發(fā)布時間：2017-09-29 20:21

  本文關鍵詞：大鼠枯否細胞的分離、鑒定以及LPS刺激誘導TNF-α的表達

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【摘要】：目的:分離、培養(yǎng)和鑒定枯否細胞,并探討LPS刺激對細胞腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表達和分泌的影響.方法:采用在體原位灌注、密度梯度離心和早期細胞換液等方法分離純化大鼠肝枯否細胞(kupffer cell,KC),并采用墨汁吞噬和ED2染色試驗對分離培養(yǎng)的細胞進行鑒定.TNF-α表達和分泌采用RT-PCR和酶聯(lián)免疫技術(enzyme-linked immunosorbent,ELISA)檢測.結果:成功分離和純化大鼠肝KC,并經(jīng)墨汁吞噬和ED2染色試驗鑒定證實;LPS刺激KC細胞內TNF-α mRNA的表達較非刺激細胞(PBS處理細胞)顯著升高(1.10±0.02vs0.09±0.01,P0.001).另外,LPS刺激較非刺激KC培養(yǎng)上清液TNF-α蛋白的水平也顯著升高(487.10pg/mL±5.56pg/mLvs39.41pg/mL±15.30pg/mL,P0.001).結論:原位灌注和密度梯度離心法能有效分離純化大鼠KC,LPS刺激可誘導其表達和分泌大量TNF-α.
【作者單位】： 上海交通大學附屬第一人民醫(yī)院松江分院;南昌大學第二附屬醫(yī)院;
【關鍵詞】： 枯否細胞 培養(yǎng) 脂多糖 腫瘤壞死因子-α
【基金】：國家自然科學基金資助項目,Nos.81070357,30660066~~
【分類號】：R329
【正文快照】： 0引言枯否細胞(kupffer cell,KC)是一種非實質性肝細胞,其數(shù)量約占肝細胞總數(shù)的15%和體內組織駐留巨噬細胞總數(shù)的80%-90%[1].KC被覆于肝竇內壁,在穩(wěn)定或生理情況下,可作為“專業(yè)化”的吞噬細胞[2],以清除衰老的紅細胞、免疫復合物和來自門脈循環(huán)的腸源性細菌產(chǎn)物[1].在功能上,

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 曾仲;黃漢飛;宋飛;段鍵;;體外灌注法分離大鼠肝臟Kupffer細胞及原代培養(yǎng)[J];世界華人消化雜志;2009年25期

2 張磊;黃成;李俊;呂雄文;朱鵬里;王建青;李增;賀曉昕;;大鼠肝星狀細胞和枯否細胞的分離與培養(yǎng)方法[J];安徽醫(yī)科大學學報;2007年06期

3 ，

本文編號：944053