單純性腦震蕩大鼠海馬TNF-α的表達及AH6809干預的研究
本文關鍵詞:單純性腦震蕩大鼠海馬TNF-α的表達及AH6809干預的研究
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【摘要】:目的:建立單純性腦震蕩(pure cerebral concussion, PCC)大鼠模型,觀察PCC損傷后大鼠海馬腦區(qū)TNF-α表達的變化規(guī)律及EP2受體抑制劑AH6809對其干預的影響,探討PCC后TNF-α表達的病理學改變和AH6809的干預作用。 方法:在正常大鼠清醒狀態(tài)下,采用自制“金屬單擺閉合式腦損傷打擊裝置”制備PCC模型,損傷后隨機分為3h、12h、1d、2d、3d和7d六組(n=5),另設正常對照組(n=5)。PCC損傷后給予AH6809干預,隨機分為1d、2d、3d和7d四組(n=5),每個時間點另設PCC+生理鹽水對照組(n=5)。采用免疫組織化學染色、Western Blotting和RT-PCR實驗方法,觀察PCC損傷后海馬腦區(qū)不同時間點TNF-α的表達及其時序性變化規(guī)律,以及損傷后AH6809對其表達的影響。 結果:(一)PCC組 (1)免疫組化染色結果顯示:正常生理狀態(tài)下,海馬腦區(qū)有少量TNF-a陽性表達。PCC損傷后3h、12h、Id、2d、3d各時間點海馬腦區(qū)TNF-a的陽性表達和TNF-α陽性細胞計數(shù)均呈現(xiàn)出逐漸增強趨勢,在3d組達高峰,7d組表達出現(xiàn)回落,但仍高于正常組,與正常對照組相比,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。 (2)、Vestern Blotting與RT-PCR實驗結果顯示:TNF-α蛋白和mRNA在正常對照組表達均較弱,PCC損傷后表達呈現(xiàn)出逐漸增強趨勢,與免疫組化結果相似,在3d組和7d組分別出現(xiàn)高峰和回落現(xiàn)象,、Vestern Blotting結果中的3h、12h、1d、2d、3d組,RT-PCR結果中的Id、2d、3d、7d組與正常對照組相比,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。 (二)PCC+AH6809干預組 (1)免疫組化染色結果顯示:AH6809干預組1d、2d、3d和7d組分別與生理鹽水對照組相比,TNF-α的陽性表達和TNF-α的陽性細胞計數(shù)均出現(xiàn)下降,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。 (2)Western Blotting實驗結果顯示:AH6809干預組1d、2d、3d和7d組分別與生理鹽水對照組相比,TNF-α蛋白表達出現(xiàn)下降,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05); (3)RT-PCR實驗結果顯示:AH6809干預組1d、2d、3d和7d組分別與生理鹽水對照組相比,TNF-αmRNA表達在1d組沒有下降,仍高于生理鹽水對照組,2d、3d、7d組表達出現(xiàn)下降,其中僅3d組差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。 結論:1、正常生理狀態(tài)下,海馬腦區(qū)有少量TNF-α表達。2、PCC損傷后TNF-α在海馬腦區(qū)的表達出現(xiàn)一定時序性變化規(guī)律,證實TNF-α參與了PCC繼發(fā)性病理過程。3、AH6809對TNF-α的表達有一定的干預抑制作用。
【關鍵詞】:單純性腦震蕩 海馬 TNF-α AH6809 大鼠
【學位授予單位】:昆明醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2014
【分類號】:R651.15
【目錄】:
- 英文縮略詞表5-6
- 中文摘要6-8
- Abstract8-10
- 引言10-13
- 材料和方法13-30
- 結果30-56
- 討論56-66
- 結論66-67
- 參考文獻67-72
- 綜述72-82
- 參考文獻79-82
- 在讀期間發(fā)表論文目錄82-83
- 致謝83
【參考文獻】
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,本文編號:1106796
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