MODS患者血清對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞氧化損傷的影響及GSH的保護(hù)作用
本文關(guān)鍵詞:MODS患者血清對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞氧化損傷的影響及GSH的保護(hù)作用 出處:《蘭州大學(xué)》2014年碩士論文 論文類(lèi)型:學(xué)位論文
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【摘要】:目的 探討多器官功能障礙綜合征(:multiple organ dysfunction syndrome, MODS)患者血清對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(human umbilical vein endothelial cells, HUVEC)氧化損傷的影響及還原型谷胱甘肽(reduced glutathione, GSH)的保護(hù)作用。 方法 選擇MODS患者20例,用其血清與RPMI-1640培養(yǎng)基配制成細(xì)胞培養(yǎng)液后培養(yǎng)HUVEC,建立體外細(xì)胞損傷模型,同時(shí)以健康志愿者血清組和胎牛血清組做對(duì)照組,將細(xì)胞分為正常對(duì)照組(A組)、健康血清組(B組)、MODS血清損傷組(MODS患者血清濃度分別為C1組:5%、C2組:10%、C3組:20%)和GSH干預(yù)組(GSH終濃度為D1組:0.064mmol/L、D2組:0.32mmol/L、D3組:16mmol/L、D4組:8.0mmol/L、D5組:40mmol/L)。采用MTT法檢測(cè)各組細(xì)胞生存率;熒光倒置顯微鏡下觀察B組和C2組HUVEC形態(tài)學(xué)變化;分別檢測(cè)B組、C2組和D3組藥物干預(yù)24h、48h、72h后細(xì)胞上清液超氧化物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)活力以及總抗氧化能力(T-AOC)水平,同時(shí)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)活性氧簇(ROS)水平。 結(jié)果 1.B組與A組比較,細(xì)胞生存率無(wú)差異(P0.05);與B組比較,C1、C2、C3組細(xì)胞生存率顯著下降(P0.05), D2、D3、D4組細(xì)胞生存率與C2組比較明顯升高(P0.05) 2.C2組HUVEC熒光倒置顯微鏡下可見(jiàn)損傷性改變,細(xì)胞變大變圓、界限模糊、胞體碎裂、部分細(xì)胞脫落; 3.與B組比較,C2組細(xì)胞培養(yǎng)上清液SOD、CAT、GSH-Px活力及T-AOC水平C2組明顯下降,而D3組各時(shí)間點(diǎn)較C2組均顯著升高,其中以藥物干預(yù)72h后升高最顯著; 4.細(xì)胞內(nèi)ROS水平C2組較B組顯著升高,D3組加藥后各時(shí)間點(diǎn)ROS水平較C2組明顯降低,其中以藥物干預(yù)72h后下降最顯著。 結(jié)論 MODS患者血清可造成內(nèi)皮細(xì)胞損傷,外源性GSH可通過(guò)提高SOD、CAT、GSH-Px活力及T-AOC水平,降低細(xì)胞內(nèi)ROS水平,從而發(fā)揮內(nèi)皮細(xì)胞保護(hù)作用,減輕血管內(nèi)皮細(xì)胞的氧化損傷。
【學(xué)位授予單位】:蘭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類(lèi)號(hào)】:R459.7
【參考文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):1311335
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