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人羊膜及臍帶來源間充質(zhì)干細胞對創(chuàng)傷性腦損傷治療潛力的生物學特性比較

發(fā)布時間:2018-08-02 13:24
【摘要】:創(chuàng)傷性腦損傷(Traumatic brain injury, TBI)是一個世界性的公共衛(wèi)生問題。TBI不僅具有較高的患病率和致死率,而且是繼發(fā)性癲癇發(fā)病的一個重要原因,嚴重影響患者的生活質(zhì)量。在我國,TBI是40歲以下成年人創(chuàng)傷性死亡的主要原因。即使有幸存活下來一部分TBI也將造成嚴重的神經(jīng)功能缺失和行為能力的障礙,給家庭和社會造成極大的負擔。目前臨床主要采用對癥支持療法,另外采用積極的院前復蘇、快速分流、重癥監(jiān)護也有助于降低死亡率,但這些治療方法仍不能達到令人滿意的效果。 TBI在病理生理學上可分為原發(fā)性腦損傷和繼發(fā)性腦損傷兩個階段。首先原發(fā)性的機械性創(chuàng)傷會對局部的神經(jīng)組織造成損害,而損傷本身隨后又會觸發(fā)一連串的級聯(lián)反應(yīng),包括神經(jīng)組織缺血、繼發(fā)于彌漫性軸索損傷的Wallerian變性、興奮毒性、鈣穩(wěn)態(tài)失調(diào)、線粒體功能障礙和自由基介導的損傷等。繼發(fā)性的腦損傷常發(fā)生在頭部受傷后的數(shù)小時到數(shù)天的時間內(nèi)。而且TBI之后神經(jīng)元的喪失不僅僅發(fā)生在損傷局部而且可以彌散到其它腦區(qū)。局灶性損傷典型的特征是損傷區(qū)周圍的灰質(zhì)內(nèi)或灰白質(zhì)交界處的出血。這種局灶性的神經(jīng)元死亡有兩種機制,迅速的細胞壞死和進程較慢的細胞調(diào)亡。彌漫性損傷則主要發(fā)生在海馬區(qū)神經(jīng)元,海馬區(qū)的神經(jīng)元對TBI的反應(yīng)尤為敏感,在所有致命的TBI患者中有超過80%存在海馬區(qū)神經(jīng)元的大量喪失,即使在沒有顱高壓存在的情況下亦是如此。這造成的直接后果便是導致實驗動物或患者記憶和認知功能的損害。 當前對TBI治療方法的研究主要基于以上對繼發(fā)性腦損傷的病理生理、分子和細胞機制的認識,包括占位性病變的早期發(fā)現(xiàn)和清除防止二次損傷,并嘗試通過藥物來減輕生化和細胞級聯(lián)反應(yīng)造成的損害。人們普遍認為,成年人在損傷后刺激中樞神經(jīng)系統(tǒng)再生將可能需要一個或多個以下的進程:細胞更換、提供神經(jīng)營養(yǎng)因子、促進軸突導向和去除抑制軸突生長的因素、細胞內(nèi)信號傳導的調(diào)控、橋接和材料、和/或調(diào)節(jié)的免疫反應(yīng)。 自從20年前哺乳動物大腦的神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細胞具有自我更新的能力被證實以來,對中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷的研究熱點逐漸轉(zhuǎn)入對神經(jīng)生物學的研究,例如細胞替代療法已經(jīng)成為研究和商業(yè)活動的一大焦點。越來越多的證據(jù)表明,基手干細胞移植的治療方法可能是用于治療TBI后功能障礙的最有前途的治療策略之一。細胞替代療法以如下的治療理念為基礎(chǔ),即創(chuàng)傷或疾病所引起的神經(jīng)功能缺失可以通過引入新的細胞來替代喪失的神經(jīng)元和膠質(zhì)細胞,或者所引進細胞通過神經(jīng)營養(yǎng)作用來增加受損的神經(jīng)細胞的存活、可塑性和功能的恢復來發(fā)揮作用。