Neuritin蛋白在大鼠腦損傷后時相性表達的研究
本文關鍵詞:Neuritin蛋白在大鼠腦損傷后時相性表達的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:創(chuàng)傷性顱腦損傷(traumatic brain injury TBI)是指頭部突然受到外力的撞擊,導致的顱骨、腦膜、腦血管、腦組織、腦神經(jīng)的結構改變、破壞,,而造成的損傷。TBI在所有的創(chuàng)傷類型中,其死亡率和致殘率是最高,預后差。各類神經(jīng)營養(yǎng)因子為TBI的預后營造了良好的基礎環(huán)境,在防止TBI后神經(jīng)細胞的退變和凋亡等方面均發(fā)揮著重要的作用。Neuritin作為一種新的神經(jīng)可塑性相關的神經(jīng)營養(yǎng)因子,在顱腦損傷后的表達情況及表達規(guī)律,目前尚不清楚。 目的:通過建立大鼠創(chuàng)傷性腦損傷模型,檢測神經(jīng)突出蛋白(neuritin)在大鼠TBI后不同時間點腦組織中表達情況及規(guī)律,探討neuritin蛋白在大鼠腦損傷后修復過程中的意義,為進一步研究neuritin蛋白在腦損傷后神經(jīng)營養(yǎng)作用奠定一定的基礎。 方法:42只SD大鼠隨機分為正常組(n=6)和手術組(n=36)。手術組分為對照組和實驗組,對照組為左側大腦半球,實驗組為右側大腦半球,術后分為6小時、12小時、24小時、3天、7天、14天6個亞組,每組6只。通過改良Feeney法建立大鼠腦損傷模型,使用八臂迷宮對模型進行神經(jīng)行為學評分。HE染色觀察不同時間點腦挫裂傷組織及神經(jīng)細胞形態(tài)變化。應用免疫組化檢測不同時間點腦挫裂傷組織中neuritin蛋白的表達情況,Western-blot檢測腦損傷后腦挫裂傷組織中neuritin蛋白的表達量變化。 結果:八臂迷宮評分結果顯示:建模后大鼠的工作記憶錯誤次數(shù)、參考記憶錯誤次數(shù)和測試時間較術前增加,具有統(tǒng)計學意義(p0.05)。HE染色發(fā)現(xiàn):實驗組6小時神經(jīng)元細胞開始出現(xiàn)水腫,24小時水腫達到高峰,3天出現(xiàn)大量壞死,7天膠質細胞大量增生,14天恢復正常,對照組各時間點與正常組無明顯變化。免疫組化檢測顯示:實驗組6小時觀察到神經(jīng)細胞胞膜、胞漿陽性表達增高,12小時-7天呈強陽性表達,14天表達明顯降低,呈弱陽性;對照組、正常組均呈弱陽性表達。Western-blot檢測neuritin蛋白含量顯示:實驗組6小時開始增高,24小時達到高峰,3天稍降低持續(xù)到7天,與對照組、正常組均有統(tǒng)計學差異(p<0.01),14天明顯降低較正常組仍有統(tǒng)計學差異(p<0.05)。 結論:創(chuàng)傷性顱腦損傷后,neuritin蛋白在腦損傷組織中表達明顯增高,并有一定的時相性,提示neuritin蛋白可能在腦損傷后修復過程中起著重要作用。
【關鍵詞】:Neuritin 創(chuàng)傷性腦損傷 時相性表達
【學位授予單位】:石河子大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2014
【分類號】:R651.15
【目錄】:
- 附件3-6
- 摘要6-7
- Abstract7-8
- 目錄8-9
- 英文縮略詞表9-10
- 前言10-13
- 材料與方法13-25
- 1、實驗材料13-16
- 1.1 實驗動物13
- 1.2 主要儀器與器械13-14
- 1.3 主要試劑14
- 1.4 溶液配制14-16
- 2、實驗方法16-25
- 2.1 實驗技術路線16-17
- 2.2 八臂迷宮實驗17
- 2.3 實驗動物分組17-18
- 2.4 改良 Feeney 法建立大鼠 TBI 模型18
- 2.5 八臂迷宮檢測神經(jīng)行為學18-19
- 2.6 標本采集19
- 2.7 石蠟切片制作19-20
- 2.8 HE 染色觀察腦組織形態(tài)學變化20
- 2.9 免疫組化染色觀察腦組織中 neuritin 蛋白的表達情況20-21
- 2.10 Western-blot 檢測腦組織中 neuritin 蛋白的表達量21-24
- 2.11 統(tǒng)計學方法24-25
- 實驗結果25-31
- 1.八臂迷宮神經(jīng)行為學評分結果25-26
- 2.完整的腦組織形態(tài)26-27
- 3. HE 染色鑒定 TBI 模型27
- 4. HE 染色觀察挫裂傷灶神經(jīng)細胞形態(tài)變化27-28
- 5. 免疫組化染色觀察腦組織中 Neuritin 表達的情況28-29
- 6. Western-blot 檢測腦組織中 Neuritin 表達量的變化29-31
- 討論31-34
- 結論和展望34-35
- 參考文獻35-39
- 綜述39-47
- 參考文獻44-47
- 致謝47-48
- 作者簡介及在學期間成果48
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本文關鍵詞:Neuritin蛋白在大鼠腦損傷后時相性表達的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
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