【摘要】：背景:骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療心肌梗死是近年來的研究熱點,但是心肌梗死區(qū)域的缺血缺氧微環(huán)境和早期炎癥反應(yīng)不利于移植細(xì)胞的存活,影響治療效果。目的:探討PTEN基因沉默骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞治療急性心肌梗死的效果。方法:(1)SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞隨機分為3組,空白對照組不進行任何處理,陰性對照組用Lipofectamin2000轉(zhuǎn)染無意義的NCsiR NA,RNAi組用Lipofectamin2000轉(zhuǎn)染PTEN基因特異的siR NA。采用MTT法描繪細(xì)胞生長曲線,流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期;(2)取30只SD大鼠建立心肌梗死模型,隨機分為3組,每組10只,分別為空白對照組、陰性對照組、RNAi組。建模6 h后,使用微量注射器和立體定位儀在左心室前壁梗死區(qū)中心注射相應(yīng)的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,治療后4周進行超聲心功能檢測,采用熒光顯微鏡觀察細(xì)胞的存活和增殖情況。結(jié)果與結(jié)論:(1)RNAi組骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在培養(yǎng)各時間點的吸光度值均顯著大于空白對照組和陰性對照組;(2)RNAi組S+G2期細(xì)胞占總數(shù)的比例顯著大于空白對照組和陰性對照組(P0.05);(3)RNAi組大鼠心肌組織中骨髓間充質(zhì)細(xì)胞數(shù)量顯著多于空白對照組和陰性對照組(P0.05);(4)治療4周,RNAi組的左心室射血分?jǐn)?shù)、左心室短軸縮短率顯著小于空白對照組和陰性對照組(P0.05);(5)體外實驗表明PTEN基因沉默能有效地促進骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的增殖,抑制細(xì)胞凋亡;(6)體內(nèi)實驗表明PTEN基因沉默的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在心肌梗死區(qū)域更易存活和擴增,心功能改善明顯。
[Abstract]:Background: bone marrow mesenchymal stem cell transplantation for myocardial infarction is a hot topic in recent years, but the ischemic and hypoxic microenvironment and early inflammatory reaction in myocardial infarction area are not conducive to the survival of transplanted cells and affect the therapeutic effect. Objective: to investigate the effect of PTEN gene silencing bone marrow mesenchymal stem cells in the treatment of acute myocardial infarction. Methods: (1) Bone marrow mesenchymal stem cells of SD rats were randomly divided into three groups: blank control group without any treatment, negative control group with Lipofectamin2000 transfection of meaningless NCsiR NA,RNAi group with Lipofectamin2000 transfection of PTEN gene specific siR NA. MTT method was used to depict cell growth curve and flow cytometry was used to detect cell cycle. (2) 30 SD rats were selected to establish myocardial infarction model and were randomly divided into 3 groups: blank control group, negative control group and RNAi group. After 6 hours of modeling, bone marrow mesenchymal stem cells were injected into the center of left ventricular anterior wall infarction area with microinjector and stereotactic locator. Echocardiographic cardiac function was measured 4 weeks after treatment. The survival and proliferation of cells were observed by fluorescence microscope. Results and conclusion: (1) the absorbance of bone marrow mesenchymal stem cells in RNAi group was significantly higher than that in blank control group and negative control group at all time points. (2) the proportion of S G2 phase cells in RNAi group was significantly higher than that in blank control group and negative control group (P0.05). (3) the number of bone marrow mesenchymal cells in RNAi group was significantly higher than that in blank control group and negative control group (P0.05). (4) after 4 weeks of treatment, left ventricular ejection fraction and shortening rate of left ventricular short axis in RNAi group were significantly lower than those in blank control group and negative control group (P0.05). (5) in vitro experiments showed that PTEN gene silencing could effectively promote the proliferation of bone marrow mesenchymal stem cells and inhibit the apoptosis of bone marrow mesenchymal stem cells. (6) in vivo experiments showed that PTEN gene silencing bone marrow mesenchymal stem cells were easier to survive and expand in myocardial infarction area, and the heart function was improved obviously.
【作者單位】： 河南大學(xué)淮河醫(yī)院老年病科;
【分類號】：R542.22

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本文編號：2419970