【摘要】： 阿爾茨海默病是一種最常見(jiàn)的神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病,其基本的病理學(xué)改變是老年斑、神經(jīng)纖維纏結(jié)、突觸數(shù)目的減少以及神經(jīng)元的丟失。本研究運(yùn)用磁共振成像和活體波譜技術(shù),并結(jié)合病理學(xué)和免疫組織化學(xué)技術(shù),對(duì)AD轉(zhuǎn)基因小鼠腦組織的微觀結(jié)構(gòu)和代謝物的水平進(jìn)行研究。同時(shí)研究了小鼠的基因型對(duì)其橫向磁豫時(shí)間(T_2值)和表觀擴(kuò)散系數(shù)(ADC值)的影響。 在本文的第一部分中,我們對(duì)所獲取的APPswe/PS1ΔE9雙轉(zhuǎn)基因小鼠進(jìn)行了傳代,繁殖。并通過(guò)PCR反應(yīng)對(duì)小鼠的基因型進(jìn)行了鑒定。應(yīng)用多層面多回波SE序列和彌散加權(quán)成像(DWI)序列對(duì)4-8月齡的轉(zhuǎn)基因和野生型小鼠不同腦區(qū)的T_2值和ADC值進(jìn)行了測(cè)量。磁共振掃描完成后,進(jìn)行老年斑和鐵的組織學(xué)染色。研究發(fā)現(xiàn),與野生型小鼠相比,轉(zhuǎn)基因小鼠皮質(zhì)和海馬區(qū)的T_2值明顯降低,而丘腦,胼胝體和紋狀體的T_2值變化不大。ADC值的改變也與T_2值的改變相類似,轉(zhuǎn)基因小鼠皮質(zhì)和海馬的ADC值較野生型小鼠為低,而紋狀體的ADC值變化不大。組織學(xué)染色發(fā)現(xiàn),4月齡及8月齡轉(zhuǎn)基因小鼠的皮質(zhì)及海馬可出現(xiàn)老年斑的沉積,并且隨著小鼠月齡的增加,老年斑的數(shù)目增多,面積也增大。鐵染色進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)在轉(zhuǎn)基因及野生型小鼠基底神經(jīng)節(jié)處均可見(jiàn)到鐵的沉積。鐵在轉(zhuǎn)基因小鼠的皮質(zhì)及海馬處呈棕褐色沉積,并且其分布與老年斑的分布相類似,而野生型小鼠的皮質(zhì)及海馬未見(jiàn)鐵的沉積.。這些結(jié)果說(shuō)明:小鼠的基因型會(huì)影響到磁共振的表型。轉(zhuǎn)基因小鼠皮質(zhì)和海馬區(qū)的T_2值的降低可能與老年斑內(nèi)的鐵有關(guān),而ADC值的降低,除了與老年斑形成引起的水分子的彌散能力減低有關(guān)之外,還與繼發(fā)的神經(jīng)膠質(zhì)增生有關(guān)。 在本文的第二部分中,我們主要研究了AD轉(zhuǎn)基因小鼠的磁共振的高分辨成像。通過(guò)對(duì)PDAPP轉(zhuǎn)基因小鼠的活體掃描和APPswe/PS1ΔE9雙轉(zhuǎn)基因小鼠的離體掃描發(fā)現(xiàn):離體掃描組織的對(duì)比度和信噪比明顯較活體掃描為高,在AD轉(zhuǎn)基因小鼠的活體和離體T2WI上的皮質(zhì)和海馬上可見(jiàn)一些點(diǎn)狀的低信號(hào)區(qū),部分的低信號(hào)區(qū)可與老年斑和鐵染色相對(duì)應(yīng)。這也說(shuō)明了老年斑的磁共振顯微成像可能有助于AD的早期診斷。 在本文的第三部分中,我們對(duì)5,8,12,16月齡的APPswe/PS1ΔE9雙轉(zhuǎn)基因小鼠的海馬進(jìn)行了活體波譜掃描,結(jié)果發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因小鼠海馬區(qū)NAA的含量較同月齡野生型小鼠含量為低,其中16月齡的轉(zhuǎn)基因小鼠海馬區(qū)內(nèi)NAA的水平較野生型小鼠下降更為明顯。上述結(jié)果也提示1H-MRS可作為一種無(wú)創(chuàng)性的方法,動(dòng)態(tài)的檢測(cè)腦內(nèi)代謝物的水平變化。 總之,一系列MRI實(shí)驗(yàn)以及組織學(xué)染色的結(jié)果更加深了對(duì)AD轉(zhuǎn)基因小鼠表型的認(rèn)識(shí),為MRI技術(shù)在AD的發(fā)病機(jī)制和臨床藥物的篩選等方面提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
【圖文】：

