發(fā)布時間：2018-01-23 22:20

  本文關鍵詞： 缺氧預處理 顱腦損傷 HIF-1α VEGF 大鼠 腦組織　出處：《安徽醫(yī)科大學》2014年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：背景在現(xiàn)代高原軍事戰(zhàn)爭中，會面臨急性高原缺氧反應引起的大幅度非戰(zhàn)斗減員，加上缺血缺氧性顱腦損傷無疑是“雪上加霜�！比绾畏雷o高原低氧惡劣環(huán)境的影響，已經(jīng)成為高原軍事醫(yī)學研究的重點內(nèi)容。顱腦損傷后的腦組織缺血缺氧是導致腦損害主要因素。缺氧預處理在短時間內(nèi)預先給予機體刺激性缺氧，對隨后嚴重的缺血、缺氧損傷產(chǎn)生顯著防御能力，是當前抗缺氧/缺血的研究熱點。缺氧誘導因子-1α（hypoxia-inducible factor-1α，HIF-1α）是依附于氧濃度調(diào)節(jié)重要因子，對氧環(huán)境有較強敏感性。血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growthfactor，VEGF)是HIF-1α下游編碼靶蛋白，可參與神經(jīng)血管重塑而達到神經(jīng)保護作用。本課題擬通過建立大鼠顱腦創(chuàng)傷模型，研究顱腦創(chuàng)傷后大鼠挫傷周圍腦組織HIF-1α、VEGF表達變化，并觀察缺氧預處理對二者影響。 目的（1）通過建立大鼠顱腦創(chuàng)傷模型，探討大鼠顱腦創(chuàng)傷后挫傷周圍腦組織HIF-1α及VEGF表達變化；（2）通過建立缺氧預處理模型，觀察缺氧預處理對大鼠顱腦創(chuàng)傷后挫傷周圍腦組織HIF-1α及VEGF表達的影響，為缺氧預處理在防御缺血缺氧對腦組織損傷提供理論依據(jù)。 方法（1）204只Sprague-Dawley雄性大鼠采用隨機數(shù)字法分成對照組（Con組n=12）、創(chuàng)傷組（TBI組n=96）、缺氧預處理組（HPC組n=96）。TBI組采用改良的Feeney自由落體打擊模型，以重量50g砝碼，離大鼠骨窗面25cm高處下落打擊，HPC組給予缺氧預處理（50.47kPa，3d，3h/d）后，同法致腦損傷。對照組則不給予顱腦打擊。于傷后1h、4h、8h、12h和1d、3d、7d、14d時間點斷頭取腦，通過RT-PCR、Western blotting及免疫組化染色方法檢測挫傷灶周圍腦組織HIF-1α、VEGF表達變化,并采用免疫熒光雙標法檢測VEGF分布及共存情況，根據(jù)結果進行統(tǒng)計學分析。 結果①大鼠顱腦創(chuàng)傷后挫傷周圍腦組織HIF-1α在傷后4、8、12h和1、3d均明顯上升（P0.05），HIF-1α mRNA在12h達到高峰，，蛋白于1d達到高峰；缺氧預處理組缺氧誘導因子-1α(HIF-1α)表達在傷后1h逐漸上調(diào)，4h~7d HIF-1α mRNA及蛋白顯著上調(diào)（P0.05），直至傷后14d表達趨于正常（P0.05）。②大鼠顱腦創(chuàng)傷后挫傷周圍腦組織血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）表達在傷后4h表達上調(diào)，VEGF mRNA表達在傷后1d出現(xiàn)峰值，蛋白3d達高峰，直至傷后7d（P0.05）；缺氧預處理組VEGF在傷后1h表達上調(diào)，4h~7d VEGF mRNA及蛋白顯著上調(diào)（P0.05），傷后14d表達趨于正常（P0.05）。③免疫熒光雙標法檢測缺氧預處理組傷后3d VEGF表達較創(chuàng)傷組明顯，其表達VEGF在神經(jīng)元、神經(jīng)膠質(zhì)細胞及血管內(nèi)皮細胞較明顯。 結論①以重量50g砝碼，離大鼠骨窗面25cm高處下落打擊可制作穩(wěn)定的大鼠顱腦損傷模型，穩(wěn)定性較好。②大鼠顱腦創(chuàng)傷后挫傷周圍腦組織HIF-1α、VEGF隨時間推移呈波峰狀改變，提示顱腦創(chuàng)傷后腦組織缺血缺氧可誘導HIF-1α高表達，并調(diào)控下游靶蛋白VEGF參與神經(jīng)系統(tǒng)保護。③缺氧預處理可預先激活腦組織HIF-1α的高表達，進而增強VEGF上調(diào)，這可能是防御顱腦損傷后缺血缺氧對腦組織損傷的機制之一。
[Abstract]:Hypoxia - inducible factor - 1偽 ( HIF - 1偽 ) is an important factor in the study of hypoxia / ischemia . Hypoxia - inducible factor - 1偽 ( HIF - 1偽 ) is a key factor in the study of hypoxia / ischemia . Hypoxia - inducible factor - 1偽 ( VEGF ) is a key factor in hypoxia / ischemia . Hypoxia - inducible factor - 1偽 ( VEGF ) is a key factor in hypoxia / ischemia . Hypoxia - inducible factor - 1偽 ( VEGF ) is a key factor in hypoxia / ischemia . Objective ( 1 ) To investigate the expression of HIF - 1偽 and VEGF in the brain after brain trauma in rats by establishing a model of traumatic brain injury in rats . ( 2 ) To observe the effect of hypoxia preconditioning on the expression of HIF - 1偽 and VEGF in the brain after brain trauma in rats . Methods ( 1 ) 204 Sprague - Dawley male rats were divided into control group ( Con group n = 12 ) , wound group ( n = 96 ) and hypoxic preconditioning group ( HPC group n = 96 ) . Results 鈶

本文編號：1458378