【摘要】：目的：利用活體成像技術研究�；撬嵩谥匦惋B腦創(chuàng)傷裸鼠體內實時代謝分布變化情況,并觀察腦創(chuàng)傷后腦組織TauT、GFAP表達,探討�；撬釋χ匦惋B腦創(chuàng)傷的治療機制。 方法：本課題分為活體成像和免疫組化兩部分,①活體成像部分：取6-8周齡BALB/C裸鼠32只,隨機數(shù)字表法分為正常(normal)組、假手術(sham)組、腦創(chuàng)傷染料(TBI-Cy7)組和�；撬嶂委�(TBI-Tau)組。后兩組用液壓打擊儀制作左側腦創(chuàng)傷模型,sham組在左側相同位置只開骨窗,不予打擊。TBI-Tau組、sham組傷后立即尾靜脈注射Cy7-Tau, normal組不做處理,直接注射Cy7-Tau, TBI-Cy7組注射游離Cy7,劑量均為5mg/Kg。給藥后1、2、4、8、12、24h行活體成像；②免疫組化部分：選用6-8周齡BALB/C小鼠48只,隨機數(shù)字表法分為假手術(sham)組、腦創(chuàng)傷(TBI)組和�；撬嶂委�(TAU)和,造模同上,TAU組、sham組傷后立即尾靜脈注射Tau (5mg/Kg), TBI組注射無菌生理鹽水(5mg/Kg)。給藥后12h、24h每組各處死8只,4%多聚甲醛灌注后冰凍連續(xù)切片,行HE染色、GFAP-DAPI、TauT熒光免疫組化染色。 結果： 1.活體成像：給藥后Tau在正常裸鼠體內呈全身彌漫分布,主要通過腎臟代謝,12h大部分均可排出體外,僅剩膽囊存較高濃度Tau; sham組手術切口皮緣24h仍有較高濃度Tau富集；TBI-Tau組給藥后24h腦創(chuàng)傷區(qū)域、皮膚切口處有Tau特異富集,Tau在離體腦組織的分布范圍與腦創(chuàng)傷區(qū)域一致；Cy7在裸鼠體內彌漫分布于皮下,無特定器官富集趨勢； 2.HE染色：sham組神經細胞形態(tài)、結構正常,未見明顯腦創(chuàng)傷；TBI組腦組織充血、水腫,灰質和白質彌漫性出血灶,腦皮質分層結構消失,灰白質分界不清,并伴有大量多形核炎性細胞聚集；Tau組腦組織輕度充血、水腫,實質內有局灶性出血,并伴有多形核炎性細胞聚集。 3. TauT熒光免疫組化結果：TBI后12h,各組均有TauT表達于傷側大腦皮質和海馬的血管內皮細胞,偶見個別神經細胞,與Sham組比較,TBI組12h的皮質和海馬中TauT顯著降低(p0.05),TAU組的TauT均顯著高于TBI組(p0.05),傷后24h,與sham組相比,TBI組腦皮質無顯著變化,海馬顯著降低,TAU組TauT表達較sham組顯著增高,熒光位于血管內皮細胞及少數(shù)神經細胞,數(shù)量增多,熒光強度增強。 4. GFAP熒光免疫組化結果：TBI后12小時,sham組中,星形膠質細胞內GFAP陽性反應較低,細胞胞體較小,突起纖細。反應性星形細胞主要局限于TBI組、TAU組腦創(chuàng)傷側胼胝體及海馬,表現(xiàn)為細胞GFAP陽性反應增加,染色加深,突起增多。傷后24小時,TBI組、TAU組星形細胞胞體肥大,GFAP陽性反應細胞明顯增加,在海馬組織中尤其明顯。無論胼胝體還是海馬組織,TBI組的GFAP在12h、24h均顯著較sham組升高(p0.05),而Tau組與TBI組無顯著區(qū)別(p0.05)。 結論： 1.活體成像技術可實時監(jiān)測Tau在裸鼠體內的分布、代謝,Tau主要通過腎臟代謝；TBI后Tau特異性富集于腦創(chuàng)傷區(qū)域、皮膚切口處,離體腦組織Tau的分布范圍與腦創(chuàng)傷區(qū)域一致； 2.重型顱腦創(chuàng)傷后小鼠腦組織形態(tài)學發(fā)生明顯改變,皮層、海馬區(qū)神經細胞結構受損嚴重,予�；撬嶂委熀�24h可見神經細胞形態(tài)損傷有所減輕,神經細胞超微結構趨于正常,受損輕微,從形態(tài)學方面表現(xiàn)出了較好的治療作用； 3.TBI后TauT表達于傷側大腦皮質及海馬的血管內皮細胞、個別神經元,TBI對腦創(chuàng)傷后TauT的表達存在明顯抑制作用,外源性Tau可促進TBI后12h、24h創(chuàng)傷側腦組織皮質和海馬中TauT的表達; 4.TBI后12h、24h內胼胝體和海馬中GFAP表達顯著升高,反應性星形細胞局限表達于腦創(chuàng)傷區(qū)及傷側海馬,Tau不能降低TBI后急性期的膠質細胞增生。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：天津醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R651.15

【參考文獻】

相關期刊論文 前1條

1 趙繼宗,肖新如;顱腦損傷實驗研究的現(xiàn)狀與展望[J];中華實驗外科雜志;2002年01期

，

本文編號：2410300