol/L+HNG 400 nmol/L組小鼠海馬CA1區(qū)LTP形成范圍與Aβ25-35 400nmol/L組及Aβ25-35 400 nmol/L+HNG 100 nmol/L組相比有統(tǒng)計學差異(P0.05),Aβ25-35 400 nmol/L+HNG 400 nmol/L組及HNG 400 nmol/L組小鼠海馬CA1區(qū)LTP形成范圍與正常對照組比較無統(tǒng)計學差異(P 0.05)。 實驗結論: (1)可溶性Aβ、HNG以及不同濃度HNG與可溶性Aβ共孵育在突觸網絡水平上對小鼠海馬CA1區(qū)基礎突觸傳遞沒有影響; (2)低濃度可溶性Aβ短時間孵育可以在突觸網絡水平上明顯抑制小鼠海馬CA1區(qū)LTP的形成; (3)HNG可以改善甚至逆轉可溶性Aβ對在突觸網絡水平上對小鼠海馬CA1區(qū)LTP的抑制作用。
【學位授予單位】：第四軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2010
【分類號】：R749.16
【圖文】：

CA1 區(qū)電極位置以及單電極記錄的典型 PrV 及 fE片與 MED64 系統(tǒng) MED-P515A 電極相對位置（紅、電極和記錄電極）；B 正常對照組、Aβ25-35400nM β25-35400nM+HNG 100nM 組、Aβ25-35400nM+HNG 0nM+HNG 400nM 組在基礎刺激強度下，單電極（圖極）記錄到的典型 PrV 及 fEPSP 波形。

海馬腦片 CA1 區(qū)電極位置以及單電極記錄的典型 PrV 及 fEPSPA 海馬腦片與 MED64 系統(tǒng) MED-P515A 電極相對位置（紅、黃箭頭所別為刺激電極和記錄電極）；B 正常對照組、Aβ25-35400nM 組、HNGnM 組、Aβ25-35400nM+HNG 100nM 組、Aβ25-35400nM+HNG 200nM 組β25-35400nM+HNG 400nM 組在基礎刺激強度下，單電極（圖 1A 中黃頭所指電極）記錄到的典型 PrV 及 fEPSP 波形。

【參考文獻】

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1 潘海仙;呂曉迎;王志功;王余峰;陸慧琴;沈洪妹;;神經元集群電信號探測用微電極陣列[J];東南大學學報(自然科學版);2009年03期

2 李靈敏;喬健天;張策;;Humanin拮抗Aβ_(31-35)引起的培養(yǎng)皮層神經元胞內Ca~(2+)濃度升高[J];生理學報;2009年02期

3 徐瑩;余輝;張威;蔡華;劉清君;王平;;基于MEMS技術的微電極陣列細胞傳感器[J];自然科學進展;2007年09期

本文編號：2717578