發(fā)布時間：2017-09-25 20:15

  本文關(guān)鍵詞：痰瘀互結(jié)證代謝綜合征大鼠模型代謝組學(xué)研究

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【摘要】：目的:本實驗擬通過建立痰瘀互結(jié)證代謝綜合征大鼠模型,進而運用代謝組學(xué)技術(shù)對模型的血液標本進行分析,嘗試尋找出痰瘀互結(jié)證代謝綜合征病變的特征性代謝產(chǎn)物,觀察代謝物的變化與生理、病理的相關(guān)聯(lián)系,探尋痰瘀互結(jié)證代謝綜合征病變的機制,從而進一步揭示痰瘀互結(jié)證代謝綜合征本質(zhì)。材料與方法:1.大鼠疾病模型的復(fù)制健康雄性SPF級Wistar大鼠(動物合格證號:SCXK(遼)2010-0001)38只,體重(180士20)g,適應(yīng)性喂養(yǎng)1周之后稱取體重,然后按重量進行編號,運用隨機數(shù)字表法隨機分成兩組:空白對照組大鼠(n=10)和模型組(n=28)。空白組自由喂水,基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng);模型組自由喂水,高脂高糖飼料喂養(yǎng)。喂養(yǎng)16周后,模型組進行小劑量多次STZ腹腔注射,復(fù)制痰瘀互結(jié)證代謝綜合征大鼠模型。整個造模時間持續(xù)20周。2.代謝組學(xué)研究隨機選取復(fù)制成功的痰瘀互結(jié)證代謝綜合征大鼠模型8只與空白對照組大鼠模型8只,進行代謝組學(xué)研究。運用美國生產(chǎn)的Agilent7890氣相色譜-飛行時間質(zhì)譜聯(lián)用儀,進行大鼠血清GC-MS代謝組學(xué)檢測分析。通過使用LECO Chroma TOF4.3X軟件,并結(jié)合Fiehn Rtx5數(shù)據(jù)庫,對原始下機數(shù)據(jù)進行峰提取、數(shù)據(jù)基線過濾和校正、峰對齊、解卷積分析、代謝物物質(zhì)鑒定和峰面積計算。然后用SIMCA軟件(V14,Umetrics AB,Umea,Sweden)對歸一化后的數(shù)據(jù)進行模式識別多變量分析,并對所得到的代謝指紋圖譜進行主成分分析(PCA),正交偏最小二乘法-判別分析(OPLS-DA),接著利用METLIN、HMDB數(shù)據(jù)庫篩選具有差異的特征性代謝產(chǎn)物,辨識疾病證型潛在的生物標志物。結(jié)果:1.大鼠疾病模型的復(fù)制:模型組大鼠從造模第4周開始后,與空白組相比較,體重明顯增加,6周后大便異味重,精神困倦,毛色變暗,舌出現(xiàn)瘀斑,質(zhì)暗。造模8周后模型組大鼠血脂成分的含量與空白對照組大鼠相比,均顯著改變,兩組之間存在統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。造模結(jié)束后模型組大鼠出現(xiàn)血液流變學(xué)改變,同時出現(xiàn)高血糖、血胰島素升高、胰島素抵抗等診斷指征,符合本研究擬建立的痰瘀互結(jié)證代謝綜合征的評估標準。2.代謝組學(xué)研究結(jié)果:通過代謝組學(xué)技術(shù)研究,能夠很好的將模型組大鼠與空白對照組大鼠血液代謝產(chǎn)物區(qū)分,兩組有明顯差異性。3.主要標記物:尋找到了與痰瘀互結(jié)證代謝綜合征大鼠模型相關(guān)聯(lián)的主要生物標記物,主要為N-乙酰-D-葡萄糖胺、3-羥基丁酸、同型半胱氨酸、纈氨酸、亮氨酸、反油酸等20多種代謝物,上述主要標記物共同構(gòu)成了痰瘀互結(jié)證代謝綜合征大鼠模型的代謝組學(xué)特征,而這些小分子物質(zhì)正是體內(nèi)蛋白質(zhì)、糖類、脂類等物質(zhì)代謝紊亂的結(jié)果。結(jié)論:1.通過長期嗜食肥甘厚味(高糖高脂飼料),結(jié)合多次小劑量STZ腹腔注射的造模方法可成功復(fù)制出痰瘀互結(jié)證代謝綜合征大鼠模型。2.運用代謝組學(xué)技術(shù)分析痰瘀互結(jié)證代謝綜合征大鼠模型的血液樣本,得到的代謝物圖譜明顯有別于正常組大鼠模型代謝物圖譜,找到了與痰瘀互結(jié)證代謝綜合征大鼠模型相關(guān)的潛在生物標記物。3.發(fā)現(xiàn)了N-乙酰-D-葡萄糖胺、3-羥基丁酸、同型半胱氨酸、纈氨酸、亮氨酸、反油酸等痰瘀互結(jié)證代謝綜合征大鼠模型的潛在生物標志物,揭示了痰瘀互結(jié)證代謝綜合征的發(fā)生與脂類、糖類、蛋白質(zhì)代謝紊亂有關(guān),而體內(nèi)這些小分子化合物可能為痰瘀互結(jié)證代謝綜合征中醫(yī)證候的物質(zhì)基礎(chǔ)。4.代謝組學(xué)技術(shù)能更好的揭示疾病的中醫(yī)證候模型的本質(zhì)內(nèi)涵,代謝組學(xué)技術(shù)的運用,對于中醫(yī)的科學(xué)本質(zhì)化研究有著深遠的意義。
【關(guān)鍵詞】：代謝組學(xué) 大鼠模型 代謝綜合征 痰瘀互結(jié)證
【學(xué)位授予單位】：遼寧中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R259;R-332
【目錄】：

• 中文論著摘要4-6
• 英文論著摘要6-9
• 英文縮略詞表9-10
• 前言10-12
• 論文一 痰瘀互結(jié)證代謝綜合征大鼠模型的復(fù)制12-21
• 材料與方法12-16
• 實驗結(jié)果16-19
• 討論19-20
• 小結(jié)20-21
• 論文二 痰瘀互結(jié)證代謝綜合征大鼠模型代謝組學(xué)研究21-38
• 材料與方法21-25
• 實驗結(jié)果25-32
• 討論32-37
• 小結(jié)37-38
• 結(jié)論38-39
• 本研究創(chuàng)新性的自我評價39-40
• 參考文獻40-42
• 附錄42-60
• 文獻綜述一 代謝綜合征中醫(yī)病因病機研究進展42-50
• 參考文獻48-50
• 文獻綜述二 代謝組學(xué)技術(shù)在中醫(yī)證候本質(zhì)研究中概況50-60
• 參考文獻57-60
• 個人簡介60-61
• 在學(xué)期間科研成績61-62
• 致謝62

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本文編號：919360