迄今為止各種類型的干細胞,包括胚胎干細胞,神經(jīng)干細胞和間充質(zhì)干細胞目前正在被用于移植研究來治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷。 胚胎干細胞(embryonic stem cells, ESC)移植對大鼠的腦損傷功能恢復有治療作用,但是移植后的腫瘤形成限制了它在人體當中的應(yīng)用。另外胚胎干細胞的應(yīng)用存在明顯道德倫理障礙和胎兒組織來源不足等問題。最新的研究顯示誘導多能干細胞induced pluripotent stem cells, iPS)具有ESC的全能性,但是它同樣存在體內(nèi)形成腫瘤的危險。神經(jīng)干細胞(Neural stem cells, NSC)是一個用來移植治療腦損傷理想的種子細胞,它既可以分化成神經(jīng)細胞又可以分泌多種神經(jīng)營養(yǎng)因子,但是大量神經(jīng)干細胞的來源問題目前為止仍然限制了它的應(yīng)用。人間充質(zhì)干細胞(mesenchymal stem cells, MSC)被認為是一個很好作為腦損傷移植治療的備選細胞。在實驗和臨床研究中骨髓間充質(zhì)干細胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BM-MSC)是目前使用最廣泛的種子細胞。然而抽取骨髓是一個具有高度侵入性的過程中,存在疼痛和感染的風險,而且其分化的潛能和擴增能力都會隨著年齡的增加而降低。因此尋找BM-MSC的替代細胞已經(jīng)成為一個研究方向。來自胎盤,胎膜,羊水或胎兒組織細胞在細胞數(shù)量、擴張潛力和分化能力上都較成體組織來源的間充質(zhì)干細胞更高。而且它們當中的一些細胞已經(jīng)被用來研究治療神經(jīng)退行性疾病和神經(jīng)創(chuàng)傷性疾病。 盡管胎盤來源的某些間充質(zhì)干細胞已經(jīng)被用末研究其對實驗動物某些神經(jīng)系統(tǒng)疾病模型的治療作用,但是目前仍不清楚圍生期組織來源的各種細胞對神經(jīng)系統(tǒng)疾病的治療作用是否相同。在本研究中,我們將重點比較人羊膜來源間充質(zhì)干細胞(amniotic membrane mesenchymal stem cells, AM-MSC)和臍帶華通膠來源的間充質(zhì)干細胞(umbilical cord Wharton's jelly mesenchymal stem cells, WJ-MSC)的生物學特性,比較它們的形態(tài)、體外擴增能力、免疫表型、和多能性。鑒于神經(jīng)干細胞是用來移植治療TBI一個最理想的種子細胞,我們還比較了這兩種間充質(zhì)干細胞的體外神經(jīng)分化潛能,哪種細胞越容易的分化成神經(jīng)干細胞,它就越適合作為治療TBI的種子細胞。 細胞移植治療TBI,除了細胞替代以外,移植細胞提供的旁分泌功能也起到一定的作用。MSC被移植到腦損傷區(qū)域后可以提高損傷局部的神經(jīng)營養(yǎng)因子濃度,這對受損細胞的存活和分化具有重要的意義。本實驗中我們使用人細胞因子抗體芯片檢測兩種來源間充質(zhì)干細胞的507個細胞因子的表達。同時在兩種間充質(zhì)干細胞的神經(jīng)干的誘導過程中,我們在體外檢測了對神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育和重建具有關(guān)鍵作用的5個神經(jīng)營養(yǎng)因子。