重金屬鉛免疫復合物的制備與鑒定
發(fā)布時間:2017-09-30 05:00
本文關鍵詞:重金屬鉛免疫復合物的制備與鑒定
【摘要】:目的制備Pb-DTPA-BSA復合物,作為完全抗原,用以免疫動物制備鉛抗體。方法首先用金屬螯合劑二乙基三胺五乙酸(Diethylene triamine pentacetate,DTPA)與鉛離子(Pb2+)結合,再分別用1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺(1-(3-Dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimide hydrochloride,EDC)、戊二醛、三乙胺作偶聯(lián)劑將其與大分子載體蛋白-牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin,BSA)偶聯(lián),制備Pb-DTPA-BSA復合物。將復合物做聚丙烯酰胺凝膠電泳(Sodium dodecyl sulfate polylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)、基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時間質(zhì)譜(Matrix-Assisted Laser Desorption Time of Flight mass Spectrometry,MALDI-TOF-MS)鑒定并免疫小鼠,獲得抗PbDTPA抗體。結果 SDS-PAGE和MALDI-TOF-MS結果均驗證合成了復合物Pb-DTPA-BSA,平均分子量76435;Pb-DTPA與BSA的偶聯(lián)比為11∶1。免疫小鼠后,小鼠血清中產(chǎn)生了抗Pb-DTPA抗體,抗體最高效價達到1.0×105。結論經(jīng)分析證明成功合成了免疫復合物Pb-DTPA-BSA,可用于重金屬Pb抗體的制備。
【作者單位】: 天津市環(huán)境與食品安全風險監(jiān)控技術重點實驗室 軍事醫(yī)學科學院衛(wèi)生學環(huán)境醫(yī)學研究所;
【關鍵詞】: 重金屬 鉛 免疫復合物 制備與鑒定
【基金】:國家高技術研究發(fā)展計劃(2013AA065601,2010AA06Z302) 國土資源部公益性行業(yè)科研專項(201211056)
【分類號】:R392
【正文快照】: 由于工業(yè)三廢及汽車尾氣的排放,環(huán)境中重金屬污染越來越嚴重,空氣、土壤、水、食品以及中草藥中重金屬污染日益受到重視。重金屬離子自身帶有電荷,趨向于與生物分子發(fā)生強烈的不可逆的反應,這也是重金屬的毒性所在。重金屬自身不能作為有效的抗體識別目標,利用選擇性螯合劑與
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【共引文獻】
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本文編號:946234
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