發(fā)布時(shí)間：2017-09-18 17:45

  本文關(guān)鍵詞：雄激素剝奪對(duì)油酸誘導(dǎo)大鼠急性肺損傷肺泡上皮鈉離子通道的影響

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【摘要】：目的：了解雄激素剝奪對(duì)油酸（oil acid,OA）誘導(dǎo)大鼠急性肺損傷/急性呼吸窘迫綜合征（Acute lung injury/Acute respiratory distresssyndrome，ALI/ARDS）模型中肺組織病理學(xué)評(píng)分、W/D差異、肺組織肺泡上皮鈉通道ａ亞基(Epithelial sodium channelａsubunit，ENaC-ａ)的mRNA及蛋白表達(dá)影響；完善性別激素在ALI中的可能作用； 方法：健康清潔級(jí)雄性SD大鼠20只，體重180-220g，購(gòu)自重慶醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心。動(dòng)物使用許可證號(hào)：SYXK（渝）2007-0001，整個(gè)飼養(yǎng)及實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，均遵守實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理保護(hù)相關(guān)規(guī)定，所有SD大鼠實(shí)驗(yàn)前8h禁食不禁飲。按隨機(jī)數(shù)字表法將大鼠分為對(duì)照組、模型組、假手術(shù)模型組、去勢(shì)手術(shù)模型組4組，每組5只。去勢(shì)手術(shù)模型組和假手術(shù)模型組分別于造模前兩周（14天）行開(kāi)腹雙側(cè)睪丸切除術(shù)或開(kāi)腹但不行睪丸切除。雙側(cè)睪丸切除后兩周時(shí)，雄性大鼠體內(nèi)雄激素水平降至最低水平。所有ALI/ARDS模型組均用尾靜脈注射油酸0.15ml/kg復(fù)制，通過(guò)觀察大鼠唇周粘膜顏色變化、毛發(fā)是否豎立、呼吸頻率是否增快及活動(dòng)能力是否減弱來(lái)判斷造模成功與否。各組大鼠于造模成功后6h行開(kāi)胸手術(shù)并取相應(yīng)的肺組織備用：右上肺行W/D比檢測(cè)，右中肺行組織病理學(xué)檢測(cè)，右下肺行逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（Reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR）檢測(cè)，左肺行蛋白質(zhì)免疫印跡法(western blot,WB)檢測(cè)。 結(jié)果： 1.1去勢(shì)手術(shù)及假手術(shù)后對(duì)大鼠一般情況的影響 無(wú)論去勢(shì)手術(shù)組還是假手術(shù)組，2周后均沒(méi)有任何動(dòng)物死亡，而其中去勢(shì)手術(shù)組大鼠體重較正常組大鼠及假手術(shù)組大鼠無(wú)明顯增加。 1.2大鼠造模后的一般情況 正常組大鼠一般情況良好,精神狀態(tài)可，呼吸平穩(wěn),頻率為（84.50±3.749）次/分,唇周皮膚粘膜未見(jiàn)紫紺，且無(wú)一例大鼠死亡。模型組大鼠于造模后1~6h呼吸頻率顯著增加,達(dá)（119.10±7.172）次/分,全身毛發(fā)豎立，唇周粘膜發(fā)紺，蜷縮成團(tuán)，活動(dòng)明顯減少。假手術(shù)模型組與模型組大鼠造模后表現(xiàn)類似，其中呼吸頻率同樣顯著增加至(118.20±5.808)次/分,唇周粘膜紫紺，，全身毛發(fā)豎立。去勢(shì)手術(shù)后大鼠造模后呼吸頻率增加至（106.70±8.920）次/分，活動(dòng)較少，全身毛發(fā)豎立，唇周發(fā)紺，但其呼吸頻率增加比模型組和假手術(shù)模型組慢，并具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 1.3肺組織形態(tài)學(xué)觀察及病理學(xué)評(píng)分 開(kāi)胸后肉眼下觀察發(fā)現(xiàn)，正常組肺組織表面光滑，呈粉紅色，未見(jiàn)明顯充血、水腫，胸腔內(nèi)無(wú)血性積液，HE染色光鏡下觀察可見(jiàn)肺泡壁結(jié)構(gòu)完整清晰，無(wú)明顯炎癥細(xì)胞及水腫液肺泡內(nèi)聚集；急性肺損傷模型組肉眼觀察發(fā)現(xiàn)肺組織呈暗紅色，肺組織明顯充血、水腫，肺組織表面可見(jiàn)廣泛點(diǎn)狀或灶狀出血，胸腔內(nèi)可見(jiàn)血性液體聚集, HE染色光鏡下觀察可見(jiàn)肺泡壁斷裂不完整，炎性細(xì)胞及肺水廣泛聚集于肺泡腔內(nèi)；假手術(shù)模型組無(wú)論肉眼下觀察還是HE染色光鏡下觀察均可見(jiàn)同模型組類似的改變；去勢(shì)手術(shù)模型組肉眼下可見(jiàn)肺組織輕度腫脹，部分肺組織呈暗紅色，偶可見(jiàn)點(diǎn)狀出血灶，胸腔內(nèi)少許暗紅色積液，HE染色光鏡下觀察可見(jiàn)輕度水腫，較多炎細(xì)胞及紅細(xì)胞浸潤(rùn)，但病理學(xué)評(píng)分顯著小于模型組及假手術(shù)模型組。