它們是腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(brain-derived neurotrophic factor, BDNF)、神經(jīng)生長因子(nerve growth factor, NGF)、神經(jīng)營養(yǎng)因子3(neurotrophin3, NT-3)、膠質(zhì)細胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(glial cell derived neurotrophic factor, GDNF)和睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(ciliary neurotrophic factor, CNTF)。這一結(jié)果將在一定程度上對于TBI損傷修復中種子細胞的選擇提供-定的參考,尤其是在神經(jīng)營養(yǎng)因子分泌方面。同時這也反映神經(jīng)干細胞誘導過程對不同細胞分泌神經(jīng)營養(yǎng)因子能力的影響。 另一方面移植入體內(nèi)干細胞的存活能力也是干細胞移植治療需要考慮的重要方面。間充質(zhì)干細胞的移植治療效果往往被植入細胞的大量損失所限制,細胞的死亡是由于損傷部位的惡劣微環(huán)境所引發(fā)。本研究中我們通過過氧化氫和去血清培養(yǎng)兩種方式來模擬過氧化應(yīng)激和局部的缺血缺氧環(huán)境,并比較了兩種來源間充質(zhì)干細胞體外的抗凋亡能力。抗凋亡能力強的干細胞更適合體內(nèi)移植治療TBI. 本研究包括三個部分: 第一部分AM-MSC和WJ-MSC的分離、培養(yǎng)和鑒定 目的:建立一種簡單有效的分離培養(yǎng)AM-MSC和WJ-MSC的方法,觀察其形態(tài),檢測其表面抗原標記的表達情況,觀察培養(yǎng)過程中核型的變化,比較兩種細胞體外增殖能力,觀察其表面的細微結(jié)構(gòu),并檢測它們中胚層多向分化能力。 方法:對與羊膜細胞的分離我們采用2.4U/mL中性蛋白酶、1.0mg/mL膠原酶A和0.01mg/mL脫氧核糖核酸酶依次消化來分離;對于華通膠細胞的分離我們采用Ⅱ型膠原酶和0.125%胰酶/EDTA依次消化的方法來分離。通過光學顯微鏡對細胞進行形態(tài)學觀察,并通過原子力顯微鏡(atomic force microscope, AFM)對細胞表面的細微結(jié)構(gòu)進行掃描。運用流式細胞術(shù)對兩種分離得到的細胞的表面抗原進行檢測,并通過免疫細胞化學的方法對其表達神經(jīng)干細胞標志的情況進行檢測。通過測定體外累積群體倍增來對兩種細胞體外增殖能力進行比較,并對體外培養(yǎng)的細胞進行核型分析。我們對兩種MSC的中胚層多向分化能力進行的檢測,包括向骨細胞、脂肪細胞和軟骨細胞的分化能力。 結(jié)果:通過上述的方法我們成功的分離培養(yǎng)出AM-MSC和WJ-MSC.兩種細胞都呈現(xiàn)成纖維細胞樣貼壁生長,相比之下WJ-MSC形態(tài)更加細長并具有更加強的折光性。對細胞表面抗原檢測,我們發(fā)現(xiàn)兩種細胞的表達情況相類似,它們表達間充質(zhì)干細胞的表面抗原(CD13、CD29、CD44、CD73、CD90和CD105),不表達血液和內(nèi)皮系統(tǒng)的表面抗原(CD19、CD31、CD34和CD45),表達Ⅰ類抗原HLA-ABC但不表達Ⅱ類抗原HLA-DR。