【摘要】：目的探討靶向持續(xù)抑制磷酸二酯酶5(PDE5)的短發(fā)夾RNA(shRNA)[PDE5 shRNA]重組腺病毒載體對小鼠急性心梗后早期細胞凋亡的影響。方法結扎小鼠左冠狀動脈前降支建立小鼠心肌梗死模型,隨機分為實驗組10例,將攜帶有PDE5 shRNA重組腺病毒載體注射到心肌梗死區(qū)及周邊區(qū)和對照組10例,將沒有插入PDE5 shRNA的普通腺病毒載體注射到心肌梗死區(qū)及周邊區(qū)。1周后,進行免疫組化和原位末端標記分析(TUNEL)檢測梗死及梗死周邊細胞凋亡情況,酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA法)檢測環(huán)磷酸鳥苷(c GMP)和蛋白激酶G(PKG)的表達,蛋白印跡分析檢測各組PDE5的表達情況。結果心梗1周后,和對照組相比較,實驗組小鼠梗死區(qū)及梗死周圍區(qū)域細胞凋亡明顯減少(P0.05),梗死周邊心肌細胞凋亡明顯減少(P0.05),實驗組小鼠心肌PDE5表達明顯減少,c GMP和PKG表達明顯上調(diào)(P0.05)。結論 PDE5 shRNA的干預可以明顯減少心肌梗死及梗死周邊區(qū)細胞凋亡和非梗死區(qū)心肌細胞凋亡,可能與上調(diào)c GMP和PKG的表達密切相關。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of short hairpin RNA (shRNA) [PDE5 shRNA] recombinant adenovirus vector targeting phosphodiesterase 5 (PDE5) on early apoptosis after acute myocardial infarction in mice. Methods the myocardial infarction model was established by ligating the anterior descending branch of left coronary artery in mice. The model was randomly divided into experimental group (n = 10) and control group (n = 10). The recombinant adenovirus carrying PDE5 shRNA was injected into myocardial infarction area and peripheral area and control group (n = 10). The normal adenovirus vector not inserted into PDE5 shRNA was injected into the myocardial infarction area and peripheral area. 1 week later, the apoptosis of infarct and periinfarction cells was detected by immunohistochemistry and in situ end labeling analysis (TUNEL). Enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) was used to detect the expression of cyclic guanosine monophosphate (c GMP) and protein kinase G (PKG) (PKK). Western blot analysis was used to detect the expression of PDE5 in each group. Results after one week of myocardial infarction, compared with the control group, the apoptosis of myocardial cells in the experimental group was significantly decreased (P0.05), and that in the infarcted area was significantly decreased (P0.05). The expression of PDE5 in myocardium of experimental group was significantly decreased, the expression of, c GMP and PKG was significantly up-regulated (P0.05). Conclusion the intervention of PDE5 shRNA can significantly reduce the apoptosis of myocardial infarction and periinfarction area and myocardial cell apoptosis in non-infarct area, which may be related to the up-regulation of c GMP and PKG expression.
【作者單位】： 齊齊哈爾市第一醫(yī)院干部病房;大連大學附屬中山醫(yī)院心內(nèi)科;齊齊哈爾市第一醫(yī)院心內(nèi)科;齊齊哈爾市第一醫(yī)院科教部;
【基金】：國家自然科學基金資助項目(81170187) 教育部留學回國人員科研啟動基金資助項目[教外司留(2013)693號]
【分類號】：R542.22

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