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胎兒骨髓MSCs中Bmi-1和p16基因表達(dá)與其復(fù)制老化的關(guān)系

發(fā)布時(shí)間:2017-09-20 15:45

  本文關(guān)鍵詞:胎兒骨髓MSCs中Bmi-1和p16基因表達(dá)與其復(fù)制老化的關(guān)系


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【摘要】:目的:探討胎兒骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)中Bmi-1和p16基因表達(dá)隨傳代次數(shù)增加的變化情況,闡明其與MSCs復(fù)制老化之間的關(guān)系。方法:取孕16、17和25周流產(chǎn)胎兒的股骨,利用貼壁培養(yǎng)法分離、培養(yǎng)、擴(kuò)增骨髓MSCs。采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)第5代MSCs中CD13、CD34、CD44、CD45、CD73、CD90、CD105、CD133和HLA-DR的表達(dá);連續(xù)傳代30代,誘導(dǎo)培養(yǎng)MSCs老化;用BrdU摻入率檢測(cè)第5(P5)、15(P15)和30代(P30)骨髓MSCs的增殖能力;采用Real-time PCR法檢測(cè)上述細(xì)胞中Bmi-1和p16基因mRNA的表達(dá)量。結(jié)果:從孕16、17和25周的流產(chǎn)胎兒股骨骨髓中均能分離、培養(yǎng)、擴(kuò)增出MSCs,均表達(dá)CD13、CD44、CD73、CD90和CD105,不表達(dá)CD34、CD45、CD133和HLA-DR;隨著MSCs的不斷傳代,細(xì)胞生長(zhǎng)速度逐漸減慢,細(xì)胞變成扁平狀,折光性下降。P5與P15MSCs的BrdU摻入率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),P30與P5和P15MSCs的BrdU摻入率比較均明顯降低(P0.05)。P5MSCs中Bmi-1mRNA表達(dá)水平高于P15和P30MSCs(P0.05),P15MSCs中Bmi-1mRNA表達(dá)水平高于P30MSCs(P0.05)。P5與P15 MSCs中p16mRNA表達(dá)水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),但P30 MSCs中p16mRNA表達(dá)水平明顯低于P5和P15MSCs(P0.05)。結(jié)論:胎兒股骨骨髓能培養(yǎng)出MSCs,其復(fù)制老化與Bmi-1的表達(dá)有關(guān)聯(lián),但其信號(hào)通路可能不通過(guò)p16INK4a-Rb介導(dǎo)。
【作者單位】: 揚(yáng)州大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院神經(jīng)內(nèi)科;首都醫(yī)科大學(xué)宣武醫(yī)院細(xì)胞生物室;
【關(guān)鍵詞】Bmi-基因 p基因 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 老化
【基金】:江蘇省衛(wèi)生廳科研基金資助課題(H201049)
【分類號(hào)】:R329.1
【正文快照】: 原癌基因Bmi-1是聚硫蛋白(polycomb groupgenes,PcG)家族重要的調(diào)節(jié)基因,在調(diào)節(jié)造血干細(xì)胞、神經(jīng)干細(xì)胞、腫瘤干細(xì)胞的自我更新和老化過(guò)程中起重要作用[1-4]。PcG作為上游調(diào)控基因,主要作用于下游的INK4a/ARF基因位點(diǎn),通過(guò)p16INK4a-Rb和ARF-p53通路影響細(xì)胞增殖和衰老[5-8]。

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 劉娜;李文磊;賈鵬;朱東亞;葉民;丁新生;;Bmi-1基因表達(dá)與人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖關(guān)系的探討[J];南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2008年06期

2 王芳;王e,

本文編號(hào):888939


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