【摘要】：研究目的 從全球各個國家來看,蛛網膜下腔出血(Subarachnoid hemorrhage,SAH)都是致死和致殘的重要的疾病之一。在過去,蛛網膜下腔出血的研究主要集中在蛛網膜下腔出血后的腦血管痙攣。但至目前為止,有效治療蛛網膜下腔出血后腦損傷的方法尚未發(fā)現。新的研究資料認為蛛網膜下腔出血后的早期腦損傷(Early brain injury, EBI)是蛛網膜下腔出血患者死亡的一個重要原因。蛛網膜下腔出血后,發(fā)生神經組織廣泛的細胞凋亡,特別是海馬(Hippocampus,HIP)神經元的凋亡,這些組織細胞的凋亡參與了EBI發(fā)生發(fā)展的病理過程。 因此,減輕SAH后EBI可以有效地降低蛛網膜下腔出血患者的死亡率,從而改善SAH患者的神經功能。近期的研究表明,在48小時內孕酮對腦損傷具有明顯的神經保護作用,可以減輕組織損害,恢復和改善創(chuàng)傷性腦損傷,穩(wěn)定血腦屏障和減少腦水腫,抑制脂質過氧化,減少谷氨酸鹽的釋放,尤其是可以減輕神經細胞的凋亡。由于目前孕酮對SAH后EBI的研究較少,孕酮對蛛網膜下腔出血后早期腦損傷的作用仍不十分清楚。 我們假設：孕酮可能通過抑制細胞凋亡減輕蛛網膜下腔出血后的早期腦損傷。因此,本研究通過制備大鼠蛛網膜下腔出血模型,探討孕酮對大鼠蛛網膜下腔出血后早期腦損傷的保護作用及其可能機制。 研究方法 1.實驗對象選擇標準：48只SD(Sprague Dawley,SD)雄性大鼠,體重在250g至300g之間,隨機分配到三個實驗組,假手術對照組(Sham control group,sham組)、蛛網膜下腔出血組(Subarachnoid hemorrhage group,SAH組)、和孕酮治療組(Progesterone treatment group,PG組)。 2.蛛網膜下腔出血模型的建立：利用自體血二次注入枕大池法建立大鼠蛛網膜下腔出血模型,48h后取腦。 3.給藥：孕酮治療組分別于24h給予16mg/kg的孕酮腹腔注射,假手術對照組和蛛網膜下腔出血組則給予相同劑量的生理鹽水。 4.凋亡的檢測：海馬神經元的組織形態(tài)學變化應用蘇木素-伊紅(HE)染色觀察；海馬神經元凋亡應用原位末端標記法(TUNEL)檢測；大鼠海馬中Bcl-2、Bax的表達運用免疫組織化學法檢測。 5.統計學分析：應用SPSS18.0統計學軟件對所得資料進行統計分析,數據以x±s表示。應用單因素方差分析,P0.05為差異有統計學意義。 結果 1.孕酮對細胞凋亡的影響：Sham對照組無明顯TUNELP日性細胞發(fā)現,而SAH組陽性細胞數明顯增多(P0.05)；應用孕酮治療組凋亡數目明顯少于SAH組,且具有統計學意義(P0.05),PG組與Sham組相比凋亡細胞增多(P0.05)。 2.免疫組化法檢測凋亡相關基因發(fā)現,與蛛網膜下腔出血組相比,孕酮組促凋亡蛋白Bax表達下降(P0.05),抗凋亡蛋白Bcl-2表達升高(P0.05),并且海馬凋亡細胞數顯著減少。因此,孕酮可能通過促進抗凋亡蛋白Bcl-2的表達,抑制促凋亡蛋白Bax的水平,升高Bcl-2與Bax之間的比值,進而抑制海馬神經元的凋亡,對SAH后EBI發(fā)揮腦保護作用。 結論 孕酮可能通過抑制大鼠蛛網膜下腔出血后早期腦損傷神經元的凋亡,減輕大鼠蛛網膜下腔出血后早期腦損傷。
【學位授予單位】：山東大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R651.15

【參考文獻】

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本文編號：2569053