劃痕損傷對大鼠大腦皮層微血管內(nèi)皮細胞NF-κB表達及繼發(fā)性死亡的影響
發(fā)布時間:2018-03-26 04:42
本文選題:劃痕損傷 切入點:腦微血管內(nèi)皮細胞 出處:《中國現(xiàn)代醫(yī)學雜志》2016年05期
【摘要】:目的通過體外培養(yǎng)SD大鼠大腦皮層微血管內(nèi)皮細胞并制作劃痕損傷模型,觀察劃痕損傷對腦微血管內(nèi)皮細胞NF-κB表達及其自噬、凋亡和壞死的影響。方法體外培養(yǎng)SD大鼠大腦皮層微血管內(nèi)皮細胞并制作劃痕損傷模型,應用NF-κB抑制劑吡咯醛二硫氨基甲酸(PDTC)干預劃痕損傷腦微血管內(nèi)皮細胞。隨機分為對照組、單純損傷組、損傷+抑制組,在不同時間點(損傷后1、6、12、24及48 h)分別應用免疫熒光細胞化學法測定磷酸化NF-κB p65蛋白的表達,Annexin V/PI染色法檢測凋亡、壞死,Western blot檢測自噬蛋白LC3Ⅱ表達情況。對照組為無劃痕損傷的腦微血管內(nèi)皮細胞。結(jié)果腦微血管內(nèi)皮細胞劃痕損傷后NF-κB蛋白表達于傷后1 h開始表達增強,于24 h達高峰,與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。凋亡、壞死及自噬各指標均隨時間推移有不同程度升高,與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。而經(jīng)PDTC處理后上述變化均受不同程度的抑制,與單純損傷組相比差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論劃痕損傷后可激活腦微血管內(nèi)皮細胞NF-κB表達,同時可引起腦微血管內(nèi)皮細胞的自噬、凋亡和壞死。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of scratch injury on NF- 魏 B expression and autophagy of cerebral microvascular endothelial cells (MECs) of SD rats in vitro. Methods cultured rat cerebral cortex microvascular endothelial cells in vitro and made scratch injury model. Pyrrolidine dithiocarbamate (PDTCC), an inhibitor of NF- 魏 B, was used to interfere with the scratch injury of cerebral microvascular endothelial cells, and was randomly divided into control group, simple injury group and injury inhibition group. The expression of phosphorylated NF- 魏 B p65 protein was detected by immunofluorescence cytochemistry at different time points (24 and 48 hours after injury). Apoptosis was detected by Annexin V/PI staining. The expression of autophagy protein LC3 鈪,
本文編號:1666379
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