本文關(guān)鍵詞：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)急性肝衰竭大鼠腸道屏障保護(hù)作用的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究目的： 本課題采用貼壁培養(yǎng)法分離純化大鼠BMSCs,探討尾靜脈移植BMSCs對(duì)急性肝衰竭大鼠腸道屏障的作用。 研究方法： 1.分離、培養(yǎng)、鑒定大鼠BMSCs； 2.制備不同TAA劑量誘導(dǎo)下急性肝衰竭腸道屏障損傷大鼠模型,觀察死亡率,制作肝臟和回腸組織HE染色病理切片,選定TAA造模合適劑量； 3.制備急性肝衰竭腸道屏障損傷大鼠模型,干預(yù)組經(jīng)尾靜脈輸入Brdu標(biāo)記的BMSCs,模型組輸入PBS液。于24h、48h、72h和96h分別處死大鼠,取腹主動(dòng)脈血和回腸組織,檢測(cè)內(nèi)毒素、二胺氧化酶、TNF-α和IL-6水平及變化,制作回腸組織HE染色病理切片和冰凍切片； 4.設(shè)立干預(yù)死亡率觀察組和模型死亡率觀察組,觀察大鼠死亡率。 研究結(jié)果： 1.所培養(yǎng)細(xì)胞呈均一梭形,漩渦狀排列；具有對(duì)塑料底物黏附性；表達(dá)細(xì)胞表型CD29,不表達(dá)造血細(xì)胞表型CD34；體外具有分化為脂肪細(xì)胞的能力,且增殖能力強(qiáng),可鑒定為BMSCs； 2.采用不同劑量TAA灌胃造模均可造成肝損傷,同時(shí)伴有腸道屏障損傷,300mg/(kg-d)是大鼠急性肝衰竭伴腸道屏障損傷模型建立的適宜造模劑量； 3.BMSCs可成功定植在大鼠受損腸道組織中； 4.干預(yù)組和模型組血漿內(nèi)毒素、二胺氧化酶、TNF-α和IL-6水平均明顯升高(P0.05)；除干預(yù)組二胺氧化酶48h與24h比較,無(wú)明顯升高外(P0.05),干預(yù)組和模型組內(nèi)毒素、二胺氧化酶、TNF-α和IL-6水平隨時(shí)間增加不斷升高(P0.05)；24h干預(yù)組與模型組內(nèi)毒素水平無(wú)明顯差異(P0.05),而48h、72h和96h,干預(yù)組內(nèi)毒素水平明顯低于模型組(P0.05)；24h和48h干預(yù)組與模型組二胺氧化酶水平無(wú)明顯差異(P0.05),而72h和96h,干預(yù)組二胺氧化酶水平明顯低于模型組(P0.05)；在4個(gè)時(shí)間點(diǎn),干預(yù)組TNF-α和IL-6水平均明顯低于模型組(P0.05)； 5.模型死亡率觀察組死亡率為52%,高于干預(yù)死亡率觀察組(P0.05)； 6.回腸組織Western blot結(jié)果,48h干預(yù)組與模型組IL-6水平無(wú)明顯差異(P0.05),干預(yù)組TNF-α水平明顯低于模型組(P0.05)。96h干預(yù)組TNF-α和IL-6水平均明顯低于模型組(P0.05)； 7.干預(yù)組回腸組織病變程度比模型組更輕。研究結(jié)論： 1.貼壁培養(yǎng)法可獲得較高純度的BMSCs,并可最大限度保持細(xì)胞的活性； 2.TAA灌胃的適宜劑量為300mg/(kg-d),能成功建立急性肝衰竭腸道屏障損傷模型; 3.BMSCs可經(jīng)大鼠尾靜脈移植,早期進(jìn)入腸道受損部位,為受損腸道屏障的修復(fù),提供重要基礎(chǔ)條件； 4.BMSCs經(jīng)大鼠尾靜脈移植,可明顯降低急性肝衰竭大鼠血漿內(nèi)毒素及二胺氧化酶水平,同時(shí)可以降低血漿和腸組織中TNF-α和IL-6等炎癥因子水平,減輕腸道器質(zhì)性損傷,降低死亡率,表明BMSCs早期移植干預(yù),對(duì)急性肝衰竭大鼠腸道屏障損傷具有明顯的保護(hù)作用。
【關(guān)鍵詞】：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 急性肝衰竭 腸道屏障 保護(hù)
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類(lèi)號(hào)】：R575.3
【目錄】：

• 英文~.略詞表5-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-11
• 前言11-12
• 第一部分 大鼠BMSCs的分離、培養(yǎng)及鑒定12-20
• 實(shí)驗(yàn)材料12-14
• 實(shí)驗(yàn)方法14-16
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果16-20
• 第二部分 大鼠急性肝衰竭腸道屏障損傷模型的建立20-24
• 實(shí)驗(yàn)材料20
• 實(shí)驗(yàn)方法20-21
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果21-24
• 第三部分 大鼠BMSCs腸道組織內(nèi)示蹤及對(duì)ALF大鼠腸道屏障保護(hù)作用的研究24-47
• 實(shí)驗(yàn)材料24-26
• 實(shí)驗(yàn)方法26-30
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果30-47
• 討論47-56
• 結(jié)論56-57
• 參考文獻(xiàn)57-63
• 文獻(xiàn)綜述63-71
• 參考文獻(xiàn)68-71
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章71-72
• 致謝72

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：499478