通過對兩種細胞向中胚層多向分化能力的檢測,發(fā)現(xiàn)兩種細胞都能夠向骨細胞、脂肪細胞和軟骨細胞方向分化。以上結(jié)果與國際細胞治療學會對間充質(zhì)干細胞的定義和標準相符合,這說明我們從上述組織中分離出的細胞符合間充質(zhì)干細胞的特性。免疫細胞化學檢測結(jié)果顯示兩種細胞都強烈表達波形蛋白(100.00±0.00%vs.100.00±0.00%),少量的AM-MSC和WJ-MSC表達nestin (28.73±2.97%vs.19.22±2.96%, t=2265, P=0.053)±sox2(20.58±2.43%vs.21.11±2.51%,t=0.154, P=0.881)和Musashil (10.17±3.10%vs.12.62±2.58%,t=0.609,P=0.559),兩組之間nestin在AM-MSC中陽性率較高但差異無統(tǒng)計學意義。AFM掃描結(jié)果顯示,AM-MSC具有更強的粘附能力,在細胞的生長過程中邊緣胞體有更長的偽足伸出,這提示其可能具有更強的遷移能力。體外擴增實驗結(jié)果顯示,WJ-MSC具有更高的體外增殖能力(F=817.948,P0.001)。在細胞培養(yǎng)的各個階段我們都對細胞進行了核型分析,未發(fā)現(xiàn)體外培養(yǎng)對其正常核型的產(chǎn)生影響。 結(jié)論:我們成功分離出AM-MSC和WJ-MSC,分離出的細胞符合MSC的標準,包括表面抗原的表達情況和中胚層多向分化的能力。AM-MSC具有更強的粘附能力,并可能有更強的體內(nèi)遷移能力;而WJ-MSC則具有更強的體外增殖能力。兩種細胞在體外培養(yǎng)條件下都能保持正常的二倍體核型。 第二部分AM-MSC和WJ-MSC向神經(jīng)干細胞分化能力的比較 目的:建立一種誘導AM-MSC和WJ-MSC分化為神經(jīng)干細胞的方法。通過這種方法我們想找到神經(jīng)干細胞的新的來源,另外我們比較兩種來源間充質(zhì)干細胞向神經(jīng)干細胞的分化能力。檢測在誘導過程中神經(jīng)營養(yǎng)因子表達量的變化情況。 方法:間充質(zhì)干細胞向神經(jīng)干細胞分化的方法如下:AM-MSC和WJ-MSC培養(yǎng)在神經(jīng)干細胞誘導培養(yǎng)基中,培養(yǎng)基含有KnockOutTM DMEM/F-12基礎(chǔ)培養(yǎng)基、20ng/mL人上皮細胞生長因子(human epidermal growth factor, EGF)、20ng/mL人成纖維細胞細胞生長因子(human beta fibroblastic growth factor, bFGF)、神經(jīng)干細胞添加劑StemPro(?) NSC SFM和GlutaMAXTM-Ⅰ添加劑(1:100)同時含有1%的青鏈霉素,在37℃和5%CO2置于25cm2超低粘附力表面的培養(yǎng)瓶中。每3天更換一次新鮮培養(yǎng)基。誘導10天后,收集神經(jīng)球通過實時定量PCR和酶聯(lián)免疫吸(enzyme-linked immunoadsordent assay,ELISA)附實驗來檢測神經(jīng)營養(yǎng)因子的表達水平。 結(jié)果:AM-MSC和WJ-MSC可以被誘導成神經(jīng)球(一種神經(jīng)干細胞的生長方式),羊膜來源的神經(jīng)干細胞(amnion derived neural stem cells,AM-NSC)和臍帶華通膠來源的神經(jīng)干細胞(umbilical cord Warton's jelly derived neural stem cells,AM-NSC).