發(fā)布時(shí)間：2017-10-27 14:21

  本文關(guān)鍵詞：硒、鋅對(duì)老年性癡呆模型的保護(hù)作用研究

  更多相關(guān)文章： 硒、鋅 阿爾茨海默病 學(xué)習(xí)記憶障礙 Aβ_(25-35) MAO MDA TchE GSK-3β Ph-Tua

【摘要】：目的微量元素硒和鋅在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的含量是比較豐富的,并且在維持中樞神經(jīng)系統(tǒng)正常的生理功能起到特別重要的作用。本文主要從體內(nèi)實(shí)驗(yàn)和體外實(shí)驗(yàn)兩個(gè)方面進(jìn)行,研究硒、鋅對(duì)p淀粉樣蛋白(Aβ25-35)誘導(dǎo)胚鼠神經(jīng)元細(xì)胞神經(jīng)毒性的保護(hù)作用和對(duì)癡呆模型小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙及腦組織生化指標(biāo)改變的影響。方法體外實(shí)驗(yàn)：將胚鼠神經(jīng)元細(xì)胞用l0mol/L的Aβ25-35處理,建立體外老年癡呆模型。采用了細(xì)胞形態(tài)學(xué)方法、噻唑藍(lán)比色法(MTT)、乳酸脫氫酶(LDH)檢測(cè)法、微量丙二醛(MDA)檢測(cè)法、過氧化氫(H202)含量檢測(cè)法、一氧化氮(NO)含量檢測(cè)法、蛋白印跡方法檢測(cè)糖原合成酶激酶-3β (GSK-3β)、磷酸化Tau蛋白(Ph-Tau)水平。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)：取60只雄性昆明小鼠,體重18-20 g,隨機(jī)分組成6組,每組10只,每只小鼠按O.1ml/10g的劑量給藥。用D-半乳糖連續(xù)腹腔注射50天建立小鼠癡呆模型,灌胃給予硒、鋅進(jìn)行保護(hù),連續(xù)染毒45天,實(shí)驗(yàn)時(shí)間共50天,每天觀察動(dòng)物一般癥狀,采用避暗實(shí)驗(yàn)、穿梭實(shí)驗(yàn)、跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)觀察小鼠學(xué)習(xí)記憶能力,通過生化檢測(cè)方法檢測(cè)小鼠腦組織丙二醛(MDA)、乙酰膽堿酯酶(AchE)、單胺氧化酶(MAO)變化。結(jié)果體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果：Aβ25-35損傷組與對(duì)照組比較MTT代謝率下降,LDH釋放量增多,MDA含量增高,H202含量增高,NO含量增高,GSK-3p、 Ph-Tau水平增高,硒、鋅和硒鋅聯(lián)合處理組均不同程度地減少Aβ25-35的細(xì)胞毒性,硒保護(hù)作用差異顯著。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果：模型組小鼠與硒、鋅各給藥組小鼠相比,避暗實(shí)驗(yàn)顯示潛伏期縮短,進(jìn)入暗室次數(shù)增加,穿梭實(shí)驗(yàn)顯示潛伏期縮短,電擊穿梭次數(shù)增加；跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)潛伏期縮短,錯(cuò)誤率增加,腦組織內(nèi)的單胺氧化酶(MAO)、乙酰膽堿酯酶(AchE)活性和丙二醛(MDA)含量都明顯增高。提示硒、鋅和硒鋅聯(lián)合處理組均不同程度地改善小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙,降低腦組織內(nèi)MAO、 AchE、 MDA含量。結(jié)論微量元素硒、鋅對(duì)Aβ25-35處理胚鼠神經(jīng)元細(xì)胞損傷和毒性具有一定的保護(hù)作用,可以有效的改善癡呆模型小鼠的學(xué)習(xí)記憶障礙,改變腦組織內(nèi)MAO、MDA含量,因此硒、鋅可能在一定程度上對(duì)老年癡呆起到了調(diào)節(jié)和保護(hù)作用。
【關(guān)鍵詞】：硒、鋅 阿爾茨海默病 學(xué)習(xí)記憶障礙 Aβ_(25-35) MAO MDA TchE GSK-3β Ph-Tua
【學(xué)位授予單位】：延邊大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R749.16;R-332
【目錄】：

• 摘要5-6
• Abstract6-8
• 中英文縮寫詞8-11
• 第一章 前言11-18
• 第二章 實(shí)驗(yàn)材料18-21
• 2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物18
• 2.2 實(shí)驗(yàn)試劑18-20
• 2.3 實(shí)驗(yàn)儀器20-21
• 第三章 實(shí)驗(yàn)方法21-29
• 3.1 體外實(shí)驗(yàn)21-24
• 3.1.1 試劑配制21
• 3.1.2 細(xì)胞培養(yǎng)21-22
• 3.1.3 實(shí)驗(yàn)分組及藥物保護(hù)22
• 3.1.4 噻唑藍(lán)比色法(MTT)22
• 3.1.5 乳酸脫氫酶(LDH)含量測(cè)定22
• 3.1.6 過氧化氫、一氧化氮和丙二醛測(cè)定22
• 3.1.7 裂解細(xì)胞、測(cè)定蛋白濃度22-23
• 3.1.8 GSK-3β和P-Tau蛋白水平測(cè)定23-24
• 3.2 體內(nèi)實(shí)驗(yàn)24-28
• 3.2.1 試劑配制24-25
• 3.2.2 小鼠模型建立與分組25
• 3.2.3 跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)25
• 3.2.4 避暗實(shí)驗(yàn)25
• 3.2.5 穿梭實(shí)驗(yàn)25-26
• 3.2.6 腦組織勻漿及蛋白含量測(cè)定26
• 3.2.7 小鼠腦組織丙二醛檢測(cè)26-27
• 3.2.8 小鼠腦組織乙酰膽堿酯酶檢測(cè)27
• 3.2.9 小鼠腦組織單胺氧化酶檢測(cè)27-28
• 3.3 統(tǒng)計(jì)分析28-29
• 第四章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果29-36
• 4.1 體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果29-33
• 4.1.1 胚鼠皮層神經(jīng)元細(xì)胞的觀察29-30
• 4.1.2 MTT、LDH、MDA、H_2O_2、NO檢測(cè)結(jié)果30
• 4.1.3 蛋白濃度測(cè)定30-31
• 4.1.4 GSK-3β和Ph-Tau蛋白水平測(cè)定結(jié)果31-33
• 4.2 體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果33-36
• 4.2.1 跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)結(jié)果33
• 4.2.2 避暗實(shí)驗(yàn)結(jié)果33-34
• 4.2.3 穿梭實(shí)驗(yàn)結(jié)果34-35
• 4.2.4 硒、鋅對(duì)小鼠腦組織MAO、TChE活性影響35
• 4.2.5 硒、鋅對(duì)小鼠腦組織脂質(zhì)過氧化物MDA影響35-36
• 第五章 討論36-39
• 第六章 結(jié)論39-40
• 參考文獻(xiàn)40-46
• 致謝46-47
• 附錄A (攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文目錄)47

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