【摘要】：背景:氧化修飾蛋白質在腦老化及阿爾茨海默病等老年變性神經病的發(fā)病機制中扮演著重要角色。蛋白質組學技術可以發(fā)現(xiàn)氧化修飾蛋白質,為相關疾病的藥物治療選擇新的靶標。目的:建立以雙向電泳結合Western blot及生物質譜技術分離、鑒定人腦氧化修飾蛋白質的方法。方法:取3個無神經系統(tǒng)疾患的男性腦組織蛋白,第一向等電聚焦電泳后,固相pH梯度膠條同二硝基苯肼反應,然后行第二向SDS-PAGE電泳。2張相同凝膠中的1張行考馬斯亮藍染色,另1張凝膠上免疫熒光顯色。同PVDF膜上顯色點相對應的考染凝膠上的蛋白質點即為氧化修飾蛋白質。凝膠蛋白膠內酶解,基質輔助激光解析飛行時間串聯(lián)質譜鑒定氧化修飾蛋白質。結果與結論:從提取的腦組織中鑒定出β-肌動蛋白、天冬氨酸氨基轉移酶、果糖二磷酸醛縮酶、磷酸甘油酸激酶、1,3-磷酸甘油醛脫氫酶、碳酰還原酶1、磷酸丙糖異構酶、轉酮醇酶、丙酮酸激酶、血清白蛋白前體、二氫嘧啶酶相關蛋白質2、熱休克蛋白60為氧化修飾蛋白質。說明實驗成功建立了用蛋白質組學技術分離及鑒定人腦氧化蛋白質的方法。

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