而且這種誘導得到的神經(jīng)球具有神經(jīng)干細胞的大部分特征。免疫細胞化學結(jié)果顯示AM-MSC和WJ-MSC經(jīng)過誘導之后表達三種神經(jīng)干細胞的標志。經(jīng)過神經(jīng)干細胞誘導培養(yǎng)基誘導之后與未誘導的間充質(zhì)干細胞相比,神經(jīng)干細胞的標志表達明顯上調(diào)。細胞免疫化學具體結(jié)果如下:AM-NSC與AM-MSC相比表現(xiàn)更強的nestin.sox2和musashi熒光信號(nestin,92.05±2.75%vs.28.73±2.97%,P0.001;sox2,70.17±3.16%vs.20.58±2.43%,P0.001; Musashil,66.94±3.62%vs.10.17±3.10%,P0.001);WJ-NSC與WJ-MSC相比表現(xiàn)更強的nestin、sox2和musashi熒光信號(nestin,83.57±2.60%vs.19.22±2.96%,P0.001;sox2,71.17±3.63%vs.21.11±2.51%,P0.001;Musashi,64.15±3.81%vs.12.62±2.58%,P0.001).有意思的是誘導后AM-NSC與WJ-NSC相比表現(xiàn)更強的mestin熒光信號但sox2和musashi未見顯著差異(nestin,92.1±2.82%vs.83.6±22.52%,P=0.0497:sox2,70.2±3.26%vs.71.2±3.54%, P=0.816:Musashil,67.0±3.67%vs.64.0±3.89%,P=0.559).實時定量PCR結(jié)果和Western blot結(jié)果與免疫細胞化學結(jié)果一致。 我們對兩種來源細胞的間充質(zhì)干細胞在誘導前后分泌神經(jīng)營養(yǎng)因子的能力的變化情況進行的檢測。我們檢測了BDNF、GDNF、NT-3、CNTF和NGF。具體的ELISA結(jié)果如下:AM-MSC分泌因子的情況,BDNF,109.51±15.26pg/mL, GDNF32.85±14.21pg/mL,NT-327.43±11.91pg/mL,CNTF39.62±13.56pg/mL和NGF21.46±9.83pg/mL;誘導之后AM-NSC分泌因子情況,BDNF,477.39±39.95pg/mL,GDNF101.01±11.67pg/mL,NT-3206.33±26.36pg/mL,CNTF160.48±22.69pg/mL和NGF185.23±23.59pg/m。WJ-MSC分泌因子情況,BDNF,241.69±25.90pg/mL,GDNF16.21±10.01pg/mL,NT-3172.35±25.20pg/mL,CNTF34.37±11.42pg/mL和NGF105.59±18.24pg/mL;誘導之后WJ-NSC分泌因子情況,BDNF,333.66±31.59pg/mL,GDNF93.64±19.17pg/mL,NT-3122.46±20.02pg/mL,CNTF231.28±22.07pg/mL和NGF32.76±10.17pg/mL。組間比較結(jié)果顯示誘導前WJ-MSC與AM-MSC相比表達高的BDNF(P=0.006).NT-3(P0.001)和NGF(P=0.002)。而有意思的是誘導后AM-NSC卻比WJ-NSC表達更高的BDNF(P=0.003).NT-3(P=0.015)、 CNTF(P=0.014)和NGF(P=0.009)。實時定量PCR的結(jié)果與上述的ELISA結(jié)果一致。 結(jié)論:我們成功的將AM-MSC和WJ-MSC誘導為AM-NSC和WJ-NSC。