【摘要】：阿片類藥物成癮是一種慢性復(fù)發(fā)性腦疾病，它不僅直接引起成癮者自身的機(jī)能損傷、精神障礙、誘發(fā)各種感染性疾病，還帶來了各種社會(huì)問題。容易復(fù)吸是目前治療阿片類藥物成癮面臨的最大難題。眾多研究提示神經(jīng)適應(yīng)性改變（特別是腦獎(jiǎng)賞環(huán)路）是反復(fù)阿片暴露后復(fù)吸的生物學(xué)基礎(chǔ)。 伏核（NAc）是由中腦腹側(cè)被蓋區(qū)、前額葉皮質(zhì)、伏核組成腦獎(jiǎng)賞環(huán)路的重要組成部分。伏核主要參與動(dòng)機(jī)性行為和情感的調(diào)節(jié)，被認(rèn)為是腦內(nèi)邊緣腦區(qū)向運(yùn)動(dòng)腦區(qū)信息傳遞的閘門。NAc內(nèi)最主要神經(jīng)元為中等大小有棘神經(jīng)元（MSN）（約占95%），其內(nèi)部是由神經(jīng)元間相互連接的抑制性突觸傳遞為主的神經(jīng)元網(wǎng)絡(luò)。NAc內(nèi)神經(jīng)元興奮性低，需要由外源性的興奮性谷氨酸能突觸傳遞進(jìn)行驅(qū)動(dòng)。此種驅(qū)動(dòng)作用被認(rèn)為是NAc神經(jīng)元的同步化活動(dòng)和編碼信息的始動(dòng)因素，在調(diào)節(jié)NAc活動(dòng)和與其相關(guān)的動(dòng)機(jī)性行為中有決定性作用。 瞬態(tài)電壓感受器陽(yáng)離子通道，亞類V，成員1(TRPV1)受體是非選擇性陽(yáng)離子通道，可以被熱刺激、酸性環(huán)境、生物堿、內(nèi)源性脂類物質(zhì)等激活，激活后對(duì)多種陽(yáng)離子通透性增高。該受體在病理性痛的發(fā)生，自發(fā)痛，痛覺過敏，持續(xù)性慢性痛等領(lǐng)域發(fā)揮重要作用。近年來，TRPV1受體在中樞的作用逐步收到重視。新近研究發(fā)現(xiàn)，TRPV1受體可以易化谷氨酸能傳遞而不影響γ-氨基丁酸（GABA）能傳遞，伏核內(nèi)TRPV1受體與可卡因成癮可能密切相關(guān)。然而大鼠伏核內(nèi)TRPV1受體在阿片類成癮中調(diào)節(jié)興奮性突觸傳遞的作用尚未見報(bào)道。為探索大鼠伏核內(nèi)TRPV1受體在阿片類成癮復(fù)吸中作用，，本研究分為三部分。 第一部分：TRPV1受體激動(dòng)劑和拮抗劑對(duì)NAc的MSN接受的sEPSCs的作用研究 首先將大鼠被隨機(jī)分為生理鹽水（SAL）組和嗎啡（MOR）組， MOR組大鼠連續(xù)5天稱重后腹腔注射鹽酸嗎啡，此方法被證實(shí)可以成功誘導(dǎo)大鼠嗎啡條件性位置偏愛模型， SAL組大鼠相同方法注射等體積SAL。在距最后一次注射3天和3周時(shí)，斷頭取腦制作含有NAc的腦片。利用紅外可視化腦片膜片鉗系統(tǒng)將NAc核心部的MSN鉗制在-80mV，并向灌流液中加入GABA受體拮抗劑bicuculline，分離出谷氨酸介導(dǎo)的自發(fā)性興奮性突觸后電流（sEPSCs）。加入不同濃度TRPV1受體激動(dòng)劑capsaicin（CAP）后檢測(cè)其對(duì)sEPSCs的作用，或先加入TRPV1受體拮抗劑劑capsazepine（CPZ），后加入CAP，檢測(cè)CPZ對(duì)sEPSCs和CAP的作用。 結(jié)果顯示，與SAL組相比，在戒斷3天時(shí)1μM和10μM的CAP可以增加MOR組sEPSCs的頻率（P0.05）而不影響幅度（P0.05）。