目的:觀察高遷移率族蛋白B1（HMGB1）對人臍靜脈內(nèi)皮細胞（HUVEC）屏障通透性的損傷及普通肝素（UFH）的保護作用,探討UFH對HMGB1介導的血管內(nèi)皮鈣黏蛋白（VE-cadherin）表達下調(diào)的保護機制。研究方法:體外培養(yǎng)HUVEC并傳代,待細胞融合生長至80%時隨機分為4組:磷酸鹽緩沖液（PBS）對照組（200μL PBS）、重組人高遷移率族蛋白B1（rhHMGB1）處理組（100μg/L rhHMGB1）、UFH對照組（10kU/L UFH）、UFH預處理組（10 kU/L UFH+100μg/L rhHMGB1）。各組細胞經(jīng)不同處理24 h后,采用四甲基偶氮唑鹽（MTT）比色法測定內(nèi)皮細胞活性,采用Transwell法測定內(nèi)皮細胞通透性,采用免疫熒光法觀察VE-cadherin的表達及分布,采用蛋白質免疫印跡試驗（Western Blot）測定VE-cadherin及磷酸化p38絲裂素活化蛋白激酶（p-p38MAPK）的蛋白表達。結果:經(jīng)100μg/L的rhHMGB1處理24 h后,內(nèi)皮細胞活性與PBS對照組差異無統(tǒng)計學意義（A值:0.230±0.004比0.255±0.... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學遼寧省

【文章頁數(shù)】：36 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

各組HUVEC培養(yǎng)24h后VE-cadherinp-p38MAPK

中國醫(yī)科大學碩士學位論文9圖3.2熒光顯微鏡下觀察各組人臍靜脈內(nèi)皮細胞（HUVEC）血管內(nèi)皮鈣黏蛋白（VE-cadherin）陽性表達綠色熒光為VE-cadherin陽性表達（IF×400）。注：圖中熒光顯微鏡下觀察各組人臍靜脈內(nèi)皮細胞（HUVEC）血管內(nèi)皮鈣黏蛋白（VE-cadherin）陽性表達綠色熒光為VE-cadherin陽性表達。PBS對照組（A）可見免疫熒光線條連續(xù)且光滑；rhHMGB1處理組（B）可見熒光線條暗淡，多處斷裂；UFH對照組（C）可見熒光線條較為清晰；UFH預處理組（D）可見免疫熒光較rhHMGB1處理組連接更為緊密免疫熒光染色。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]血清高遷移率族蛋白B1、調(diào)節(jié)性T細胞（Treg）水平對膿毒癥患者腸屏障狀況及臨床預后的影響[J]. 楊靜,何浩,譚波,陳麗.  中華醫(yī)院感染學雜志. 2020(01)
[2]血管內(nèi)皮通透性的細胞及信號轉導調(diào)控機制[J]. 王雪巖,劉瑞霞,郭易楠,陰赪宏.  微循環(huán)學雜志. 2018(04)
[3]高遷移率族蛋白1在膿毒癥中作用研究進展[J]. 尹曉晗,欒正剛.  創(chuàng)傷與急危重病醫(yī)學. 2014(03)
[4]高遷移率族蛋白B1在炎癥性疾病中的研究進展[J]. 張蕊,鮑紅光.  現(xiàn)代生物醫(yī)學進展. 2012(30)
[5]p38MAPK信號轉導通路與細胞凋亡研究進展[J]. 王譽霖,張勵才.  慢性病學雜志. 2010(12)
[6]p38絲裂素活化蛋白激酶/核轉錄因子-κB轉導通路在膿毒癥所致內(nèi)皮細胞凝血功能障礙中的作用[J]. 梁英健,馬曉春,李鑫.  中國危重病急救醫(yī)學. 2010 (09)
[7]肝素在膿毒癥治療中的應用前景[J]. 馬曉春,李旭.  中國危重病急救醫(yī)學. 2010 (09)
[8]重癥感染患者早期應用小劑量肝素治療的臨床研究[J]. 張曉娟,馬曉春.  中華外科雜志. 2006(17)
[9]高遷移率族蛋白B1的致炎細胞因子作用研究進展[J]. 朱明光,常雅萍.  國際免疫學雜志. 2006(04)

碩士論文
[1]羅格列酮對膿毒癥大鼠肺組織TLR4和STAT3活性的影響及其機制探討[D]. 張蕊.南京醫(yī)科大學 2013
[2]100%氧氣吸入對膿毒血癥動物臟器損傷的保護作用及其機制研究[D]. 秦明哲.第四軍醫(yī)大學 2008



本文編號：3597388