這些誘導得到的NSC與未誘導的間充質(zhì)干細胞相比表達更高的NSC標志。誘導之前WJ-MSC和AM-MSC相比表達更多的BDNF、NT-3和NGF,然而誘導之后AM-NSC卻比WJ-NSC表達更高的BDNF、NT-3、CNTF和NGF。由此可見來自新生兒附屬組織不同部位的間充質(zhì)干細胞對同一神經(jīng)干細胞誘導方法的反應(yīng)不完全相同,相比之下AM-MSC對神經(jīng)干細胞誘導的反應(yīng)更有利于神經(jīng)營養(yǎng)因子的分泌。 第三部分AM-MSC和WJ-MSC體外細胞因子抗體芯片檢測和抗凋亡能力的檢測 目的:我們運用人細胞因子抗體芯片對兩種來源間充質(zhì)干細胞分泌細胞因子的能力進行檢測。通過過氧化氫和去血清培養(yǎng)誘導AM-MSC和WJ-MSC凋亡,并檢測其抗凋亡能力。 方法:在本研究中我們使用人細胞因子抗體芯片(Human L-507Array, RayBiotech Inc.)檢測兩種間充干細胞所分泌的507種細胞因子。我們用化學發(fā)光的方法來探測膜上的信號強度,信號的強度通過光密度計來進行定量。對于數(shù)值差別在兩倍以上的因子,我們對其進行統(tǒng)計學分析。我們選用陽性對照對來自各張膜的數(shù)值進行標準化。本實驗中采用2mmol/L的H202和去血清培養(yǎng)來誘導細胞凋亡。誘導凋亡的細胞以末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導的脫氧尿苷三磷酸生物素缺口末端標記法(TUNEL)和Annexin V和propidine碘(PI)染色來進行測定。 結(jié)果:細胞因子抗體芯片的結(jié)果如下:與WJ-MSC相比AM-MSC中檢測到有23種細胞因子高表達差異倍數(shù)在兩倍以上;而在WJ-MSC中有49種細胞因子相對AM-MSC高表達差異倍數(shù)在兩倍以上。在AM-MSC中高表達的23種細胞因子中,有4種因子差異有統(tǒng)計學意義;而在WJ-MSC中兩倍以上高表達的49種因子,統(tǒng)計結(jié)果顯示差異沒有統(tǒng)計學意義。在AM-MSC中上調(diào)的4種因子為白細胞介素(interleukin,IL)或者白細胞介素的受體。具體的細胞因子如下:IL-6(t=3.546,P=0.038),IL-13R alpha2(t=3.336,P=0.045),IL-12p70(t=3.743,P=0.033),IL-22R(t=3.187,P=0.0498)。 H202誘導凋亡后,TUNEL法檢測AM-MSC和WJ-MSC細胞凋亡率(27.94±2.31%vs.35.70±2.27%,t=2.401,P=0.043),Annexin V/PI染色方法檢測細胞凋亡率(31.31±2.05%vs.39.52±2.65%,t=2.448,P,=0.040);去血清培養(yǎng)誘導凋亡后,Annexin V/PI染色方法檢測細胞凋亡率(8.23±0.91%vs.11.71±1.13%,t=2.396,P=0.043).結(jié)果顯示AM-MSC無論在過氧化氫還是去血清培養(yǎng)誘導的細胞凋亡中都比WJ-MSC顯示更強的抗凋亡能力。 結(jié)論:與WJ-MSC相比AM-MSC表達更多的細胞因子,這些細胞因子主要為細胞介素,它們可能與細胞的增殖和炎癥反應(yīng)有關(guān)。AM-MSC比WJ-MSC具有更強的抗凋亡能力。
[Abstract]:......
【學位授予單位】:南方醫(yī)科大學
【學位級別】:博士
【學位授予年份】:2013
【分類號】:R651.15