泳結(jié)果圖（左圖）與 PS1 電泳結(jié)果圖（右圖）從右到左點(diǎn)樣孔依組織學(xué)染色vine S 染色結(jié)果發(fā)現(xiàn) 2 月齡小鼠的腦區(qū)未見(jiàn)老年斑形成,可在小鼠的皮質(zhì)及海馬發(fā)現(xiàn)老年斑的沉積,并且隨著月齡面積增大.皮質(zhì)下結(jié)構(gòu)如丘腦,紋狀體未見(jiàn)老年斑的沉積。vine S 染色結(jié)果相似,老年斑在 4 月齡(A,C)及 8 月齡(D褐色沉積。量分析，4 月齡陽(yáng)性小鼠斑塊的數(shù)目為 4.7±0.8 個(gè)/mm2, 0μm2，斑塊的負(fù)荷為0.05±0.01%,8月齡陽(yáng)性小鼠斑塊的數(shù)的平均面積為 148.2±11.5μm2，斑塊的負(fù)荷為 0.15±0.0

圖 3 鐵的組織學(xué)染色 A：8 月齡轉(zhuǎn)基因小鼠尾殼核處的鐵染色（×40 倍）。B: 鐵在 8 月齡轉(zhuǎn)基因小鼠尾殼核細(xì)胞內(nèi)及白質(zhì)纖維束周的沉積。C：少突膠質(zhì)細(xì)胞染鐵色。D:野生型小鼠尾殼核處的鐵染色。E：在忽視 Perl 氏液的情況下，切片不著染。F：鐵在轉(zhuǎn)基因小鼠皮質(zhì)處呈棕褐色沉積。GH：鐵在 4 月，8 月齡轉(zhuǎn)基因小鼠皮質(zhì)及海馬處的沉積。I，J：8 月齡轉(zhuǎn)基因小鼠相鄰兩張切片的Thioflavine S 染色和鐵染色。K，L，M：野生型小鼠的免疫組化，鐵和 Thioflavine S 染色。4．T2弛豫時(shí)間的測(cè)量4.1 感興趣區(qū)的選擇：選取紋狀體，，背側(cè)海馬和腹側(cè)海馬三個(gè)層面，在這三個(gè)層面上手動(dòng)畫出感興趣區(qū)。A－C 依次為紋狀體，背側(cè)海馬和腹側(cè)海馬三個(gè)層面，在這三個(gè)層面上我們手動(dòng)畫出雙側(cè)紋狀體，丘腦，背側(cè)海馬, 腹側(cè)海馬，背測(cè)海馬及腹側(cè)海馬下皮質(zhì)及胼胝體。
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號(hào)】：R749.1;R445.2

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 秦川,朱華,張兵林,常洋,尹紅星,劉亞莉;阿爾茨海默癥轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型腦組織病理學(xué)及免疫組化研究[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào);2000年04期

2 洪震;我國(guó)阿爾茨海默病的研究現(xiàn)狀及展望[J];中華神經(jīng)科雜志;2001年04期

本文編號(hào)：2622685