本文關(guān)鍵詞：氧化異阿樸菲—硫辛酸雙分子雜合體抗AD作用及機制研究

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【摘要】：隨著人類平均壽命的逐年增加，全世界范圍內(nèi)的阿爾茨海默病發(fā)病率顯著升高，已嚴(yán)重威脅老年人的身體健康。阿爾茨海默病普遍認(rèn)同的發(fā)病機制包括膽堿能假說、β-淀粉樣蛋白級聯(lián)假說和氧化應(yīng)激假說。而目前認(rèn)為抗膽堿酯酶抑制劑是最有效治療藥物，其主要作用靶點為乙酰膽堿酯酶的活性位點。近年來，隨著乙酰膽堿酯酶外周陰離子位點的發(fā)現(xiàn)及其促進淀粉樣蛋白沉積作用被揭示，尋找或合成針對乙酰膽堿酯酶雙位點抑制劑以及偶聯(lián)抗氧化基團的多位點抑制劑成為抗阿爾茨海默病藥物研究熱點。 本課題組前期體外試驗證實蝙蝠葛提取物氧化異阿樸菲類生物堿及其化學(xué)修飾衍生物具有良好的抗阿爾茨海默病作用，主要作用位點為乙酰膽堿酯酶外周陰離子位點，本研究利用化學(xué)合成氧化異阿樸菲-9-位修飾物與硫辛酸雙分子雜合體，，通過體外、體內(nèi)試驗，探究氧化異阿樸菲-硫辛酸雙雜合體分子的抗AD活性及其作用機制,為后期的新藥開發(fā)提供初步試驗依據(jù)。 目的：探究氧化異阿樸菲-硫辛酸雙雜合體分子的抗AD活性及其作用機制,為后期的新藥開發(fā)提供初步試驗依據(jù)。方法：（1）體外試驗：a.購買商品化的AChE、BuChE,利用改良Ellman法檢測氧化異阿樸菲-硫辛酸雙雜合體分子抗膽堿酯酶活性；b.利用培養(yǎng)的細(xì)胞，MTT法檢測氧化異阿撲菲-硫辛酸雙分子雜合體細(xì)胞毒性及對H2O2損傷的保護作用。（2）體內(nèi)實驗：建立Aβ42轉(zhuǎn)基因果蠅模型，設(shè)立對照組、溶劑對照組、模型組、不同濃度梯度的給藥組，觀察以下指標(biāo)：（1）果蠅生存率、攀爬能力；（2）檢測果蠅腦組織SOD、MDA水平，衡量果蠅腦組織氧化應(yīng)激水平；（3）檢測果蠅腦組織ATP含量，衡量果蠅腦組織線粒體損傷水平；（4）果蠅腦組織切片HE染色，比較病理損傷程度。收集數(shù)據(jù)，作統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果與結(jié)論：本研究發(fā)現(xiàn)化合物8-11，細(xì)胞毒性低，體外都具有不同程度地抗AChE活性，其中以化合物8、9為甚�；衔�8-11作用于Aβ42轉(zhuǎn)基因果蠅，顯著降低果蠅腦組織氧化應(yīng)激水平，減輕線粒體損傷，抑制腦組織膽堿酯酶活性，腦組織病理損傷不同程度地改善。
【關(guān)鍵詞】：阿爾茨海默病 氧化異阿樸菲-硫辛酸雙分子雜合體 膽堿酯酶抑制劑 氧化應(yīng)激 線粒體損傷
【學(xué)位授予單位】：桂林醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R749.16
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• ABSTRACT7-10
• 英漢縮略詞對照表10-11
• 前言11-16
• 1 材料與方法16-32
• 1.1 實驗材料16-19
• 1.1.1 實驗動物16-17
• 1.1.2 果蠅普通玉米培養(yǎng)基的配制17-18
• 1.1.3 果蠅的培養(yǎng)18
• 1.1.4 果蠅的麻醉18
• 1.1.5 處女蠅的收集18
• 1.1.6 果蠅雜交18-19
• 1.2 實驗試劑19-21
• 1.3 實驗儀器21-23
• 1.4 實驗方法23-29