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10 牛豐南;陳蕾;徐運;;CART體外誘導骨髓間充質(zhì)干細胞為神經(jīng)干細胞[A];第十一屆全國神經(jīng)病學學術(shù)會議論文匯編[C];2008年

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1 王秋月 王琳;空軍總醫(yī)院采用間充質(zhì)干細胞救治小腦萎縮[N];科技日報;2009年

2 記者 李素鋒;我市首例間充質(zhì)干細胞移植手術(shù)取得成功[N];臨汾日報;2009年

3 記者 王丹 通訊員 艾素;異染性腦白質(zhì)營養(yǎng)不良治療獲突破[N];健康報;2010年

4 記者 白毅;間充質(zhì)干細胞可促進成熟樹突狀細胞增殖分化[N];中國醫(yī)藥報;2009年

5 張泓;生物醫(yī)藥,2008新突破[N];北方經(jīng)濟時報;2008年

6 本報記者 王照重;青島大學醫(yī)學院附屬醫(yī)院涉嫌非法采集臍血[N];中國消費者報;2010年

7 徐機玲;姜躍進;我國骨髓干細胞移植技術(shù)獲突破[N];中國醫(yī)藥報;2003年

8 孫國根;神經(jīng)干細胞并非“全能制造者”[N];中國醫(yī)藥報;2009年

9 時仲省 高思敏;移植神經(jīng)干細胞 癱瘓兔子可爬行[N];大眾衛(wèi)生報;2001年

10 王成應(yīng);能克隆的神經(jīng)干細胞被分離[N];健康報;2004年

相關(guān)博士學位論文 前10條

1 彭飛;620nm非相干紅光對大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的光生物調(diào)節(jié)作用[D];華中科技大學;2011年

2 于美嬌;系統(tǒng)歸巢的間充質(zhì)干細胞在牙周組織修復再生過程中的作用研究[D];山東大學;2011年

3 李東杰;人臍帶間充質(zhì)干細胞促進創(chuàng)面愈合及體外誘導分化為表皮樣細胞的實驗研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學院;2011年

4 李寶軍;脂肪間充質(zhì)干細胞體外誘導及復合PLGA體內(nèi)異位成軟骨的實驗研究[D];中南大學;2007年

5 朱雅姝;Flk-1~+間充質(zhì)干細胞對腫瘤細胞增殖的抑制作用及其分子機制研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2008年

6 吳桂珠;脂肪間充質(zhì)干細胞治療壓力性尿失禁的實驗研究[D];福建醫(yī)科大學;2010年

7 熊卉;轉(zhuǎn)化生長因子β1基因體外轉(zhuǎn)染兔顳下頜關(guān)節(jié)滑膜間充質(zhì)干細胞向纖維軟骨轉(zhuǎn)化實驗研究[D];武漢大學;2010年

8 苗宗寧;胎盤間充質(zhì)干細胞與絲素蛋白/羥基磷灰石材料在骨創(chuàng)傷修復中的實驗研究[D];蘇州大學;2010年

9 梁偉;人骨髓Flk-1~+間充質(zhì)干細胞抗DNA損傷物質(zhì)影響作用研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2008年

10 謝姜;人臍帶間充質(zhì)干細胞誘導轉(zhuǎn)化成神經(jīng)干細胞及其移植治療腦出血的研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2010年

相關(guān)碩士學位論文 前10條

1 陳芳;臍帶間充質(zhì)干細胞修復化療所致卵巢顆粒細胞損傷的體外實驗[D];暨南大學;2010年

2 馬蘭蘭;不同胎齡人臍帶血間充質(zhì)干細胞的研究[D];中國醫(yī)科大學;2010年

3 章守琴;人羊膜間充質(zhì)干細胞支持造血的體外研究[D];昆明醫(yī)學院;2010年

4 張茜真;人臍帶間充質(zhì)干細胞的分離、鑒定以及干細胞特異性轉(zhuǎn)錄因子誘導其重編程的研究[D];浙江理工大學;2010年

5 高楊;人臍血間充質(zhì)干細胞對肝癌轉(zhuǎn)移的影響及機制的探討[D];昆明醫(yī)學院;2011年

6 高志買;間充質(zhì)干細胞高分子量分泌成分對輻射性腸損傷的修復作用[D];安徽醫(yī)科大學;2011年

7 王成春;靜脈移植人羊膜間充質(zhì)干細胞在阿爾茨海默病小鼠的體內(nèi)遷移及治療機制研究[D];鄭州大學;2010年

8 陳義;臍帶間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)及體外重建角膜后板層的初步研究[D];暨南大學;2010年

9 唐子濱;納米級膠原基骨材料復合自體脂肪間充質(zhì)干細胞用于兔后外側(cè)脊柱融合的實驗研究[D];河北醫(yī)科大學;2010年

10 齊凱;人臍帶來源間充質(zhì)干細胞分離培養(yǎng)方法的優(yōu)化初探[D];山西醫(yī)科大學;2011年

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