發(fā)布時間：2021-09-13 18:06

　　目的:創(chuàng)傷性腦損傷（traumatic brain injury,TBI）,又稱為腦外傷,是在外力的作用下引起的腦損傷,其病理過程相當復雜,嚴重的可以導致重度殘疾甚至死亡。TBI可引起繼發(fā)性腦損傷,包括內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激（endoplasmic reticulum stress,ERS）、凋亡和自噬等。盡管研究人員已經(jīng)證明Salubrinal（p-e IF2α選擇性磷酸酶抑制劑）可以改善小鼠TBI后神經(jīng)功能缺損,但需對其神經(jīng)保護機制進一步研究以確認其潛在臨床前價值。本研究旨在探究TBI后Salubrinal治療對小鼠神經(jīng)損傷的保護作用及其可能機制。方法:用改良的自由落體裝置建立ICR小鼠TBI模型。為了觀察TBI后ERS相關(guān)蛋白的表達,小鼠分別于損傷后6h、1d、2d、3d、7d、10d和14d處死,術(shù)后第2天處死對照小鼠。TBI后2d,利用免疫熒光法觀察CHOP在NVU組成細胞（包括神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細胞、小膠質(zhì)細胞、血管內(nèi)皮細胞及周細胞）的共表達情況。為了控制手術(shù)造成的非特異性影響,假手術(shù)（sham）組動物僅開顱不損傷皮質(zhì)。為了探究Salubrinal對TBI的影響,實驗分組如下:vehic... 

【文章來源】：蘇州大學江蘇省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

實驗的時間流程圖

13腦外傷后Salubrinal通過抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激、自噬和凋亡發(fā)揮神經(jīng)保護作用第一部分圖2.（A-D）CHOP與NeuN標記的神經(jīng)元共定位。（E-H）CHOP與GFAP標記的星形膠質(zhì)細胞的共定位。（I-L）CHOP與Iba-1標記的小膠質(zhì)細胞共定位。（M-P）CHOP與CD31標記的血管內(nèi)皮細胞共定位。（Q-T）CHOP與PDGFR-β標記的周細胞共定位。（U）NeuN、GFAP、Iba-1、CD31、PDGFR-β和CHOP共陽性細胞的半定量分析。比例尺為30μm，n=5/組。小結(jié)（1）TBI后，ERS相關(guān)蛋白p-eIF2α、GRP78及CHOP呈時序性表達表達，并于傷后2d及3d呈峰值表達；（2）CHOP蛋白可與神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細胞、小膠質(zhì)細胞、血管內(nèi)皮細胞和周細胞等NVU主要組成細胞共定位表達。

18第二部分腦外傷后Salubrinal通過抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激、自噬和凋亡發(fā)揮神經(jīng)保護作用臺的時間上表現(xiàn)出更大的延遲。TBI后，Sal+TBI組動物在第10天到第13天的尋找平臺時間相對于Veh+TBI組小鼠明顯減少；傷后第14天，相對于Veh+TBI組小鼠，Sal+TBI組小鼠在平臺象限區(qū)的時間明顯延長（以上結(jié)果見圖4B-C）。上述研究數(shù)據(jù)說明Salubrinal治療可以促進學習記憶功能的恢復。（4）TBI后第21天，與TBI+Veh組相比，TBI+Sal組小鼠腦損傷的體積明顯減少（以上結(jié)果見圖4D），表明Salubrinal可以防止TBI后神經(jīng)細胞的丟失與減少。圖3.（A-D）傷后第2天Veh+TBI組小鼠皮質(zhì)及海馬CA1、CA3和DG區(qū)PI陽性細胞。（E-H）傷后第2天Sal+TBI組小鼠皮質(zhì)及海馬CA1、CA3和DG區(qū)PI陽性細胞。（I）PI陽性細胞的定量顯示，TBI后第2天，相較于Veh+TBI組，Sal+TBI組小鼠皮質(zhì)及海馬CA1、CA3和DG區(qū)的PI陽性細胞數(shù)量明顯減少。#P<0.05,##P<0.01或###P<0.001與Veh+TBI組小鼠相比。比例尺為50μm，n=5/組。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]缺氧預處理對顱腦損傷大鼠皮質(zhì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激蛋白P-eIF2α表達的影響[J]. 劉光杰,劉家傳,王金標,楊艷艷,張星,王春琳,湯宏,徐燊.  中國微侵襲神經(jīng)外科雜志. 2016(02)

碩士論文
[1]GRP78及CHOP在SAH后神經(jīng)元細胞凋亡中作用的研究[D]. 黃嘯元.石河子大學 2015
[2]內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激通過自噬途徑對蛛網(wǎng)膜下腔出血后早期腦損傷發(fā)揮神經(jīng)保護作用[D]. 張立新.浙江大學 2014



本文編號：3395094