• 1.4.1 氧化異阿撲菲-硫辛酸雙雜合體合成路線23-24
• 1.4.2 AChE 和 BChE 活性檢測24-25
• 1.4.3 SH-SY5Y 細(xì)胞培養(yǎng) ,MTT法檢測細(xì)胞活性25
• 1.4.4 驗證模型是否成功25-29
• 1.5 研究氧化異阿撲菲-硫辛酸雙分子雜合體對 Elav-GAL4/UAS 系統(tǒng) Aβ42 轉(zhuǎn)基因果蠅模型神經(jīng)變性是否具有作用29
• 1.5.1 果蠅生存實驗29
• 1.5.2 果蠅爬行能力29
• 1.6 氧化異阿撲菲-硫辛酸雙分子雜合體對 Aβ42 轉(zhuǎn)基因果蠅模型的作用機制29-31
• 1.6.1 果蠅腦組織 SOD 活性和 MDA 含量測定29
• 1.6.2 果蠅腦組織 ATP 含量測定29-30
• 1.6.3 果蠅腦組織 CHE 含量測定30
• 1.6.4 果蠅腦部組織病理切片 HE 染色觀察30-31
• 1.7 統(tǒng)計方法31-32
• 2 結(jié)果32-42
• 2.1 體外實驗32-34
• 2.1.1 氧化異阿撲菲-硫辛酸雙分子雜合體抑制 AChE 和 BuChE 的活性32-33
• 2.1.2 氧化異阿撲菲-硫辛酸雙分子雜合體細(xì)胞毒性及對 H2O2損傷的SH-SY5Y 細(xì)胞的保護作用33-34
• 2.2 Elav-GAL4/UAS 系統(tǒng) Aβ42 轉(zhuǎn)基因果蠅34-42
• 2.2.1 模型組 Aβ42 mRNA 表達(dá)34-35
• 2.2.2 氧化異阿撲菲-硫辛酸雙分子雜合體對 Aβ42 轉(zhuǎn)基因果蠅爬行能力的影響35-37
• 2.2.3 氧化異阿撲菲-硫辛酸雙分子雜合體對 Aβ42 轉(zhuǎn)基因果蠅壽命的影響37-38
• 2.2.4 氧化異阿撲菲-硫辛酸雙分子雜合體對 Aβ42 轉(zhuǎn)基因果蠅腦組織 SOD和 MDA 活性的影響38-39
• 2.2.5 氧化異阿撲菲-硫辛酸雙分子雜合體對 Aβ42 轉(zhuǎn)基因果蠅腦組織 ATP含量及 AChE 活性的影響39-41
• 2.2.6 果蠅腦部病理切片染色結(jié)果41-42
• 3 討論42-45
• 3.1 藥物濃度與治療效應(yīng)42
• 3.2 雙點位學(xué)說42-43
• 3.3 自由基與氧化應(yīng)激43-44
• 3.4 線粒體損傷44-45
• 4 結(jié)論45-46
• 參考文獻(xiàn)46-49
• 綜述49-62
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄62-63
• 致謝63

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 ;Synthesis of Alkylene-linked Dimers of (-)-Huperzine A[J];Chinese Chemical Letters;2002年01期

2 吳婷;丁新生;董海蓉;王蔚;;MK-801對轉(zhuǎn)Aβ42基因果蠅阿爾茨海默病模型的神經(jīng)保護作用[J];南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2008年12期

3 陳蕾;房雷;房旭彬;茍少華;;新型多靶向乙酰膽堿酯酶抑制劑抗阿爾茨海默病研究進展[J];中國藥學(xué)雜志;2010年21期

4 楊文超;孫琦;喻寧熙;朱曉磊;楊光富;;治療阿爾茨海默病的乙酰膽堿酯酶抑制劑的分子設(shè)計:從多位點抑制劑到一藥多靶[J];藥學(xué)學(xué)報;2012年03期

本文編號：1111887