參照文獻(xiàn)對(duì)4組大鼠肺損傷病理學(xué)評(píng)分結(jié)果示，模型組、假手術(shù)模型組及去勢(shì)手術(shù)模型組均較正常組升高差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其中假手術(shù)模型組與模型組組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但去勢(shì)手術(shù)模型組病理學(xué)評(píng)分較模型組和假手術(shù)模型組減少，且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 1.4肺濕／干質(zhì)量比值 所有模型組W/D比值顯著高于正常對(duì)照組（模型組vs.對(duì)照組，P=0.000；假手術(shù)模型組vs.對(duì)照組，P=0.000；去勢(shì)手術(shù)模型組vs.對(duì)照組，P=0.000），去勢(shì)手術(shù)模型組W/D比值較模型組顯著降低（P=0.000），而假手術(shù)模型組中W/D比值與模型組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.183）。 1.5雄激素剝奪對(duì)肺組織中ENaC-ａ基因在轉(zhuǎn)錄水平的影響 RT-PCR檢測(cè)肺組織中ENaC-ａmRNA的表達(dá)發(fā)現(xiàn)，所有模型組其肺組織中ENaC-ａmRNA的表達(dá)，都比正常對(duì)照組顯著降低（模型組vs.對(duì)照組，P=0.000；假手術(shù)模型組vs.對(duì)照組，P=0.000；去勢(shì)手術(shù)模型組vs.對(duì)照組，P=0.001）。而去勢(shì)手術(shù)模型組，其肺組織中的ENaC-ａmRNA的表達(dá)比模型組顯著上調(diào)并具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=0.002）；假手術(shù)模型組和模型組中的表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=0.940）。 1.6雄激素剝奪對(duì)肺組織中ENaC-ａ基因在翻譯水平的影響 通過(guò)western blot檢查發(fā)現(xiàn)，所有模型組中肺組織中ENaC-ａ蛋白的表達(dá)比正常組顯著降低（模型組vs.對(duì)照組，P=0.000；假手術(shù)模型組vs.對(duì)照組，P=0.000；去勢(shì)手術(shù)模型組vs.對(duì)照組，P=0.045）；而去勢(shì)手術(shù)模型組，其肺組織中ENaC-ａ蛋白的表達(dá)比模型組顯著上調(diào)并具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=0.030）；假手術(shù)模型組與模型組中的表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=0.834）。 結(jié)論： 1）降低雄激素水平可緩解急性肺損傷肺組織病理?yè)p傷程度，減少肺水聚集； 2）降低雄激素水平可促進(jìn)急性肺損傷肺組織中肺泡上皮細(xì)胞鈉離子通道的mRNA及蛋白的表達(dá)； 3）通過(guò)降低體內(nèi)雄激素水平，間接提示雄激素本身可能在急性肺損傷中起著不利作用，通過(guò)抑制肺泡上皮細(xì)胞鈉離子通道的mRNA及蛋白的表達(dá)，促進(jìn)肺水聚集，加重肺組織病理?yè)p傷程度，導(dǎo)致男性在ALI/ARDS患病中死亡率高于女性。
【關(guān)鍵詞】：急性肺損傷 雄激素 肺泡上皮鈉離子通道
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R563.8
【目錄】：

• 英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照5-6
• 摘要6-10
• ABSTRACT10-15
• 前言15-16
• 1 材料與方法16-24
• 2 結(jié)果24-27
• 3 討論27-31
• 結(jié)論31-32
• 參考文獻(xiàn)32-34
• 附圖34-36
• 文獻(xiàn)綜述36-48
• 參考文獻(xiàn)43-48
• 致謝48-49
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表文章49-50

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 程青,陳忠慶;外源性雌激素在脂多糖誘導(dǎo)大鼠急性肺損傷中的作用[J];西南國(guó)防醫(yī)藥;2004年04期

2 ;Protective effect of raloxifene on lipopolysaccharide and acid-induced acute lung injury in rats[J];Acta Pharmacologica Sinica;2007年10期

3 陳中華,周有生;雌激素及其受體在急性肺損傷中作用的研究[J];中國(guó)急救醫(yī)學(xué);2004年05期

本文編號(hào)：876956