在戒斷3周時(shí)1μM和10μM的CAP可以更大程度的增加MOR組sEPSCs的頻率（P0.001）而不影響幅度（P0.05）。無論是戒斷3天還是3周，CPZ可以完全阻斷該種效應(yīng)且單獨(dú)應(yīng)用CPZ對(duì)sEPSCs無影響（P0.05）。 第二部分：TRPV1受體激動(dòng)劑和拮抗劑對(duì)NAc的MSN接受的eEPSCs及PPR的作用研究 與第一部分相同制作含有NAc的腦片后，利用紅外可視化腦片膜片鉗系統(tǒng)將NAc核心部的MSN鉗制在-80mV，并向灌流液中加入GABA的受體拮抗劑bicuculline，在伏核和皮質(zhì)之間白質(zhì)放置刺激電極后，同時(shí)記錄由谷氨酸介導(dǎo)的自發(fā)性興奮性突觸后電流（eEPSCs）及雙脈沖比率（PPR）。加入不同濃度TRPV1受體激動(dòng)劑CAP后檢測(cè)其對(duì)eEPSCs及PPR的作用，或先加入TRPV1受體拮抗劑劑CPZ，后加入CAP，檢測(cè)CPZ對(duì)eEPSCs及PPR和CAP的作用。 結(jié)果顯示，與SAL組相比，在戒斷3天時(shí)10nM和100nM的CAP可以增加MOR組eEPSCs的幅度（P0.05）并伴隨著PPR的降低（P0.05）。在戒斷3周時(shí)1μM和10μM的CAP可以更大程度的增加MOR組eEPSCs的幅度并便隨著PPR的降低（P0.001）。無論是戒斷3天還是3周，CPZ可以完全阻斷該種效應(yīng)且單獨(dú)應(yīng)用CPZ對(duì)eEPSCs及PPR無影響（P0.05）。第三部分：內(nèi)源性大麻素激活TRPV1受體對(duì)NAc的MSN接受的sEPSCs作用研究 與第一部分相同制作含有NAc的腦片后，利用紅外可視化腦片膜片鉗系統(tǒng)將NAc核心部的MSN鉗制在-80mV，在灌流液中加入GABA的受體拮抗劑bicuculline和大麻素1型受體拮抗劑AM251后，記錄MSN接受的sEPSCs。將被鉗制神經(jīng)元由-80mV去極化為0mV，維持10s以產(chǎn)生內(nèi)源性大麻素，檢測(cè)去極化對(duì)sEPSCs的影響。在預(yù)先加入CPZ的情況下，重復(fù)上述實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)去極化對(duì)sEPSCs的影響。 結(jié)果顯示，相比SAL組，戒斷3天時(shí)去極化可以增加MOR組sEPSCs的頻率（P0.05）而不影響幅度（P0.05）。在戒斷3周時(shí)去極化可以更大程度的增加MOR組sEPSCs的頻率（P0.001）而不影響幅度（P0.05）。在CPZ的作用下，去極化對(duì)sEPSCs的頻率無影響（P0.05）。 上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，大鼠嗎啡戒斷后伏核TRPV1受體調(diào)節(jié)谷氨酸能突觸傳遞的功能增強(qiáng)。大鼠嗎啡戒斷后伏核TRPV1受體通過突觸前機(jī)制調(diào)節(jié)谷氨酸能突觸傳遞。
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R749.6

【參考文獻(xiàn)】

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1 何維為;王鐵民;魏孝琴;;人腦伏核的應(yīng)用解剖學(xué)研究[J];中國(guó)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2007年01期

本文編號(hào)：2574554