【摘要】： 研究背景與目的： 阿爾茨海默病(Alzheimer's disease, AD)是一種以認(rèn)知功能進(jìn)行性惡化為特征的腦變性疾病,其病理特征是β-淀粉樣蛋白組成的老年斑和以異常過(guò)度磷酸化tau蛋白聚合成的雙螺旋絲(paired helical filament, PHF)為主要成分的神經(jīng)纖維纏結(jié)。目前發(fā)病機(jī)制不清楚。近來(lái)研究表明,糖原合成酶激酶-3β(Glycogen Synthase Kinaseβ,GSK-3β)與Tau蛋白過(guò)度磷酸化、Aβ形成、氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)、細(xì)胞凋亡以及乙酰膽堿合成的減少等AD的病理改變密切相關(guān),國(guó)外有研究發(fā)現(xiàn)GSK-3β的rs334558位點(diǎn)多態(tài)性與AD存在相關(guān)性,提示GSK-3β及其基因多態(tài)性可能在AD的發(fā)病中發(fā)揮了重要作用。國(guó)內(nèi)目前尚未見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道。本研究旨在通過(guò)對(duì)中國(guó)湖南地區(qū)漢族人群GSK-3β的rs334558和rs6438552位點(diǎn)的基因型、等位基因頻率及其單體型頻率與AD關(guān)系進(jìn)行研究,為AD的發(fā)病機(jī)制提供分子遺傳學(xué)的依據(jù),并為早期診斷AD提供更多的分子生物學(xué)指標(biāo)。 方法 本研究采用病例-對(duì)照研究,應(yīng)用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-限制性內(nèi)切酶片段長(zhǎng)度多態(tài)性(PCR-RFLP)方法,檢測(cè)并分析中國(guó)湖南地區(qū)漢族人群中144例AD患者和年齡、性別相匹配的141例健康對(duì)照者的GSK-3β的rs334558和rs6438552位點(diǎn)的等位基因、基因型及其單體型及相互關(guān)系。 結(jié)果 1.GSK-3β的rs334558位點(diǎn)的基因型及等位基因頻率分布：其CC,TC,TT基因型頻率在AD組中分別為27.1%,60.4%,12.5%,在對(duì)照組中分別為2.1%,83.7%,14.2%,表明AD組CC基因型顯著高于對(duì)照組,差異具有顯著性(P0.05),提示攜帶C/C基因型的個(gè)體有較高的AD發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。等位基因分析提示,AD組C等位基因頻率(57.3%)顯著高于對(duì)照組(44.0%),差異具有顯著性(OR=1.709,P0.05),提示攜帶C等位基因的個(gè)體可能有較高的AD發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。 2.GSK-3β的rs6438552位點(diǎn)的基因型及其等位基因頻率分布：其C/C,T/C,T/T基因型頻率在AD組中分別為26.4%,53.5%,20.1%,在對(duì)照組中分別為25.5%,60.3%,14.2%,表明各基因型在AD組和對(duì)照組中分布無(wú)顯著性差異(P0.05)。等位基因分析提示,AD組C等位基因頻率(53.1%)顯著高于對(duì)照組(44.3%),差異具有顯著性(OR=1.423,P0.05),提示攜帶C等位基因的個(gè)體可能有更高的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。 3.GSK-3β的rs334558和rs6438552兩位點(diǎn)多態(tài)性的連鎖不平衡和單體型分析：采用SHEsis軟件對(duì)兩位點(diǎn)多態(tài)性進(jìn)行連鎖部平衡分析,結(jié)果顯示D’=0.745,提示兩位點(diǎn)多態(tài)性呈高度連鎖不平衡。采用HaploView軟件對(duì)兩位點(diǎn)的多態(tài)性進(jìn)行單體型分析,表明AD組C-T單體型顯著高于對(duì)照組,差異具有顯著性(OR=3.208,P0.05),提示攜帶C-T單體型的個(gè)體具有更高的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)；AD組T-C單體型顯著低于對(duì)照組,差異具有顯著性(OR=0.263,P0.05),提示攜帶T-C單體型的個(gè)體發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)最低。 結(jié)論： 1.GSK-3β的rs334558位點(diǎn)攜帶CC基因型或者C等位基因可能與中國(guó)湖南地區(qū)漢族人群AD的發(fā)病有關(guān)。 2.GSK-3β的rs6438552位點(diǎn)攜帶C等位基因可能與中國(guó)湖南漢族人群AD的發(fā)病有關(guān),而攜帶CC基因型與可能與中國(guó)湖南地區(qū)漢族人群AD的發(fā)病無(wú)關(guān)。 3.GSK-3β的rs334558和rs6438552多態(tài)性位點(diǎn)所構(gòu)成的C-T或T-C單體型可能與中國(guó)湖南地區(qū)漢族人群AD的發(fā)病有關(guān)。
【圖文】：

200bP護(hù)100bP+l圖3一 1osK一3p的rs334558位點(diǎn)PCR產(chǎn)物電泳圖PcR產(chǎn)物大小為344bp，條帶單一，無(wú)非特異性雜帶出現(xiàn)，說(shuō)明擴(kuò)增效果良 1.3GsK一3p的rs334s58位點(diǎn)Alul酶的限制性酶切及結(jié)果分析:600bP+，500bP+l40Obp+l300bP荊200bP+l100bp+，3明bP婦220bP+‘124bP釗圖3一 2GSK一3p的rs334558位點(diǎn)酶切結(jié)果電泳圖泳道1為marker;泳道2、3、4、6、9、10、11為雜合子TC型:泳道5、8為純合子CC型，泳道7為純合子TT型GsK一鄧的rs334558位點(diǎn)多態(tài)性為T>C，限制性內(nèi)切酶Alul酶識(shí)別位點(diǎn)為5’…Ao上CT…3’，GSK一3p的rs334558位點(diǎn)目的pCR產(chǎn)物長(zhǎng)344bp，rs334558多態(tài)性位點(diǎn)如果為胸腺喀陡(T)

200bP護(hù)100bP+l圖3一 1osK一3p的rs334558位點(diǎn)PCR產(chǎn)物電泳圖PcR產(chǎn)物大小為344bp，條帶單一，無(wú)非特異性雜帶出現(xiàn)，說(shuō)明擴(kuò)增效果良 1.3GsK一3p的rs334s58位點(diǎn)Alul酶的限制性酶切及結(jié)果分析:600bP+，500bP+l40Obp+l300bP荊200bP+l100bp+，3明bP婦220bP+‘124bP釗圖3一 2GSK一3p的rs334558位點(diǎn)酶切結(jié)果電泳圖泳道1為marker;泳道2、3、4、6、9、10、11為雜合子TC型:泳道5、8為純合子CC型，泳道7為純合子TT型GsK一鄧的rs334558位點(diǎn)多態(tài)性為T>C，限制性內(nèi)切酶Alul酶識(shí)別位點(diǎn)為5’…Ao上CT…3’，，GSK一3p的rs334558位點(diǎn)目的pCR產(chǎn)物長(zhǎng)344bp，rs334558多態(tài)性位點(diǎn)如果為胸腺喀陡(T)
【學(xué)位授予單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號(hào)】：R749.16

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 洪震;;我國(guó)近年阿爾茨海默病流行病學(xué)研究現(xiàn)狀與展望[J];老年醫(yī)學(xué)與保健;2005年04期

本文編號(hào)：2620796